王静雪
- 作品数：19 被引量：14H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 微小RNA miR-125b真核表达载体的构建及其对细胞增殖的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:构建微小RNA125b(miR-125b)真核表达载体,研究其过表达后对细胞增殖的影响。方法:以pcDNA3.1(-)-myc-his载体为模板,PCR扩增CMV启动子,克隆入pHRS-1cla-EGFP慢病毒载体,构建pHRS-1cla-CMV-EGFP载体;以从人全血中提取的基因组DNA为模板,PCR扩增pri-miR-125b序列,将其克隆到pHRS-1cla-CMV-EGFP载体中,构建pHRS-1cla-miR125b-CMV-EGFP慢病毒表达载体;将pHRS-1cla-miR125b-CMV-EGFP表达载体瞬时转染入293FT细胞,用实时定量PCR技术对miR-125b在转录水平的表达进行检测,用MTT及Brdu法检测miR-125b过表达后对293FT细胞增殖的影响。结果:构建的pHRS-1cla-miR125b-CMV-EGFP真核表达载体经质粒酶切和测序鉴定正确,转染细胞后72h经实时定量PCR检测,成熟miR-125b表达上调约750倍(P<0.01),说明其能有效高表达,MTT及Brdu法检测显示细胞增殖受到明显抑制(P<0.01)。结论:构建了pHRS-1cla-miR-125b-CMV-EGFP慢病毒真核表达载体,转染293FT细胞后能高效表达成熟miR-125b,同时证明过表达miR-125b能使细胞的增殖受到非常明显的抑制。
- 曾泉谢小燕赵爱华王静雪陈琳岳文裴雪涛
- 关键词：微小RNA真核表达载体细胞增殖
- 小分子化合物Me6TREN促进小鼠骨髓中造血干/祖细胞的增殖被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨小分子化合物Me6TREN对小鼠骨髓中造血干/祖细胞的增殖作用。方法:采用细胞计数、细胞集落形成能力检测、流式细胞术检测细胞表面标志等实验技术,观察Me6TREN对小鼠骨髓细胞的影响。结果:皮下注射Me6TREN 12 h后,Me6TREN组的集落形成能力、造血干/祖细胞表面标志lin-Sca-1+c-Kit+的比例均明显高于对照组;在体外分离培养的小鼠骨髓单个核细胞,4 d后Me6TREN组细胞的集落形成能力及造血干/祖细胞的增殖能力均高于对照组。结论:Me6TREN对小鼠骨髓造血干/祖细胞有一定的促增殖作用。
- 杨舒张静张静王思涵范增王静雪韩毅田宇何丽娟陈琳岳文李艳华
- 关键词：扩增
- 高糖对肾组织干细胞基本特征的影响
- 2015年
- 目的评估高糖对肾组织干细胞(KSC)基本特征的影响。方法分离肾乳头处KSC,比较其在高糖(30 mmol/L)和正糖(5.6 mmol/L)培养基的微环境下细胞形态、增殖能力、相关表型标记物的改变。结果细胞增殖检测结果提示从第4天开始高糖组细胞生长较正糖组缓慢;免疫荧光结果提示KCS经高糖处理后,纤维连接蛋白、Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原的合成增加;q RT-PCR检测结果显示KSC经高糖干预后,纤维连接蛋白、Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原m RNA表达增高,间质标记物?-SMA、Vimentin基因表达进一步升高,促纤维化因子TGF-?、CTGF、PAI-1 m RNA表达均升高。结论 KSC在高糖的微环境中细胞增殖能力下降,促纤维化基因表达增高。
- 杨光程庆砾李春霖贾雅丽王静雪岳文裴雪涛刘洋杨勇
- 关键词：细胞增殖高糖细胞表型
- Spindlin1和Aurora-A激酶相互作用的研究
- 恶性肿瘤是严重危害人们健康生活的疾病,死亡率居高不下,寻求新的肿瘤相关基因,具有重要的理论与社会意义。在早期研究中,我们对人卵巢癌相关基因进行了筛选和研究,克隆、鉴定并命名了人Spindlin1基因,该基因与小鼠spin...
- 王静雪
- 关键词：卵巢癌有丝分裂AURORA-A激酶生物学特征
- 文献传递
- 泊洛沙姆在诱导造血干祖细胞增殖和/或巨核分化中的用途
- 本发明公开了泊洛沙姆在诱导造血干祖细胞增殖和/或巨核分化中的用途。在造血干祖细胞增殖和/或巨核分化体系中添加泊洛沙姆，能够诱导、促进造血干祖细胞增殖和/或巨核分化，且增殖快，巨核分化效率高。
- 裴雪涛陈琳谢小燕岳文张秀媛吕洋王静雪刘大庆李艳华何丽娟姚海雷曲洺逸
- 文献传递
- 泊洛沙姆在诱导造血干祖细胞增殖和/或红系分化中的用途
- 本发明公开了泊洛沙姆在诱导造血干祖细胞增殖和/或红系分化中的用途。在造血干祖细胞增殖和/或红系分化体系中添加泊洛沙姆，能够诱导、促进造血干祖细胞增殖和/或红系分化，且增殖快，红系分化效率高。
- 裴雪涛陈琳谢小燕李艳华岳文刘大庆习佳飞张秀媛吕洋王静雪何丽娟房芳曾泉
- 文献传递
- 微环境调控干细胞增殖分化的作用机制及其应用基础研究
- 裴雪涛岳文李艳华贾雅丽周军年曾泉南雪王韫芳张静裴海云陈琳秦立篷王静雪习佳飞阎新龙
- 该成果属于基础医学研究领域。干细胞研究与应用是生物医药领域国际竞争的热点，但其应用中依然面临着干细胞安全高效地扩增和诱导分化、治疗安全性和有效性等一系列问题。微环境是干细胞发育的土壤，其在干细胞增殖分化、功能发挥以及疾病...
- 关键词：
- 关键词：细胞增殖
- Spindlin1与Aurora-A激酶相互作用的研究
- 恶性肿瘤是严重危害人们健康生活的疾病，死亡率居高不下，寻求新的肿瘤相关基因，具有重要的理论与社会意义。在早期研究中，我们对人卵巢癌相关基因进行了筛选和研究，克隆、鉴定并命名了人Spindlin1基因，该基因与小鼠spin...
- 王静雪
- 关键词：AURORA-A信号通路磷酸化
- 文献传递
- 高效诱导人胚胎干细胞成为内皮祖细胞
- 2013年
- 血管的发生和发育不仅对胚胎形成中各器官的发育分化十分重要,并且对成体的创伤修复和生殖功能也具有重要意义.血管内皮细胞是形成心血管封闭管道系统的形态基础,体外多种细胞可经诱导分化产生出内皮祖/内皮细胞(endothelialprogenitor/endothelial cells,EPCs/ECs),但是存在一些不足.鉴于人类胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)诱导分化的全能性和长期增殖能力,为EPCs/ECs提供了新的来源.现有文献报道,hESCs诱导分化为EPCs/ECs的比例较低,为了提高该诱导分化效率,我们使用分阶段的二维诱导方法,首先将细胞接种在超纯层纤连蛋白(Matrigel)上,之后通过在不同阶段添加不同的因子,最终获得CD31+KDR+细胞的比例可以达到16%.进一步内皮诱导分化的结果显示,获得的EPCs/ECs的比例可以达到约32%,这些细胞具有在Matrigel上形成血管样结构的能力,可结合植物凝集素.实时定量PCR的结果显示,诱导分化所得的细胞表达众多内皮相关基因,并且免疫荧光的结果也表明部分细胞表达内皮细胞特异性表面标志CD31.
- 房芳张博文何丽娟周军年王静雪岳文谢小燕裴雪涛
- 关键词：人胚胎干细胞内皮细胞诱导分化
- 脐带血造血干/祖细胞体外分化为不同阶段红系祖细胞的动力学观察被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨体外培养脐带血单个核细胞定向诱导分化为不同阶段红系祖细胞的动力学变化情况。方法:用0.5%甲基纤维素沉降脐带血红细胞及人淋巴细胞分离液密度梯度离心法得到单个核细胞,在含EPO、SCF、IGF-1等细胞因子的无血清培养体系中诱导其定向分化为红系祖细胞,观察细胞增殖、存活率、细胞集落形成情况,并检测不同阶段细胞红系特异性表面标志CD71和CD235a的表达。结果:随着培养时间的延长,细胞数逐渐增多,14 d细胞可扩增140倍左右,收集诱导后的细胞进行瑞氏吉姆萨染色,可见大量红系祖细胞,诱导后的细胞集落形成能力强,形成的克隆大部分为红系集落。诱导过程中,14 d前CD71、CD235a的表达逐渐增高。按细胞表面标志表达的不同可将诱导的细胞分为4群,分别对应红系祖细胞的不同阶段;随着诱导天数的增加,各时间点细胞对应的早期红系祖细胞群(P2、P3)比例逐渐下降,中晚期红系祖细胞群(P4、P5)的比例逐渐上升。结论:无血清培养基添加细胞因子组合的红系诱导培养体系可较好地诱导扩增红系祖细胞,流式分选可获得相对均一而处于不同分化阶段的红系祖细胞群体。获得了红系祖细胞体外分化的动力学数据,为今后进一步优化红系诱导分化体系获得均一的红系祖细胞奠定了基础,并对未来利用干细胞制备均一的红系祖细胞应用于临床治疗有一定的指导作用。
- 王金明习佳飞曲洺逸王静雪刘一鸣陈琳谢小燕李艳华南雪岳文裴雪涛
- 关键词：脐带血红系祖细胞单个核细胞细胞动力学
