刘富
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
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- TLR4/MyD88信号通路在树突状细胞-肾癌786-0细胞株融合瘤苗中的作用被引量：2
- 2011年
- 目的探讨TOLL样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)/髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)信号通路在树突状细胞(dentric cell,DC)-肾癌786-0细胞融合瘤苗中的变化及作用。方法用正常人外周血诱导不成熟的树突状细胞(immature dentric cell,imDC),利用聚乙二醇法(PEG)制成imDC-肾癌-786-0细胞融合瘤苗;用透射电镜观察imDC融合前后变化情况;RT-PCR检测单纯imDC组,肾癌786-0细胞组,imDC-肾癌-786-0融合瘤苗组在6、12、24、48 h中TLR4及MyD88 mRNA变化情况;用激光共聚焦检测imDC中核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)在融合前后转位情况;流式细胞仪检测imDC在融合前后CD86、HLA-DR变化;噻唑盐(MTT)法检测各组体外刺激T淋巴细胞的增殖能力及刺激的细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)的杀瘤活性。结果透射电镜显示融合细胞中imDC转变为mDC;TLR4及MyD88 mRNA在肾癌中不表达,在单纯imDC中呈低表达(TLR4/β-actin灰度比值0.40±0.03,MyD88/GAPDH灰度比值0.33±0.03),在融合瘤苗组中6 h表达最强(TLR4/β-actin灰度比值0.73±0.18,MyD88/GAPDH灰度比值为0.45±0.18),明显强于各组(P<0.05),此后在融合细胞中逐渐减弱,48 h基本不表达;激光共聚焦显示NF-κB在融合前位于imDC细胞质,融合后转移至细胞核;流式细胞仪提示融合瘤苗HLA-DR、CD86表达分别为81%、80%,明显高于imDC组(63%、59%)及肾癌细胞组(P<0.05);MTT法示融合疫苗在体外刺激T淋巴细胞增殖能力[D(570)值(1.95±0.22)]强于imDC组(1.31±0.35)及肾癌786-0组(1.28±0.33)(P<0.05),并且其诱导产生的CTLs对自体肾癌细胞具有显著的杀伤活性。结论 TLR4/MyD88-NF-κB信号通路在imDC与肾癌786-0细胞融合过程中促使树突状细胞成熟发挥了非常重要的作用,并且此信号通路能促使树突状细胞功能发生转变。
- 谭小军胡自力刘富
- 关键词：TOLL样受体4树突状细胞肾癌融合瘤苗核转录因子
- lncRNA AL513218.1在肾透明细胞癌中的作用及其机制研究
- 刘富
- 靶向survivin的siRNA对裸鼠肾癌移植瘤生长的影响
- 2011年
- 目的观察生存素(survivin)小干扰RNA(siRNA)在体内是否能抑制肾癌移植瘤体的生长。方法 BALB/c雌性裸鼠皮下种植786-O细胞,将成瘤阳性的裸鼠按照随机区组法分为8组(A^H组),每组5只。选取2组survivin序列特异性双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA),导入裸鼠皮下肾癌移植瘤。观察各组裸鼠体内瘤体生长速度,绘制肿瘤生长曲线,采用PCR、Western blot技术测定肿瘤组织的survivin基因表达水平,原位末端标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡。结果 A组(survivin1 siRNA+脂质体+纯RPMI1640)、B组(survivin2 siRNA+脂质体+纯RPMI1640)较其他对照组(C^H组)裸鼠皮下移植瘤生长缓慢;取出瘤体,肿瘤体积明显缩小(P<0.05),survivin基因表达下调(P<0.05),肿瘤组织标本可见大量细胞核呈黄褐色、核质浓缩、细胞形态不规则的凋亡细胞(P<0.01)。结论 RNA干扰明显抑制靶基因survivin在肾癌786-O细胞裸鼠皮下移植瘤中的表达及肿瘤细胞增殖,并诱导细胞凋亡,且特异性好。
- 刘富胡自力
- 关键词：肾肿瘤SURVIVIN
- 靶向survivin的siRNA对裸鼠肾癌移植瘤生长影响的实验研究
- 肾癌又称肾细胞癌/(Renal cell carcinoma,RCC/)、肾腺癌,是起源于肾小管上皮系统的恶性肿瘤。其发病率在泌尿系肿瘤中仅次于膀胱癌,而在肾癌中以透明细胞癌最多见。肾癌治疗目前仍以外科手术切除为主,对放...
- 刘富
- 关键词：786-0细胞肾癌SIRNA移植瘤肾癌
- 文献传递
