肖小璞 作品数:67 被引量:221 H指数:7 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院输血研究所 更多>> 发文基金: 四川省科技支撑计划 成都市科技计划项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 哲学宗教 化学工程 更多>>
测定凝血因子Ⅷ促凝活性的实验条件优化 1999年 凝血因子Ⅷ(FⅧ)促凝活性(FⅧ∶C)测定是确诊甲型血友病的主要方法,也是FⅧ制品(如冷沉淀、中纯FⅧ等)研制、开发和质控不可缺少的手段之一。但FⅧ∶C测定是一个受多种因素影响的实验。笔者参考文献[1,2]的测定方法,并以凝血实验的温育曲线稳定性为指... 肖小璞 杨显福 林芳昭 白文光 闻欣 周宇关键词:正交试验 改良凝胶吸附法制备的凝血酶原复合物 被引量:12 1997年 采用DEAE-SephadexA50和DEAE-SepharoseCL-6B凝胶从人血浆中吸附制备经S/D病毒灭活处理后的PCC制品,DEAE洗脱液经S/D处理(0.3%磷酸三丁脂和1%Twen80,6~8h,24℃)后,使所加入具有感染剂量(>106)的标志病毒VSV、Sindbis、HIV均被有效灭活;PCC制品中Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ因子的比活性(U/mg)分别为0.799±0.349、0.343±0.252、0.747±0.348、0.580±0.199(n=7),均比传统PCC提高1.5~2.5倍(其中FⅨ∶C的比活性提高有显著性,t=3.105,P<0.01),同时也优于国内同类制品(t=2.360,P<0.05),对其杂蛋白(AT-Ⅲ、Fn、PKA、Plg、ⅧR∶Ag抗A、抗B凝集素)的分析也反映出PCC纯度有所提高。SDS-PAGE、IE、CIE电泳图谱及HPLC层析图谱证实上述结果,PCC中TNBP残留量≤10μg/ml,Tween80残留量≤100μg/ml,均在安全范围内。 余蓉 刘文芳 赵青蓉 焦丽华 袁野 肖小璞 许淑清关键词:凝血酶原复合物 病毒灭活 缺凝血因子Ⅸ血浆的质量考察 1997年 缺凝血因子Ⅸ血浆*的质量考察610081中国医学科学院中国协和医科大学输血研究所肖小璞于李和丁卫闻欣周宇赵建阳周红1王海龄过去我国不能普遍开展凝血因子Ⅸ促凝活性(FⅨ∶C)检测的主要原因是,从重症乙型血友病人体内采集血浆非常不易,故难以获得缺凝血因... 肖小璞 李和 丁卫 闻欣 周宇 赵建阳 周红 王海龄关键词:血友病 单克隆抗体 血浆 正常凝血质控血浆质量考察 被引量:8 2007年 目的考察自制冻干正常凝血质控血浆的性能。方法测定连续3批自制血浆各凝血因子活性等指标,以考察制备工艺的稳定性与可靠性;以活化的部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)和pH为测定指标,评价正常凝血质控血浆的批内均一性和稳定性;同时以新鲜混合血浆为对照,将自制产品与进口试剂进行比较。结果连续3批自制血浆的APTT、PT、TT均在正常值范围内,pH值稳定,各凝血因子的活性均>0.80IU/ml。变异系数APTT为0.6%(n=20),PT为0.8%(n=20),TT为2.2%(n=20)。血浆复溶后,4℃冰箱和室温下放置,8 h内血浆的APTT、PT、TT及pH均保持了较好的稳定性,其中变化最大的APTT极差为2.26s。冻干血浆4℃及-20℃存放条件下,30个月内血浆的APTT、PT、TT及pH亦保持了较好的稳定性,其中变化最大的APTT极差为3.29s。以新鲜混合血浆为对照,自制的正常凝血质控血浆与新鲜混合血浆其APTT均值相差0.52s,TT均值相差1.0s,PT无明显差别;德国DADE BEHRING正常凝血质控血浆与新鲜混合血浆其APTT均值相差6.82s,TT均值相差3.2 s,PT无明显差别。结论自制的正常凝血质控血浆具有正常凝血特性,产品的稳定性和批内均一性良好,可满足作为凝血试验质控血浆的要求。 黄淑 孙小成 杨显福 肖玲 林方昭 赵青蓉 肖小璞关键词:凝血试验 质控血浆 应急输血的策略和措施 2010年 季阳 肖小璞 孙启凤 彭涛 刘晓明关键词:新鲜冰冻血浆 晶体液 输血指南 供血者 受血者 新鲜血浆 人凝血因子Ⅸ∶Ag酶联免疫测定法的建立 1997年 采用抗人凝血因子Ⅸ单克隆和多克隆两种抗体,建立了人凝血因子Ⅸ抗原(FⅨ∶Ag)酶联免疫测定法(ELISA)。标准曲线相关系数为0.993(P=0.001,n=5),测定范围(6.25~100)U/L,最低检测量1.5U/L;批内及批间变异系数分别为7.25%和4.73%,回收率99.7%;与人血浆中其它蛋白质未见交叉反应。测得20人份正常人血浆中FⅨ∶Ag为(1027±172)U/L,与FⅨ促凝活性(FⅨ∶C)测得值比较,差异无显著性(P>0.5)。重症乙型血友病人血浆FⅨ∶Ag测得值与临床诊断相符。 丁卫 肖小璞 李和 闻欣 周宇 王海龄关键词:凝血因子IX 酶联免疫法 单克隆抗体 血浆蛋白C的概述 被引量:11 2008年 张容 林方昭 赖翼 肖小璞关键词:血浆蛋白C 活化蛋白C 血栓调节素 人血浆蛋白C的酶联免疫测定法的建立 被引量:4 1995年 人血浆蛋白C(Human protein C,HPC)是维生素K依赖蛋白的一种,在调节血凝和纤溶过程中起着重要作用。HPC的缺乏,可以导致多种血栓性疾病,如静脉血栓、脑栓塞、新生儿突发性紫癜、严重中风和播散性血管内凝血(DIC)等。因此,在研究HPC缺乏的临床生理病理,以及在HPC制剂的制备和临床应用方面,HPC抗原(HPC:Ag)水平的检测都有着重要的意义。 国外目前采用3种方法测定HPC:Ag,即ELISA法、放射免疫测定法和火箭电泳法。放射免疫测定法所需仪器设备复杂,一般实验室难以开展;火箭电泳法特异性差,敏感性低,并且受抗血清制备规模的限制。 李和 于劼 肖小璞 王海龄关键词:酶联免疫测定 单克隆抗体 毛细管区带电泳用于血浆蛋白质混合物的分析 被引量:2 2012年 目的探索建立采用毛细管区带电泳(CZE)法分析血浆相关蛋白质的条件和方法。方法 1)以血浆COHN法组分Ⅳ(CFⅣ)抽提液为样品,代表蛋白质混合物,分别从波长、基本缓冲液、添加剂、PH、温度等方面,摸索CEZ分析蛋白质混合物的较优条件和方法;2)将摸索得到的较优条件下的CZE分析CFⅣ抽提液的结果,并与通过高效液相色谱(HPLC)法、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法及双向电泳(2-DE)法分析CFⅣ抽提液的结果比较;3)采用较优条件下的CZE法分析标准血浆、标准血浆经离子交换层析(IEC)的FⅧ粗提液等,考察该条件是否适用于血浆中的其他组分。结果 1)CZE法分析CFⅣ抽提液的较优条件为:20℃以214 nm紫外吸收波长,0.5 psi压力进样10 s,10 kV恒压分析50 min,缓冲体系为pH 9.0的0.04 mol/L硼酸硼砂、0.05%SDS、0.007 5%腐胺;2)采用此条件的CZE法分析CFⅣ得到14个蛋白峰、分析时间50 min,HPLC法分析得到10个蛋白峰、分析时间60 min,SDS-PAGE法分析得到11条蛋白条带、分析时间120 min,2-DE法分析得到14个蛋白点数(与CZE分析的蛋白峰数数量相同)、分析时间3 d;3)CZE法用于标准血浆、标准血浆经离子交换层析的FⅧ粗提液的分析可分别分辩出22和11个蛋白峰。结论以CZE法分析血浆相关蛋白混合物与现有分析方法比较,能达到较好的分析效果,经摸索确定的较优分析条件具有一定的通用性。 魏薇 李长清 林方昭 杜晞 张学俊 肖小璞关键词:毛细管区带电泳 血浆蛋白质 高效液相色谱 凝血因子Ⅶ的基因多态性与疾病相关性研究进展 凝血因子Ⅶ(FⅦ)作为外源性凝血途径的启动因子,在凝血机制中发挥着关键的作用,而FⅦ基因的突变又可导致常染色体隐性遗传病——FⅦ缺乏症。近年来,随着冠心病发病率的逐年增加,大量的临床和基础研究开始投向FⅦ与冠心病的关联上... 王丽洁 林方昭 肖小璞关键词:冠心病 发病机制 基因多态性