王晗
- 作品数：6 被引量：74H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脐带源间充质干细胞的分离和生物学性状被引量：44
- 2006年
- 目的建立从脐带分离间充质干细胞的方法,并研究其生物学性状。方法脐带经酶消化后于DMEMLG/F12培养基中培养,倒置显微镜及电镜观察细胞形态学,细胞计数绘制细胞生长曲线,计数成纤维细胞集落形成单位(CFUF),流式细胞仪测定细胞周期及细胞免疫表型,免疫组织化学染色及RTPCR检测其体外诱导成脂肪和成骨分化的能力,RTPCR检测其细胞因子的分泌,与脐血来源CD34+细胞共同培养检测其支持造血的能力。结果经酶消化后,每cm脐带可得到中位数为1.01×106的有核细胞,CFUF产率为1/1609有核细胞,经贴壁传代可分离出成纤维样细胞,细胞倍增时间为(28.02±10.53)h。流式细胞仪分析细胞周期显示,>80%的细胞处于G0/G1期,S+G2+M期的细胞仅占(13.04±4.31)%。免疫表型分析显示,CD13、CD29、CD44、CD105(SH2)、CD73(SH3)、CD166和MHCI阳性,CD45、CD34、CD38、CD31和MHCⅡ阴性。体外诱导实验证实,该细胞具有成脂肪和成骨分化的能力。RTPCR显示,该细胞表达干细胞因子、血小板生成素,酪氨酸激酶受体配基、白细胞介素6、巨噬细胞集落刺激因子、白血病抑制因子、基质细胞衍生因子和血管内皮细胞生长因子,不表达白细胞介素3。与脐血来源CD34+细胞共同培养2周可见鹅卵石形成区,共培养8周证实其支持长期造血能力。结论建立从脐带中分离间充质干细胞的方法,脐带是间充质干细胞的新的来源。
- 吕璐璐刘拥军许贞书王彤张浪辉朱雄鹏梁琳慧王晗陈志哲韩忠朝
- 关键词：间充质干细胞脐带多能干细胞
- 人促血液血管细胞生成素对造血干细胞与人脐静脉内皮细胞之间粘附功能的影响
- ＜正＞目的人血液血管细胞生成素（Hemangiopoietin,HAPO）是我室分离和克隆的一种新的促造血干细胞和血管内皮细胞存活和增殖的细胞因子,对小鼠有放射保护作用。本文研究了HAPO对造血干细胞（HSC）与人脐静脉...
- 王晓静刘拥军卢士红梁琳慧王晗韩忠朝
- 文献传递
- 缺氧诱导因子-1与细胞凋亡被引量：23
- 2005年
- 缺氧诱导因子 1(HIF -1)是一种主要由缺氧诱导细胞产生的重要的转录因子。HIF- 1的表达水平与糖酵解、细胞周期阻滞、细胞生存与增殖、血管新生、血管舒缩、红细胞生成、肿瘤生长,转移以及肿瘤多药耐药等许多生命活动密切相关。HIF- 1通过调控凋亡相关基因的转录在促细胞凋亡和抗细胞凋亡中都发挥着重要的作用。
- 王晗韩忠朝
- 关键词：缺氧诱导因子-1细胞凋亡抗细胞凋亡
- RNA干扰沉默HIF-1α对人乳腺癌细胞功能的影响
- 目的:研究靶向针对缺氧诱导因子-1 α（HIF-1 α）的短发夹RNA（shRNA）对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞功能的影响。方法:通过在细胞培养中加入150 μ mol／ L氯化钴（CoCl2）模拟低氧环境。采用RNA...
- 韩之波王晗任贺赵辉刘拥军韩忠朝
- 关键词：缺氧诱导因子-1ΑRNA干扰人乳腺癌细胞系
- 文献传递
- RNA干扰沉默缺氧诱导因子-1α对人乳腺癌细胞功能的影响被引量：6
- 2006年
- 目的研究靶向针对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的短发夹RNA(shRNA)对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞功能的影响。方法氯化钴模拟低氧环境。采用RNA干扰技术,构建针对HIF-1α的shRNA真核表达载体,转染MCF-7细胞。RT-PCR检测RNA干扰后MCF-7中血管内皮生长因子(VEGF)表达的变化。实时定量PCR和Westernblot技术分别检测HIF-1αmRNA和蛋白质水平。Sub-G1测定、AnnexinⅤ荧光标记和DNAladder检测细胞凋亡。流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果缺氧后,MCF-7中的HIF-1α表达增加(P<0.01),而凋亡率较常氧降低(P<0.05)。shRNA转染MCF-7后,HIF-1α的表达下调91.63%(P<0.01)。阿糖胞苷诱导或无凋亡诱导剂时,干扰组凋亡率比未转染组分别增高1.75倍(P<0.01)和61.31倍(P<0.01)。与未转染组相比,干扰组中的VEGF下调66.8%(P<0.05)。干扰组细胞周期进程也较未转染组减缓。结论HIF-1α在MCF-7中发挥抗细胞凋亡的作用。本室构建的针对HIF-1α的shRNA能够促进MCF-7凋亡,下调VEGF表达,推迟细胞周期。
- 王晗刘拥军韩之波梁琳慧吕璐璐韩忠朝
- 关键词：缺氧诱导因子-1Α短发夹RNA人乳腺癌细胞系
- 人促血液血管细胞生成素对内皮细胞粘附功能的影响被引量：1
- 2006年
- 目的研究人促血液血管细胞生成素(HAPO)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)粘附功能的影响。方法采用结晶紫粘附实验、流式细胞术和半定量RT-PCR方法检测HUVEC的粘附性和粘附分子CD54、CD102、CD106、CD31、CD62E和CD62P的表达。结果HAPO以剂量依赖性方式增加HUVEC的总粘附性。HAPO能显著促进HUVEC表面粘附分子CD106和CD62E表达,并呈时间依赖性。HAPO作用HUVEC6h后,CD106和CD62E的阳性率分别为(80·83±2·22)%和(22·77±2·59)%,是各自对照组的2·10倍和5·84倍,且转录水平和蛋白质水平一致。CD106和CD62E的最高转录水平分别为对照组的1·86倍和6·16倍。结论HAPO可能对造血干/祖细胞归巢有一定促进作用。
- 王晓静刘拥军卢士红梁琳慧王晗韩忠朝
- 关键词：粘附分子内皮细胞
