华南农业大学食品学院生物工程系
- 作品数：105 被引量：511H指数：13
- 相关作者：孙萍梁景龙张新超王秀旭魏鲁宁更多>>
- 相关机构：中国热带农业科学院热带生物技术研究所热带作物生物技术国家重点实验室中国热带农业科学院热带生物技术研究所中山大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学医药卫生更多>>
- 简便高质量的食用菌总RNA提取方法被引量：12
- 2008年
- STE法是针对食用菌多糖含量高而设计的一种提取食用菌总RNA的有效方法。本研究以灵芝、香菇和白腐真菌TR16菌株的菌丝体为材料,采用STE法提取其总RNA,同时以Trizol法作对照。结果表明:采用STE法提取的三种菌丝的总RNAA260/A280比值在1.80～2.10范围内,A260/A230略大于2.00;而Trizol法提取的总RNAA260/A280比值小于1.80,A260/A230小于1.90,明显比STE法效果差;总RNA电泳检测表明:STE法的3条带(28SrRNA、18SrRNA和5SrRNA)清晰,无拖尾,无杂带,效果比Trizol法好;将STE法提取的总RNA进行反转录后合成双链cDNA,进行预扩增,电泳显示呈弥散状;再进行选择性扩增,有相同或相异的条带。进一步表明STE法提取的总RNA质量较高,可以满足后续分子生物学研究的要求。
- 税丕容郑晓冰林俊芳郭丽琼
- 关键词：食用菌总RNA
- 甘氨酸甜菜碱对植物乳杆菌YSQ18的渗透压胁迫耐受性的影响被引量：3
- 2012年
- 从传统泡菜中分离出一株耐盐的酸菌,对其进行形态学、生理生化特性及16S rRNA序列分析鉴定,确定其种属地位;并初步研究相容性溶质甘氨酸甜菜碱在高渗透压环境下对所筛菌株的生长曲线和发酵糖耗速率的影响。结果表明:筛选出的乳酸菌中有一株符合乳杆菌属植物乳杆菌的鉴别特征,与16S rRNA序列鉴定和发育树分析结果一致。在含有1.2mol/L NaCl和1.5mol/L NaCl的化学合成培养基中,该植物乳杆菌的生长受到完全的抑制。在培养基中添加0.80mmol/L的甘氨酸甜菜碱对植物乳杆菌有较明显的保护作用,能减弱高渗胁迫,有效缩短迟滞期,提高耐盐能力。发酵中糖耗速率测定结果表明添加0.80mmol/L的甘氨酸甜菜碱能有效保持细菌活性。因此,在高渗环境发酵过程添加甘氨酸甜菜碱也许能有效提高微生物的活性,如传统的酿制酱油以及腌制泡菜等。
- 胡文锋余世琴袁尧李芬芳魏鲁宁刘秉杰杨益衡吴惠玲李铁桥陈永泉
- 关键词：植物乳杆菌甘氨酸甜菜碱相容性溶质
- 蛹虫草新型色素的研究进展被引量：9
- 2015年
- 蛹虫草[Cordyceps militaris(L)Link],又名北虫草,是一种菌虫复合体,是虫草属真菌的模式种。蛹虫草在其菌丝和子实体阶段能合成类胡萝卜素,其合成的类胡萝卜素大部分是稀有的水溶性类胡萝卜素和北虫草黄素。北虫草黄素作为一种天然色素,具有抗炎、抗癌、抗氧化等多种功效,可溶于水,着色效果好,在食品上有更广泛的应用空间,是亟待开发的一类具有活性功能的新型色素。本文就蛹虫草类胡萝卜素的产生、种类与性质、分离纯化和基因工程等研究状况进行了概括和归纳,希望能对后续的研究提供一些理论指导。
- 简锦辉郭丽琼叶志伟刘聪殷林林俊芳
- 关键词：蛹虫草
- 应用cDNA-AFLP技术分离草菇冷诱导表达基因被引量：25
- 2005年
- 采用cDNA-AFLP技术筛选获得了5个草菇冷诱导表达基因片段VC1、VC2、VC3、VC4和 VC5。测序结果表明,5个DNA片段大小分别为247bp、219bp、172bp、350bp和171bp。同源性BLAST 搜索结果显示,VC1、VC2、VC3、VC4和VC5片段目前都没有同源的核酸序列;VC1片段翻译的蛋白质序 列与粗糙脉孢菌(Neurosporacrassa)的假拟蛋白具有一定的同源性,VC2片段翻译的蛋白质序列与水稻的 AMP脱氨酶具有一定的同源性,VC3片段翻译的蛋白质序列与Daniorerio的糖原合酶激酶3α具有较高的 同源性,VC4片段翻译的蛋白质序列与Leuconostocmesenteroides的假拟蛋白有一定的同源性,VC5片段翻译 的蛋白质序列没有搜索到同源序列。
- 郭丽琼林俊芳杨丽卿刘瑞瑞
- 关键词：草菇CDNA-AFLP
- 芽孢杆菌种间原生质体融合选育高产Surfactin新菌株被引量：3
- 2019年
- 旨在获得纳豆芽孢杆菌和暹罗芽孢杆菌种间融合高产Surfactin的新菌株。以纳豆芽孢杆菌和暹罗芽孢杆菌为亲本菌株,通过制备纳豆芽孢杆菌和暹罗芽孢杆菌的原生质体,采用PEG介导的双亲灭活标记法融合原生质体,拟融合子通过PCR鉴定、CPC-BTB法高通量筛选、HPLC复筛以及融合菌株的稳定性验证获得高产Surfactin的新菌株。研究结果表明纳豆芽孢杆菌和暹罗芽孢杆菌的原生质体制备最佳酶解浓度分别为0.25mg/mL和0.2mg/mL,最佳酶解时间分别为25min和20min,其原生质体得率分别为83.1%和84.3%。两者的原生质体融合条件为:纳豆芽孢杆菌紫外灭活80min,暹罗芽孢杆菌85℃热灭活40min,融合体系为50%的PEG6000在38℃下融合时间15min。获得了遗传稳定的融合菌株F8,该菌株Surfactin产量相对于纳豆芽杆菌提高了33.3%,暹罗芽孢杆菌提高了60%。
- 潘旭耀魏韬谭柱豪林龙镇郭丽琼林俊芳
- 关键词：原生质体融合SURFACTIN
- 黄皮糯米酒的酿造工艺及香气成分的研究被引量：13
- 2009年
- 研究了不同比例黄皮与糯米混合发酵黄皮糯米酒的工艺及风味改善方法。结果表明,黄皮汁与糯米比例为6∶4,糯米糖化48h后添加黄皮汁,并接入酿酒酵母在20℃下进行乙醇发酵,于成熟的酒中勾兑黄皮皮渣蒸馏酒,不但使成品酒突出了黄皮果酒清新淡雅的香气和糯米酒酒香醇厚特点,还对黄皮皮渣进行了有效利用。采用气质联用技术(GC/MS)分析黄皮糯米酒香气成分的结果表明,既含有黄皮主体香,又含有糯米酒的香气成分。
- 詹金花杨幼慧吴孟才罗云珍区泽来
- 关键词：香气成分GC/MS
- 灰树花gpd-Gf启动子的功能分析被引量：4
- 2007年
- 利用从灰树花菌丝体中克隆的gpd-Gf(615bp)启动子片段串联于报告基因gfp上游,构建启动子功能活性检测表达质粒pGg-gfp。采用PEG介导法把表达质粒pGg-gfp与辅助质粒pCc1001(含有trp1基因)共转化进色氨酸营养缺陷型的灰盖鬼伞粉孢子的原生质体中。经过选择培养基筛选、假定转化子的分子鉴定以及GFP荧光检测,结果表明:灰树花gpd-Gf启动子在灰盖鬼伞菌丝中具有较强驱动gfp基因表达的活性,在荧光显微镜和共聚焦显微镜下可以观察到转化子菌丝发出的强烈荧光。
- 郭丽琼王秀旭舒薇柳永林俊芳
- 关键词：灰树花灰盖鬼伞共转化
- DBAT酶的同源建模及与多样性底物对接被引量：3
- 2018年
- 10-去乙酰巴卡亭Ⅲ乙酰基转移酶(DBAT)是紫杉醇生物合成途径中催化10-去乙酰巴卡亭Ⅲ生成巴卡亭Ⅲ的一个关键酶,由于其催化效率低,使得天然巴卡亭Ⅲ和紫杉醇含量都很低,紫杉醇细胞工厂的构建也受到严重制约。本研究利用MODELLER同源建模软件,构建了未报道晶体结构的DBAT三维结构模型,结合分子动力学模拟DBAT在稳定状态前后氨基酸的位置变化,分析关键氨基酸改变对酶催化活性的影响,获得位点His162和Arg365。利用虚拟定点突变和分子对接技术,推断His162为关键活性氨基酸残基,Arg365的空间位阻效应可影响催化反应过程。本研究为后续DBAT催化机理的解析提供潜在靶点,并为DBAT分子设计奠定基础。
- 黄佳俊林淑玲欧阳萍兰魏韬郑倩望叶志伟叶志伟林俊芳
- 关键词：紫杉醇同源建模分子对接
- 外界因子调控类胡萝卜素生物合成研究进展被引量：6
- 2016年
- 由于类胡萝卜素良好的生物活性和生理功能,近年来被广泛应用在食品、医药、营养保健等行业,为满足人类对类胡萝卜素的需求,有关类胡萝卜素合成调控的研究也越来越多。文章综述了光照、温度和诱导子等外界因子对类胡萝卜素生物合成的影响,期望在生产过程中通过外界调控来提高类胡萝卜素的产量。
- 殷林林俊芳叶志伟郭丽琼简锦辉
- 关键词：类胡萝卜素光照温度诱导子
- 灰树花固体发酵茶青的研究
- 2012年
- 以茶青为发酵培养基质,对灰树花固体发酵过程中的各种内含物含量的变化及其品质进行了研究。结果表明,灰树花的最佳发酵培养基成分及培养条件:中叶茶,2%大豆粉,接种量1%,培养温度25℃,培养时间9d。发酵后其菌质的有效成分为:茶多酚1.78%,游离氨基酸0.77%,酚氨比2.3,多糖4.69%。与发酵前比较其多糖含量增加了31.7%,茶多酚降解了77.8%,游离氨基酸降低了26.7%,酚氨比降低了69.9%,茶叶品质得到很大改善。
- 马立青郭丽琼林俊芳邹毓琳
- 关键词：多糖茶多酚氨基酸茶青
