赵青蓉
- 作品数：20 被引量：55H指数：5
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院输血研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- 人凝血因子X单克隆抗体的研制及鉴定被引量：3
- 2002年
- 目的 用于提取高纯度凝血因子X(FX)和制备缺乏FX血浆 ,以及建立FX抗原的ELISA检测方法等 .方法 用较高纯度的FX免疫Balb/C小鼠 ,经过 2次基础免疫 ,1次加强免疫 ,3d后取其脾细胞与骨髓瘤SP2 /0 Ag14细胞在PEG作用下进行细胞融合 ,经间接ELISA法筛选杂交瘤细胞株 ,通过免疫印迹试验、交叉反应试验、相加试验和二价金属离子依赖性试验等 ,对单克隆抗体进行鉴定 .结果 经 3～ 4次克隆化后获得了 10株能稳定分泌FX单克隆抗体 (FXMcAb)的杂交瘤细胞株 ,Ig亚类均为IgG1型 ,小鼠腹水效价均在 10 6以上 ,FXMcAb只与FX抗原起特异性反应 ,FXMcAb与FX抗原的结合不同程度地依赖于二价金属离子Zn2 + .结论 所筛选出的FXMcAb为高纯度FX的提取和缺乏FX血浆的制备以及FX抗原的ELISA检测方法的建立 ,提供了试剂准备 .
- 林方昭肖小璞黄淑周昌华肖玲周宇赵青蓉李湘
- 关键词：凝血因子X抗原单克隆抗体杂交瘤细胞
- 改良凝胶吸附法制备的凝血酶原复合物被引量：12
- 1997年
- 采用ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ５０和ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ凝胶从人血浆中吸附制备经Ｓ／Ｄ病毒灭活处理后的ＰＣＣ制品，ＤＥＡＥ洗脱液经Ｓ／Ｄ处理（０．３％磷酸三丁脂和１％Ｔｗｅｎ８０，６～８ｈ，２４℃）后，使所加入具有感染剂量（＞１０６）的标志病毒ＶＳＶ、Ｓｉｎｄｂｉｓ、ＨＩＶ均被有效灭活；ＰＣＣ制品中Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ因子的比活性（Ｕ／ｍｇ）分别为０．７９９±０．３４９、０．３４３±０．２５２、０．７４７±０．３４８、０．５８０±０．１９９（ｎ＝７），均比传统ＰＣＣ提高１．５～２．５倍（其中ＦⅨ∶Ｃ的比活性提高有显著性，ｔ＝３．１０５，Ｐ＜０．０１），同时也优于国内同类制品（ｔ＝２．３６０，Ｐ＜０．０５），对其杂蛋白（ＡＴ－Ⅲ、Ｆｎ、ＰＫＡ、Ｐｌｇ、ⅧＲ∶Ａｇ抗Ａ、抗Ｂ凝集素）的分析也反映出ＰＣＣ纯度有所提高。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ＩＥ、ＣＩＥ电泳图谱及ＨＰＬＣ层析图谱证实上述结果，ＰＣＣ中ＴＮＢＰ残留量≤１０μｇ／ｍｌ，Ｔｗｅｅｎ８０残留量≤１００μｇ／ｍｌ，均在安全范围内。
- 余蓉刘文芳赵青蓉焦丽华袁野肖小璞许淑清
- 关键词：凝血酶原复合物病毒灭活
- 采用S/D法灭活病毒的新型凝血酶原复合物中试研制的初探被引量：4
- 1997年
- 以冰冻血浆为原料，按100L血浆／批中试规模采用有机溶剂／表面活性剂病毒灭活法制备凝血酶原复合物，并按《中国生物制品规程》（1990版）进行全面质检，结果显示在共计16个检测项目中，凝血酶活性、无菌、安全、抗HCV、抗HIV等10项指标合格率为100％（n＝6～8），热原、外观、水分合格率均为75％（n＝8），效价回收率（％）为62.56±11.56（n＝8），磷酸三丁酯和Tween80残留量分别小于10×10－6和100×10-6（n＝8）。初步提示实验室规模所建的新型凝血酶原复合物工艺用于大批量实际生产是可行的。
- 余蓉赵青蓉许淑清周宇
- 关键词：凝血酶原复合物有机溶剂表面活性剂灭活病毒
- 人血浆凝血因子Ⅶ单克隆抗体的制备与应用初探被引量：1
- 2011年
- 目的制备能稳定分泌人凝血因子Ⅶ(FⅦ)单克隆抗体的杂交瘤细胞株,纯化人FⅦ单克隆抗体并初步应用。方法 1)以纯化的人血浆FⅦ为抗原免疫BALB/c小鼠,用杂交瘤技术筛选出能分泌人FⅦ单克隆抗体的细胞株,用体内诱生法制备小鼠腹水,经硫酸铵沉淀、DEAE-affi-gel-blue凝胶层析纯化单克隆抗体;鉴定抗体的纯度和亚类、抗体与FⅡ、FⅨ、FⅩ的交叉反应性、二价金属离子对抗原抗体结合的影响等特性。2)将人FⅦ单克隆抗体连接到GoldMag-@磁微粒表面,检测连接效率;将磁微粒连接的抗体与FVⅡ反应,并用含有二价金属离子的缓冲液进行洗脱,探索用磁微粒-单克隆抗体免疫亲和吸附法纯化FⅦ的方法和可行性。结果 1)成功制备出22株分泌人FⅦ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为HFⅦ001～022;所选取的HFⅦ002、0040、050、130、140、21等6株细胞制备的纯化的抗体,其重链的亚类均为IgG1,除与FⅦ反应外,均不与FⅡ、FⅨ、FⅩ发生交叉反应,其中HFⅦ005可以抑制血浆FⅦ的凝血活性,HFⅦ0020、040、05与FⅦ的结合明显受Zn2+的抑制。2)上述6株细胞抗体与磁微粒的连接率为24.0%～94.7%,HFⅦ0020、050、13等3株细胞抗体连接磁微粒后可以结合FⅦ,对其中1株磁微粒连接抗体(HFⅦ005)进行试验显示:其结合的FⅦ在有Zn2+存在时能解离下来。结论制备出能分泌人血浆FⅦ单克隆抗体的杂交瘤细胞株并纯化出单克隆抗体;应用磁微粒-单克隆抗体免疫亲和吸附法,可以分离纯化人FⅦ。
- 徐世洲肖玲肖小璞赵青蓉侯玉香林方昭
- 关键词：单克隆抗体杂交瘤细胞株纯化
- 纤维蛋白原检测试剂的质量考察与评价被引量：1
- 2004年
- 目的 考察自制纤维蛋白原检测试剂质量。方法 用自制和进口纤维蛋白原检测试剂测定标准曲线及两种试剂对样品纤维蛋白原含量、不同稀释度正常参比血浆凝固时间的测定结果加以比较并考察自制试剂稳定性。结果 自制与进口试剂测定标准曲线相关系数r >0O - 0 .990O(P <0 .0 1 ) ,测定样品纤维蛋白原含量差异无显著性意义 (P >0 .0 1 )。同批或连续 3批试剂测定不同稀释度正常参比血浆凝固时间的变异系数 (CV) <5 %。稳定性试验显示 :试剂 4℃存放 2 .5年 ,37℃存放 1 0d相关指标无明显变化 ;试剂溶解后 4℃存放 1 4d ,2 2℃存放 8d和 37℃存放 8h ,凝血酶凝固活性无明显变化。
- 林方昭肖小璞孙小成黄淑杨显福吕福洪赵青蓉肖玲
- 关键词：纤维蛋白原试剂
- 新型凝血酶原复合物中凝血因子及潜在致血栓性杂蛋白的分析
- 1997年
- 凝血酶原复合物(PCC)是一种在临床上广泛用于治疗乙型血友病和由肝疾患、维生素K缺乏而继发的Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ因子缺乏症的血浆蛋白制品,传统的PCC存在病毒污染和潜在诱发血栓形成的高度危险性。本文对笔者所研制的经国际公认灭活病毒有效的有机溶济/表面活性剂(S/D)法处理的新型PCC及传统PCC进行了质量考察,重点对PCC的凝血因子活性及潜在致血栓性的杂蛋白进行分析探讨,结果显示新型PCC的Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ因子的比活性(u/mg)均比传统PCC约高1.5～2.5倍。同时也优于国内同类研制产品(P<0.05)。该结果提示随着新型PCC纯度的提高其相应的血栓副作用得以明显改善。此外,还对制品中与凝血抗凝及纤溶有关的杂蛋白进行了初探以进一步阐明新型PCC的血栓安全性。
- 余蓉赵青蓉肖小璞闻欣袁野许淑清
- 关键词：凝血因子活性血栓
- 凝血酶原复合物潜在致血栓性的实验研究被引量：2
- 1997年
- 凝血酶原复合物潜在致血栓性的实验研究＊６１００８１中国医学科学院中国协和医科大学输血研究所余蓉赵青蓉袁野许淑清华西医科大学药学院杜俊蓉传统工艺生产的凝血酶原复合物（ｐｒｏ－ｔｈｒｏｍｂｉｎｃｏｍｐｌｅｘｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅ，ＰＣＣ）在临床应用中存在...
- 余蓉赵青蓉袁野许淑清杜俊蓉
- 关键词：凝血酶原复合物致血栓性
- 新型凝血酶原复合物中抗A、抗B凝集素效价的分析被引量：1
- 1996年
- 新型凝血酶原复合物中抗Ａ、抗Ｂ凝集素效价的分析６１００８１中国医学科学院中国协和医科大学输血研究所余蓉宋宁赵青蓉凝血酶复合物制品（ＰＣＣ）在临床上广泛用于治疗乙型血友病和由肝脏疾患而继发的依赖维生素Ｋ凝血因子（ＦⅡ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ等）的缺乏症，国外对ＰＣ...
- 余蓉宋宁赵青蓉
- 关键词：PCC凝血酶原复合物抗A抗B凝集素
- 两种纤维蛋白原功能测定方法的比较被引量：7
- 2004年
- 目的 用自制凝血酶试剂 ,对两种纤维蛋白原 (Fib)功能测定方法进行比较 ,以期选择适用的方法。方法 采用世界卫生组织 (WHO)、英国国家生物标准及控制研究所 (NIBSC)推荐的Jocobsson法和美国国家临床检验标准委员会 (NCCLS)推荐的VonClauss法 ,对正常参比血浆、临床血浆样本及溶血、黄疸和脂浊血浆进行Fib测定。结果 两种方法测定临床血浆样本Fib含量有一定差异 ,P<0 .0 5 (n=1 0 ) ,VonClauss法测定值高于Jocobs son法 ;方法间精确度测定 ,其CV为 7.5 8%和 2 .1 3% ,测定正常参比血浆的平均回收率为 95 .2 1 %和 98.70 % ,测定线性范围的相关系数 >0 .999(P <0 .0 1 ) ,测定干扰物质的影响度范围在± 6 .2 %。结论 用自制凝血酶试剂 ,两种方法均显示出较好的精确度、准确度、线性范围和抗干扰能力。鉴于VonClauss法操作更简便快速 ,适用于全自动或半自动凝血仪测定 ,可作为Fib水平的常规测定方法。
- 林方昭肖小璞肖玲杨显福孙小成黄淑赵青蓉
- 关键词：纤维蛋白原纤维蛋白原测定
- 经S/D灭活病毒后新型凝血酶原复合物性质的研究被引量：2
- 1997年
- 对经有机溶剂／表面活性剂（S／D）处理后的新型凝血酶原复合物（PCC）与未经S／D处理的传统PCC进行对比分析，结果显示新型PCC不仅充分地保留了有效成分，且F-Ⅸ：C的比活性提高显著（P＜0．01）。经SDS－PAGE、IE、CIE电泳及HPLC分析均反映出新型PCC的纯度有所改善，NAPTT和TGt50实验结果显示新型PCC明显优于传统PCC（P＜0．05及P＜0．01）；采用兔Stasis模型进行Wessler试验，新型PCC的体内最小致血栓剂量＞43PE／kg，其ED50至少高于传统PCC2倍以上。
- 余蓉袁野肖小璞赵青蓉曾洁闻欣张鹏飞许素清
- 关键词：凝血酶原复合物生物制品
