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王礼平
作品数:
3
被引量:9
H指数:1
供职机构:
苏州大学附属第二医院
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发文基金:
江苏省自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
阳东荣
苏州大学附属第二医院
单玉喜
苏州大学附属第二医院
薛波新
苏州大学附属第二医院
孙承文
苏州大学附属第二医院
许立军
苏州大学附属第二医院
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作者
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1篇
2013
2篇
2012
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微小RNA-494过表达与RNA干扰抑制Survivin基因对前列腺癌移植瘤生长的比较
被引量:1
2013年
目的比较过表达微小RNA(microRNA)-494与采用RNA干扰抑制前列腺癌PC.3细胞中Survivin基因的表达,对前列腺癌移植瘤生长的影响。方法将过表达mieroRNA-494的腺病毒载体Ad494及负载Survivin短发卡RNA(shRNA)腺病毒载体Ad-sur分别或联合感染PC-3细胞后,将相应PC-3细胞接种于裸鼠右前肢皮下,建立前列腺癌移植瘤模型。并以磷酸盐缓冲液(PBS)组及空载体组(Ad-GFP)作为对照。动态测量肿瘤体积。55d后处死各组裸鼠,瘤体称重计算抑瘤率。Westernblot检测肿瘤组织中Survivin表达变化。免疫组织化学测定Survivin、B淋巴细胞/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关x蛋白(bax)及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3表达变化。结果Ad-sur组、Ad-494组、Ad-sur+Ad-494组裸鼠前列腺癌移植瘤的生长明显被抑制。第35天时即表现差异。其中Ad-sur+Ad-494组瘤体积最小,为(40.69±0.69)mm3,Ad-sur、Ad-494组瘤体体积分别为(102.11±5.32)mm3、(99.03±3.50)mm3,3组肿瘤体积均明显小于PBS组(572.72±10.46)mm3、Ad.GFP组(544.85±10.28)mm3(P〈0.05)。但Ad-sur组与Ad_494组间瘤体大小差异无统计学意义(P〉0.05)。55d后,Ad-sur、Ad-494、Ad-sur+Ad-494组对移植瘤抑制率分别64.62%、65.98%、86.67%,Ad-sur+Ad-494组具有抑瘤增效的相加作用(Q=0.99)。同对照组比较,实验各组的Survivin基因均表达下降,差异有统计学意义(P〈0.05)。其中,Ad-494组与Ad-sur组间差异无统计学意义(P〉0.05),Ad.sur+Ad-494组较Ad-494、Ad-sur组更为显著;实验各组中的bax、Caspase-3表达上调,bcl-2表达下调,且Ad-sur+Ad-494组效果优于Ad-sur、Ad-494组。结论过表达microRNA-494与RNA干扰方法均可抑制前列腺癌裸鼠移植瘤Survivin基因表达,从而抑制移植瘤的生长,且两者联合效果更加显著。
孙承文
王礼平
臧亚晨
薛波新
单玉喜
许立军
阳东荣
关键词:
前列腺癌
SURVIVIN
基因疗法
RNA干扰
微小RNA-494通过抑制Survivin诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡
被引量:9
2012年
目的观察微小RNA(miRNA)-494对人前列癌Pc-3细胞中Survivin基因的表达抑制及对Pc-3细胞增殖与凋亡的影响。方法TargetScan5.2预测miRNA-494与SurvivinmRNA配对评分为mjrSVR score:-0.4916、PhastConsscore:0.4876;定量聚合酶链反应(qPCR)分析PC-3相对于正常前列腺上皮细胞株RWPE-1中miRNA-494的上下调情况;构建过表达miRNA-94的腺病毒载体,应用逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)、Westernblot、噻唑蓝(MTT)法、流式细胞仪分析分别检测感染前后Survivin基因及蛋白的表达差异、细胞增殖及生长周期和凋亡变化。结果miRNA-494在PC-3中的表达为RWPE-1中的(0.547±0.032)倍;Ad—pre—miRNA-494构建成功;实验组细胞增殖抑制呈现时间依赖性;和对照组比较,72h后实验组Survivin蛋白表达为(21.69±4.62)%,与空载体组比较,差异有统计学意义(P〈0.01),流式细胞仪检测结果显示实验组Pc-3细胞G2/M期阻滞率及细胞凋亡率显著增加。结论miRNA-494通过抑制前列腺癌PC-3细胞中Survivin基因的表达而诱导前列腺癌PC-3凋亡。
王礼平
阳东荣
单玉喜
薛波新
孙承文
关键词:
SURVIVIN
前列腺癌
基因治疗
表达生存素相关microRNA-494基因腺病毒载体的构建
2012年
目的构建表达生存素(survivin)相关microRNA-494基因的重组腺病毒载体。方法应用生物学软件Targetscan 5.2对microRNA-494基因与survivin mRNA作相关性分析。RT-PCR调取目的基因,将其连接线性化后的穿梭质粒载体,联合骨架质粒转染入293细胞后同源重组产生重组腺病毒载体。PCR及测序验证重组质粒,荧光显微镜下观察腺病毒荧光蛋白表达。结果重组腺病毒载体构建成功。结论成功构建了重组腺病毒载体,可用于研究其在前列腺癌PC-3细胞中对survivin基因表达的影响。
王礼平
阳东荣
单玉喜
薛波新
孙承文
关键词:
腺病毒载体
生存素
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