郭伟雄
- 作品数：5 被引量：11H指数：1
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- BMSCs条件培养基改善地塞米松对成骨细胞成骨功能抑制效应的研究
- 2016年
- 目的探讨BMSCs的旁分泌作用对地塞米松所致成骨细胞成骨功能抑制作用的影响。方法首先通过培养小鼠BMSCs 24 h制备无血清条件培养基备用。将小鼠MC3T3-E1细胞株复苏并传至第3代用于实验,分为4组:A组为对照组;B组于细胞中添加1μmol/L地塞米松;C组于细胞中按1∶1比例添加1μmol/L地塞米松和BMSCs条件培养基;D组仅添加BMSCs条件培养基。培养24 h后收集细胞测定ALP含量,Western blot测定细胞内RUNX2、骨钙素(Osteocalcin)蛋白表达,实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-q PCR)测定细胞内α1-Ⅰ型胶原(collagen typeⅠ-α1,COL1A1)、RUNX2、ALP、Osteocalcin基因表达;21 d后行茜素红染色观察钙结节形成情况。结果培养24 h后,B、C、D组ALP含量均显著低于A组,B组低于C、D组(P<0.05),C、D组间差异无统计学意义(P>0.05)。Western blot检测示,B组RUNX2蛋白相对表达量显著低于A、C、D组(P<0.05),A、C、D组间比较差异无统计学意义(P>0.05);B组Osteocalcin蛋白相对表达量均显著低于A、C、D组,A、C组低于D组(P<0.05),A、C组间差异无统计学意义(P>0.05)。RT-q PCR检测示,B、C、D组RUNX2、Osteocalcin、COL1A1、ALP基因相对表达量均显著低于A组(P<0.05);D组RUNX2、Osteocalcin、ALP基因相对表达量均显著高于B、C组,C组显著高于B组(P<0.05);D组COL1A1基因相对表达量显著高于B组(P<0.05),B、C组间及C、D组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。培养6 d时A组细胞死亡;21 d时B、C、D组均可见钙结节阳性染色,且逐渐增强。结论小鼠BMSCs条件培养基能改善地塞米松对成骨细胞成骨功能的抑制效应。
- 魏波康银辉宋丽君王朝军郭伟雄向旻李广盛林颢曾荣
- 关键词：成骨细胞BMSCS条件培养基地塞米松成骨
- 子宫内膜癌中bcl-2、ki-67、p53、C-erbB-2、ER、PR的表达及意义
- 2009年
- 目的探讨bcl-2、ki-67、p53、C-erbB-2、ER、PR的表达在子宫内膜癌中的意义。方法应用免疫组化二步法检测6种基因蛋白在118例子宫内膜癌、20例增生期子宫内膜组织中的表达情况。结果在子宫内膜癌组织中bcl-2、ki-67、p53、C-erbB-2、ER、PR、阳性表达率分别为80.0%、67.7%、44.1%、42.4%、64.4%和61.9%。ER、PR的表达与临床分期、病理分级有关,即分期、分级越高,表达越弱,差异有统计学意义(P<0.05)。C-erbB-2、ki67的表达与病理分级有关,即高分化,低表达,差异有统计学意义(P<0.05)。p53的表达随临床分期增高,分级的降低而升高;bcl-2随分期的增高而降低,但与分级无关。结论ER、PR的表达对临床选择内分泌治疗具有指导意义;C-erbB-2、p53、Ki-67、bcl-2的检测对评价子宫内膜癌的生物学行为及预后有意义。
- 李静勉张小丹郭伟雄
- 关键词：子宫内膜癌雌激素受体孕激素受体肿瘤基因
- 皮质酮浓度对SD大鼠成骨细胞成骨基因表达的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨皮质酮对离体SD大鼠成骨细胞功能的影响。方法采用多次胶原酶组织消化法获得新生SD大鼠颅骨中的成骨细胞作为研究对象,用倒置显微镜及碱性磷酸酶、钙结节染色观察成骨细胞形态,CCK-8法检测皮质酮对成骨细胞增殖的影响,根据CCK-8结果将SD大鼠成骨细胞分成四组,分别用含不同浓度的皮质酮(0μmol/L、0.1μmol/L、1.0μmol/L、10.0μmol/L)的DMEM(H)培养基培养,作用24 h后,测定成骨细胞内碱性磷酸酶含量,采用RT-PCR检测成骨细胞内COL1A、OCN、ALP基因表达,采用Western blot检测成骨细胞内COL1A、OCN、RUNX-2蛋白的表达。结果 CCK-8结果显示皮质酮能抑制成骨细胞的增殖,皮质酮能抑制成骨细胞内碱性磷酸酶的生成,与浓度明显相关;RT-PCR与Western blot检测可见COL1A、OCN、ALP基因表达及COL1A、OCN、RUNX-2蛋白的表达下降。结论皮质酮在超生理剂量的浓度下能抑制成骨细胞增殖及细胞内碱性磷酸酶的合成,减少COL1A、OCN、ALP基因及COL1A、OCN、RUNX-2蛋白的表达。
- 康银辉魏波祝兆波郭伟雄王朝军宋丽君林颢李广盛楚佳奇曾荣
- 关键词：皮质酮成骨细胞基因表达成骨
- 醋酸棉酚对地塞米松作用后SD大鼠股骨头组织形态学与基因表达的影响
- 2014年
- 目的观察地塞米松(Dex)对SD大鼠股骨头组织成脂与成骨分化相关基因表达及形态学改变的影响,探讨醋酸棉酚(GAA)能否通过11β-羟基类固醇脱氢酶(11β-HSD1)调节以上改变及可能机制。方法作成年SD大鼠腹腔内注射Dex 10mg/kg,12周及20周后观察股骨头形态学改变,11β-羟基类固醇脱氢酶1(11β-HSD1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、CCAAT区/增强子结合蛋白α(C/EBPα)、Run相关转录因子2(Runx2)的表达改变;以及应用GAA后上述指标的表达特点。结果应用Dex股骨头松质骨表现为骨小梁稀疏,骨小梁的面积比值下降,骨髓脂肪组织增多,面积比值增大,改变随Dex应用时间累积加重,GAA组表现为类似改变;成骨细胞的阳性染色比例数下降,脂肪细胞比例上升,并伴随相同趋势面积改变;成脂分化基因表达上调,成骨分化性基因则下降,11β-HSD1表达增加,GAA组11β-HSD1、PPARγ、Runx2、C/EBPα基因表达增强。结论 Dex所导致的骨质改变与股骨头坏死病理特征相符,推测可能与Dex抑制了成骨分化基因表达及成脂分化基因表达上调有关,其变化与11β-HSD1表达关联密切,但GAA不能有效改变这种病理改变与基因表达异常,推测可能存在其他调节途径。
- 林颢刘军魏波曾荣王培永向昊郭伟雄祝兆波
- 关键词：基因表达
- 炎症细胞因子及通路在骨关节炎中的研究进展被引量：10
- 2015年
- 骨关节炎是一种常见的慢性退行性骨关节疾病，其典型的病理变化为关节软骨破坏和继发性骨质增生。常表现为关节软骨破坏、关节表面骨赘形成、滑膜细胞增生和关节腔隙变窄。骨关节炎已成为发展中国家导致老年人病残的普遍因素［1‐2］。其发病机制尚未完全阐明，目前认为炎症机制在其中发挥着重要作用，其通过多种炎症细胞因子与信号通路相互调控，从而使细胞合成代谢与分解代谢失衡而改变了细胞的成分、结构和功能，导致了骨关节炎的发生、发展。研究证实NF‐κB信号通路、MAPKs信号通路、Wnt／β‐catenin信号通路及相关细胞因子（白介素、TNF‐α、IGF等）在骨性关节炎发病中起着至关重要的作用。本文就骨性关节炎发生、发展过程中相关通路及细胞因子作一综述。
- 郭伟雄魏波
- 关键词：骨关节炎炎症细胞因子信号通路
