武振江
- 作品数：7 被引量：22H指数：3
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- 农杆菌介导的铁皮石斛遗传转化体系研究被引量：6
- 2015年
- 以铁皮石斛原球茎为受体,研究了农杆菌介导的铁皮石斛遗传转化体系,对遗传转化中的草甘膦筛选压力,菌液浓度,乙酰丁香酮浓度,预处理方法,侵染时间,美罗培南浓度等转化影响因子进行了优化。结果表明,摁压处理下的原球茎在添加浓度为200μmol·L-1乙酰丁香酮的菌液中侵染30 min,菌液浓度OD600为1.0,共培养48 h后,转入添加质量浓度为50 mg·L-1美罗培南和质量浓度为2.0 mg·L-1的草甘膦筛选培养基中,转化效率最高。经GUS组织化学染色及PCR分析鉴定,初步证明ACC合成酶反义基因已整合到铁皮石斛的基因组中。
- 崔波刘佳王洁琼蒋素华武振江叶永忠
- 关键词：铁皮石斛原球茎ACC合成酶
- 文心兰OnAP1-like基因表达载体构建和遗传转化体系初探被引量：2
- 2014年
- 根据NCBI网站上文心兰OnAP1-like基因序列设计引物,用RT-PCR法从南茜文心兰花葶中扩增OnAP1-like基因,对扩增产物进行测序。结果表明,获得的南茜文心兰OnAP1-like基因为690bp,与报道序列完全一致。将OnAP1-like基因插入pRI101-ON载体中,经PCR、双酶切及测序鉴定,证实重组表达质粒中含有目的片段,表明成功构建了高效植物表达载体pRI101-OnAP1。对OnAP1-like基因的结构域和所表达蛋白质的亲水性进行了分析,并预测了该基因所表达蛋白的三维结构。结果显示,该基因包含MADS-box和K-box保守域,属于MADS-box基因家族,所表达蛋白为亲水性蛋白。确定了一种文心兰的遗传转化条件,得到筛选抗生素G418的最适质量浓度为40mg/L,为进一步研究文心兰中AP1基因的功能奠定基础。
- 武振江刘佳崔波叶永忠
- 关键词：文心兰遗传转化体系
- 萼脊兰SeAP1-like基因的克隆与表达载体构建被引量：4
- 2015年
- 根据NCBI网站上萼脊兰AP1-like全长基因序列设计引物,采用RT-PCR法从萼脊兰花瓣中扩增Se AP1-like基因,对扩增产物进行克隆和测序。结果表明,获得的萼脊兰Se AP1-like基因为743 bp,编码247个氨基酸。将Se AP1-like基因插入p CAMBIA1304载体中,经PCR、双酶切鉴定,证实重组表达质粒中含有目的片段,表明成功构建了高效植物表达载体p CAMBIA1304-Se AP1。对Se AP1-like基因的结构域和所表达蛋白质的亲水性进行了分析,并预测了该基因所表达蛋白的二维结构。结果显示,该基因包含MADS-box和K-box保守域,属于MADS-box基因家族,该蛋白分子属于亲水性蛋白。二级结构分析表明,其包含57.49%的α螺旋、6.07%的延伸链、36.44%的不规则折叠。
- 蒋素华袁秀云王洁琼武振江张国付崔波
- 关键词：SE克隆
- 文心兰OnAP1-like基因的克隆、表达分析及转化体系的研究
- 文心兰为兰科（Orchidaceae）文心兰属（Oncidium）植物的总称，又名舞女兰、跳舞兰，原产于中南美洲和北美洲南部。其花序分枝性良好，花色亮丽，花形优美，具有良好的观赏价值。近年来随着分子生物学在花卉相关研究以...
- 武振江
- 关键词：文心兰克隆实时荧光定量
- 文献传递
- 农杆菌介导的Thaumatin基因转化烟草的研究被引量：2
- 2013年
- 以暗培养3 d的烟草叶片为受体,以Thaumatin为目的基因,应用根癌农杆菌介导法对烟草进行遗传转化,同时以烟草叶片为材料,对影响转化的几个因素进行优化研究,结果表明:侵染20 min、美罗培南浓度为25 mg/L时有利于提高转化率;经浓度为2.0 mg/L的PPT筛选获得的抗性植株经PCR、GUS组织化学染色和Southern杂交分析鉴定,初步证明外源基因Thaumatin已整合到烟草的基因组中。
- 崔波蒋素华田云芳武振江袁秀云马杰
- 关键词：烟草根癌农杆菌
- 文心兰OnAPl-like基因的克隆、表达分析及转化体系的研究
- 文心兰为兰科(Orchidaceae)文心兰属（Oncidium）植物的总称，又名舞女兰、跳舞兰，原产于中南美洲和北美洲南部。其花序分枝性良好，花色亮丽，花形优美，具有良好的观赏价值。近年来随着分子生物学在花卉相关研究以...
- 武振江
- 关键词：文心兰基因克隆
- 文献传递
- 文心兰开花相关OnAP1-like基因的克隆及表达分析被引量：8
- 2014年
- 以南茜文心兰(Gower Ramsey)盛花期花葶提取的总RNA为模板,通过RT-PCR与RACE扩增,获得一个958 bp的AP1(APETALA1)-like基因的cDNA全长序列,其基因编码区690 bp,共编码氨基酸229个,命名为OnAP1-like(登录号:KC426946)。蛋白质二级结构分析表明,该蛋白质48.91%为α螺旋,10.92%为β折叠,40.17%为无规则卷曲,为亲水性蛋白质。蛋白序列比对和进化树分析表明,OnAP1-like蛋白与蕙兰AP1-like蛋白一致性最高,进化距离最近。利用RT-qPCR对从文心兰不同时期不同器官中的OnAP1-like基因表达量进行分析,结果表明,同一器官不同发育时期比较,在叶中,花蕾期的表达量最高;在根中,随发育时间推移,表达量逐渐升高,至花后期达到最高;在花葶中的表达量的趋势与根相同。同一时期不同器官比较,抽葶前,根中表达量高于叶片;花蕾期,花瓣中的表达量最高;盛花期和花后期,花葶中的表达量最高。推测该基因在花的发育及形成中发挥作用。
- 崔波武振江刘佳张国付袁秀云叶永忠
- 关键词：文心兰RT-QPCR克隆
