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^(131)I标记抗肝癌单克隆抗体片段的内照射吸收剂量估算被引量：6: 2007年; 目的对给予^(131)I 标记抗肝癌单克隆抗体(简称单抗)片段[HAb18F(ab)_2]的志愿者进行脏器内照射吸收剂量估算。方法 2例志愿者静脉注射^(131)I-HAb18F(ab)_2后,分别于5、30 min和2、4、8、24 h 及2、3、4、6、10 d 共11个时间点收集血样,并分别于治疗后3、24 h 和2、4、8、16 d 进行SPECT 全身显像;对血样进行放射性测量,测定全身平面图像感兴趣区(ROI)计数;应用 SPSS 13.0软件对获得的数据进行曲线拟合;计算药物在各脏器的有效半衰期;估算各脏器的吸收剂量。结果^(131)I-HAb18F(ab)_2在人体各脏器内的有效半衰期为1.8～6.4 d,甲状腺的吸收剂量最大为28.5 Gy,其余脏器不超过3 Gy。结论该计算方法简便易行,可应用于内照射吸收剂量的估算。; 汪静施常备张庆王喜青王云雅李国权邓敬兰陈志南; 关键词：抗体单克隆碘放射性同位素放射免疫疗法

构建EpoR/LR-F3/HAb18GEF嵌合受体并在HEK293-16工程细胞株中定点整合表达: 2007年; 目的:构建EpoR/LR-F3/HAb18GEF嵌合受体,并在HEK293-16工程细胞株中定点整合表达。方法:用PCR法扩增肝癌相关抗原HAb18G胞外段基因,SacI/NotI双酶切后插入真核表达载体pCEL2f中,构建EpoR/LR-F3/HAb18GEF嵌合受体基因的重组表达载体pCEL2f/HAb18GEF,并经酶切和测序验证。将此重组表达载体与POG44载体(按1∶9的比例混合后),在阳离子脂质体介导下共转染HEK293-16工程细胞,用潮霉素B筛选定点整合表达EpoR/LR-F3/HAb18GEFcDNA的细胞克隆。用间接免疫荧光染色法、流式细胞术及Zeocin致死试验,检测并验证稳定表达株中EpoR/LR-F3/HAb18GEF嵌合受体的表达。结果:成功地构建pCEL2f/HAb18GEF真核重组表达载体,共转染后EpoR、HAb18GEF均高效表达于转染的HEK293-16细胞的胞膜上。经潮霉素B筛选得到12株可融合高表达EpoR/LR-F3/HAb18GEF的稳定株,其表达EpoR的阳性率为99.93%,平均荧光强度(MFI)为1036.39,表达HAb18GEF的阳性率为99.51%,MFI为652.72,且可被Zeocin致死。结论:成功地建立了表达EpoR/LR-F3/HAb18GEF嵌合受体的HEK293-16工程细胞株,为进一步利用哺乳动物蛋白质-蛋白质相互作用陷阱(MAPPIT)系统筛选HAb18G的作用受体奠定了基础。; 赵蒲张思河Jan Tavernier李郁陈志南; 关键词：定点整合表达

高表达CypA肝癌细胞系的建立及其功能初步研究被引量：2: 2010年; 目的:构建含人全长CypA cDNA的真核表达质粒,建立高表达CypA蛋白的肝癌细胞系,为进一步研究CypA在肝癌中的功能和作用机制提供细胞模型。方法:将人全长CypA cDNA序列克隆后,连接至真核表达载体pcDNA3.1中,再将构建的真核表达载体转染至FHCC98肝癌细胞中,经G418加压筛选后获得稳定表达CypA的肝癌细胞株;免疫印迹法检测目的蛋白的表达情况;MTT法测定细胞的增殖速率。结果:真核表达载体pcDNA3.1-CypA经酶切、测序鉴定,结果正确;免疫印迹结果显示,稳定转染后细胞的CypA表达水平显著高于空载体转染和未转染的细胞;与对照相比,稳定高表达CypA的细胞增殖速度加快。结论:成功构建了含有人全长CypA cDNA序列的真核表达载体pcDNA3.1-CypA;建立了稳定高表达CypA的FHCC-98肝癌细胞系;CypA的高表达可以促进FHCC98细胞的增殖。; 王宇姚辉温丽孙茜李郁刘文超; 关键词：亲环素A 稳定转染肝细胞肝癌细胞增殖

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第四军医大学基础医学部细胞生物学教研室