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浙江理工大学生命科学学院生物技术系
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家蚕脂质运载蛋白基因BmLip32的特征与表达活性分析
2009年
从已构建的家蚕蛹期cDNA文库中筛选得到一条新的cDNA片断,经生物信息学分析发现其编码框具有脂质运载蛋白(lipocalin)保守结构域,命名为BmLip32基因,GenBank登录号为FJ602775。构建融合表达质粒pET-28a-BmLip32后转化大肠杆菌BL21并诱导表达,将纯化的His-BmLip32融合蛋白免疫新西兰大白兔成功制备多克隆抗体,效价大于1∶12 800。RT-PCR检测结果表明BmLip32在家蚕蛹期转录水平最高,在5龄幼虫头部中的转录水平明显高于其它组织。Western blotting分析结果显示BmLip32在5龄幼虫头部大量表达。免疫细胞化学实验显示BmLip32蛋白存在于家蚕Bm5细胞的细胞质中。推测BmLip32基因是家蚕神经系统发育相关的重要调控基因。
牛伟涛
李珊珊
聂作明
陈健
吕正兵
王丹
吴燕
吴怡
高攀
于威
盛清
沈红丹
张耀洲
关键词:
家蚕
表达活性
实时荧光定量PCR
免疫印迹
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