熊忠贤
- 作品数：4 被引量：14H指数：2
- 供职机构：广西民族大学更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金广西青年科学基金广西民族大学研究生教育创新计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 传染性法氏囊病病毒流行株的基因分型及代表株全基因组的序列测定
- 鸡传染性法氏囊病（Infectious Bursal Disease, IBD）是由鸡传染性法氏囊病病毒（Infectious Bursal Disease Virus, IBDV）引起雏鸡的急性、高度接触性、溶淋巴细胞...
- 熊忠贤
- 关键词：传染性法氏囊病传染性法氏囊病病毒基因重排基因分型全基因组
- 文献传递
- 传染性法氏囊病病毒的分离及其VP2高变区序列的比较被引量：2
- 2013年
- [目的]从病鸡中分离传染性法氏囊病病毒(IBDV),并对其VP2基因高变区序列进行比较。[方法]采用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)接种SPF鸡胚的方法分离到2株IBDV。对分离株(vVP2)进行扩增和序列测定,分析分离株的关键氨基酸位点特征,并与参考毒株相应序列进行同源性比较。[结果]2株分离株特征性位点的氨基酸为222A、249Q、254G、256I、279D、284A、294I和299S,属于wIB-DV的特征,与wIBDV参考株具有较高的同源性,其核苷酸和氨基酸同源性分别为96.0%～97.0%和98.7%～99.4%。从遗传进化树来看,2个分离株与参考的vvIBDV也在一个分支。此外,2个分离株表现出与该鸡场常用的疫苗株MB有较高的同源性,其核苷酸和氨基酸同源性分别为96.8%和98.1%,并在遗传进化树中同属于一个大分支,但其特征性位点的氨基酸明显不同。在其他氨基酸位点上,2个分离株均发生了D212N的特有变化。[结论]该鸡群感染的IBDV具有vvIBDV的分子特征,并发生了与疫苗株和参考株不同的分子变化。
- 张华智杨霖熊忠贤何秀苗韦平
- 关键词：传染性法氏囊病病毒超强毒株分子特征RT-PCR
- IBDV荧光定量RT-PCR检测方法的建立及其应用被引量：7
- 2013年
- 研究根据传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因序列设计了两条引物,通过RT-PCR技术对IBDV的VP2进行扩增,构建IBDV-VP2的标准品质粒,建立基于IBDV-VP2基因的荧光定量RT-PCR检测(QRT-PCR)技术和标准曲线,并检测该QRT-PCR体系的特异性、灵敏度和重复性,最后将该QRT-PCR体系应用于鸡外周血淋巴细胞(PBLs)中IBDV超强毒株(vvIBDV)复制规律以及临床样品的检测。结果表明,建立的QRT-PCR体系特异性好,不能与NDV、IBV及FAV1等发生反应,敏感度为1.51×101拷贝数/μl,扩增效率达1.018,重复性试验组内变异系数和组间变异系数均小于0.5%;在vvIBDV感染后6 h收获的细胞含病毒基因组拷贝数最高,对IBD疑似病例的检测敏感度高于套式RT-PCR技术。表明建立的反应体系特异、灵敏度高,并具有很好的稳定性,可应用于病毒复制水平的检测和临床样品的检测。
- 何秀苗甘珊珊甘珊珊熊忠贤禤金彩廖艳娟
- 关键词：鸡传染性法氏囊病荧光定量RT-PCR
- 鸡传染性法氏囊病病毒流行株VP1部分序列及VP2高变区序列分析被引量：6
- 2013年
- 为了对鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的13个地方分离株与3个商品疫苗株的VP1-b基因(756 bp～1 522 bp)进行同源性和遗传进化分析,本研究对其进行RT-PCR扩增和序列测定。结果表明,获得的VP1-b基因长度均为767 bp;13个分离株VP1-b节段核苷酸和氨基酸同源性分别为90.7%～100%和72.9%～100%,其中10株超强毒分离株与经典株、弱毒株、疫苗株的同源性较高,核苷酸和氨基酸同源性分别为95.7%～100%和94.5%～100%,所有12个超强毒分离株与超强毒参考病毒株的同源性均较低,核苷酸同源性仅为68.2%～79.2%;在遗传进化分析中,所有病毒株被分为3个分支,与相应病毒株的基于IBDV-VP2高变区(vVP2)序列的遗传进化树比较并结合同源性分析结果表明,除了弱毒株HUN0804之外,其它12个分离株可能均为重组病毒。据此推测,基因重组可能是目前IBDV流行的新趋势。
- 熊忠贤何秀苗杨霖戴书剑韦平刘红全
- 关键词：传染性法氏囊病病毒VP1遗传进化分析
