魏浩澈
- 作品数：9 被引量：43H指数：3
- 供职机构：四川农业大学更多>>
- 发文基金：四川省科技支撑计划长江学者和创新团队发展计划四川省青年科技基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学理学更多>>
- 猪IL2基因重组对PPV VP2-PCV2 ORF2真核质粒免疫原性增强的研究被引量：1
- 2011年
- 将猪IL2成熟肽基因、PPV VP2基因和PCV2 ORF2抗原多肽基因定向克隆至真核表达载体pCI-neo,构建重组质粒pCI-ORF2-VP2和pCI-IL2-ORF2-VP2,用脂质体介导法将其转染PK15细胞,采用RT-PCR法和间接免疫荧光法检测重组质粒在体外的表达情况。并以小鼠为动物模型,分别将pCI-IL2-ORF2-VP2质粒、pCI-ORF2-VP2质粒、pCI空载体、猪细小灭活苗和圆环亚单位苗通过肌注进行免疫,检测免疫小鼠脾脏淋巴细胞转化功能,外周血T淋巴细胞亚群的动态变化及血清抗体效价。结果表明,重组质粒在体外能正常表达,pCI-IL2-ORF2-VP2免疫小鼠脾脏淋巴细胞转化功能,CD4+、CD8+T淋巴细胞的数量和血清PPV/PCV2抗体的OD值在二免后均高于或显著高于pCI-ORF2-VP2对照组。结果表明,猪IL2基因重组能显著增强VP2/ORF2核酸疫苗诱导的免疫应答。
- 魏浩澈徐志文徐凯郭万柱朱玲唐玉香陈燕凌
- 关键词：圆环病毒2型VP2基因ORF2基因
- 猪巨细胞病毒PCR检测方法的建立及应用被引量：2
- 2011年
- 参考GenBank中收录的猪巨细胞病毒(PCMV)DNA聚合酶基因序列设计合成了一对引物,扩增目的片段为236 bp。进行PCR检测方法的特异性、敏感性和重复性试验,建立了PCMV的PCR检测方法。结果表明,该方法对模板的最低检测量为1.1 pg,具有良好的特异性、敏感性和重复性。应用该法对猪同时感染PCMV和PRRSV相关性进行初步探究,36份PRRSV阳性病料中,PCMV检出率为63.89%。该法可用于PCMV的临床发病诊断和流行病学监测等。
- 刘红亮朱玲徐志文王燕群魏浩澈郭万柱赵玲
- 关键词：DNA聚合酶PCR
- A型流感病毒在猪群中的流行情况
- 2013年
- 根据病毒内部核蛋白（NP）和基质蛋白（M）抗原性的不同，流感病毒可分为A、B、C3种类型，其中A型是造成流行的主要病原。A型流感病毒广泛分布于世界各地的猪群中，通过猪体流感病毒可完成禽一猪一人的传播过程，已有很多文献记载其发生过多次种间传播。当前，科研工作者和公众对A型流感病毒的关注不仅仅限于兽医学意义，更在于其潜在的公共卫生意义。本文对现有的关于A型流感病毒在猪群中传播的报道进行回顾，同时着重阐述其在猪种群内和种群之间的传播途径和影响传播的因素。
- 魏浩澈季宏伟徐志文周远成陈蕾吴云飞
- 关键词：A型流感病毒猪群公共卫生意义基质蛋白种间传播
- 规模猪场猪蓝耳病与猪圆环病毒病综合防控实例分析被引量：7
- 2011年
- 自2006年以来,以高致病性猪蓝耳病病毒为主要病原的"猪高热病"及猪圆环病毒病席卷全国规模猪场,使规模猪场损失惨重。本文介绍了笔者在规模猪场防控猪蓝耳病及其并发、继发病的一个成功案例,供大家参考。
- 魏浩澈刘杰王敏胡秋炅朱玲
- 关键词：规模猪场蓝耳病圆环病毒病
- 重组猪干扰素α抗猪传染性胃肠炎病毒的研究
- 干扰素具有广谱的抗病毒和免疫调节活性，在机体抵抗外源病毒性病原的感染中发挥着重要作用。目前已有天然干扰素、原核或真核表达的重组干扰素应用于临床上病毒性疾病的治疗。猪重组干扰素使用大肠杆菌进行可溶性表达，所表达的干扰素具有...
- 魏浩澈
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒生物学活性
- 文献传递
- 一例由免疫抑制引起的猪瘟、副猪嗜血杆菌病的感染
- 2013年
- 针对一例某规模化猪场以保育猪发热及呼吸道症状为主要特征的传染病,根据其临床症状、病理变化并结合实验室病毒PCR检测、细菌分离及饲料霉菌毒素ELSA检测,初步诊断该病为饲料霉菌毒素超标;猪瘟病毒(CSFV),猪蓝耳病病毒(PRRSV)及副猪嗜血杆菌混合感染。最后,依据检测结果分析了此次疾病发生的原因,并提出相应的处理方案,治疗病猪、控制疫情。
- 魏浩澈季洪伟刘杰周远成朱玲
- 关键词：霉菌毒素免疫抑制
- 伪狂犬病病毒四川株的分离鉴定及增殖特性被引量：26
- 2013年
- 利用PK-15细胞从四川某猪场分离到1株病毒,经PCR检测、蚀斑纯化、病毒理化试验、血清学试验和动物回归试验证实,该分离株为伪狂犬病病毒(PRV),遂将其命名为PRV-SL;用其分别感染PK-15、Vero、Marc-145、Hela、BHK-21和MDBK细胞,观察病变情况及绘制PRV-SL株在不同动物细胞的一步生长曲线;用TCID50法检测PRV-SL株不同细胞毒的病毒效价。结果显示,PRV-SL株在细胞中均能增殖,但不同细胞之间CPE及病毒效价有所差异:PRV-SL株感染PK-15细胞的病毒效价最高;病毒一步生长曲线显示,PRV-SL株感染BHK-21细胞的隐蔽期最短,在猴源细胞(Vero、Marc-145)上增殖周期最长,增殖周期由短至长依次为BHK-21、MDBK、Hela、PK-15、Vero和Marc-145细胞。结果表明,PRV-SL株具有泛嗜性,在不同动物细胞上的增殖效价和增殖曲线具有明显差异,病毒在不同细胞上的增殖周期长短与病毒效价高低无相关性。
- 吴云飞朱玲徐志文周远成魏浩澈杨雪郭万柱
- 关键词：伪狂犬病病毒
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒SCM株ORF5基因抗原表位克隆表达及其免疫性研究
- 2010年
- 为鉴定猪繁殖与呼吸综合征病毒SCM株(PRRSV-SCM)囊膜糖蛋白GP5的免疫原性,利用RT-PCR方法从PRRSVSCM株ORF5中扩增大小为231bp的目的基因并构建表达载体PET32-GP5,将其转入大肠埃希菌Rosetta,运用IPTG通过条件优化诱导其表达.检测结果表明:最佳诱导条件为IPTG浓度1mmol/L在37℃下作用5h,表达大小约28kU的融合蛋白.通过Western-blot和间接酶联免疫吸附试验检测表达蛋白,结果显示该原核表达的融合蛋白可与PRRSV阳性血清发生反应,证明该蛋白具有免疫反应性.这为将来研制检测试剂盒以及后续研究PRRSV亚单位疫苗提供了重要依据.
- 魏浩澈徐志文漆信桥林华朱玲许雁峰郭万柱
- 关键词：ORF5抗原表位
- 猪环曲病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用被引量：4
- 2013年
- 根据GenBank中猪环曲病毒（porcine torovirus,PToV）N基因的保守序列,设计合成1对针对PToV的特异性引物,建立了基于SYBR GreenⅡ检测PToV的实时荧光定量RT-PCR方法。结果显示,该方法能很好地将PToV与猪伪狂犬病病毒、猪嵴病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、A群猪轮状病毒、猪瘟病毒、沙门菌和大肠杆菌区分开来,特异性强。检测PToV的N基因在8.65×101~8.65×108拷贝/μL范围内有很好的线性关系,其扩增相关系数为0.998 9,扩增产物的熔解曲线分析只有1个单特异峰。所建立的实时荧光定量RT-PCR方法组内变异系数为0.29%~1.30%,组间变异系数为0.45%~1.80%,重复性较好。利用该方法对采集自四川部分地区的43份临床样品进行检测,实时荧光定量RTPCR检出13份阳性样品,与常规PCR检测方法的阳性符合率为100%。结果表明建立的实时荧光定量RT-PCR方法特异性较强、灵敏度高,可用于该病的临床检测和流行病学调查。
- 周璐周远成魏浩澈付梦瑾刘骁季洪伟朱玲徐志文郭万柱
- 关键词：SYBR实时荧光定量RT-PCR
