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陈琼: 作品数：34 被引量：73H指数：5; 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项国家科技基础条件平台建设计划更多>>; 相关领域：医药卫生理学更多>>

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速率比浊法测定13价肺炎球菌结合疫苗中的各型多糖含量被引量：5: 2014年; 目的：建立速率比浊法检测13价肺炎球菌结合疫苗各型多糖含量。方法：采用免疫化学系统（IMMAGE 800）,选择非竞争性浊度模式,样品或标准品20μL,血清20μL,反应缓冲液200μL,增益系数为4,反应时间为2.5 min;用氢氧化钠解吸附法处理样品和标准品。结果：在本文条件下,1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F、23F型肺炎球菌荚膜多糖浓度在1～6μg·mL^-1检测范围内,线性良好（r〉0.99）;重复性RSD均低于7%;各型多糖含量回收率在70%～130%;专属性考察结果显示,除9N型多糖的存在会干扰9V型多糖含量检测外,13价肺炎球菌结合疫苗中不包含的多糖（2、8、10A、11A、12F、15B、17F、20、22F、33F型）对此方法没有影响;耐用性研究结果显示,氢氧化钠解吸附法处理样品和标准品时,控制在10 s左右即中和解吸附过程中加入的氢氧化钠;用所建立速率比浊法检测13价肺炎球菌结合疫苗中的1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F、23F型肺炎球菌荚膜多糖含量,结果显示4批成品检测值在理论值的70%～130%之间。结论：所建立的检测方法准确,重复性好,可作为13价肺炎球菌结合疫苗的质控标准。; 陈琼王珊珊梁丽王春娥李茂光石继春叶强

淋病奈瑟菌核酸检测试剂盒国家参考品的制备被引量：3: 2016年; 目的：制备淋病奈瑟菌（ Neisseria gonorrhoeae,NG）核酸检测试剂盒国家参考品。方法分别将10株NG和10株非NG参考菌株在各自适宜的培养基和温度下培养,收获新鲜无污染培养物,用比浊法和显微计数法将不同的培养物制备成10份NG菌悬液阳性参考品、5份精密性参考品和10份非NG菌悬液阴性参考品以及最低检出限参考品,然后利用5种不同来源的NG核酸检测试剂盒验证各种参考品,并考察参考品在不同处理条件下的稳定性。结果每株菌在各自适宜的培养基和温度下培养后,均生长良好,无杂菌污染。经5种试剂盒验证检测,10份阳性参考品的检测结果均为阳性,10份阴性参考品的检测结果均为阴性,精密性参考品检测结果为Ct值的CV均小于5.0%；5种试剂盒的最低检出限均能达到1000/mL,其中试剂盒B和E的最低检出限达100/mL。参考品在2-8℃放置7 d、37℃放置3 d的热稳定性及反复冻融5次以内的稳定性良好。结论制备的NG核酸检测试剂盒国家参考品的准确性、特异性及精密性均符合要求,可用于NG核酸检测试剂盒的质量评价。; 王春娥卢旭刘茹凤石继春李红陈琼唐静陈翠萍叶强; 关键词：淋病奈瑟菌核酸试剂盒参考品

屋尘螨变应原制品活性测定方法的建立: 目的建立屋尘螨变应原活性测定方法，用于屋尘螨变应原制品的质量控制。方法：分别对屋尘螨原液、不同企业含氢氧化铝的屋尘螨制品进行试验条件的优化，建立荧光酶联免疫竞争抑制法-UniCAP 法进行活性测定。结果：不同反应条件对...; 王春娥石继春王珊珊陈琼李茂光叶强李凤祥; 关键词：屋尘螨变应原活性

人血清中福氏2a及宋内志贺菌O-特异性多糖抗体IgG含量间接ELISA定量检测方法的验证及应用: 2023年; 目的验证人血清中福氏2a及宋内志贺菌O-特异性多糖(分别简称福氏2a多糖及宋内多糖)抗体IgG含量的ELISA定量检测方法,并用于福氏宋内痢疾双价疫苗免疫前后人血清样本的检测。方法将参考血清及质控血清按一定比例混合,制备成10份不同浓度的血清样本(编号为S1~S10),采用企业提供的间接ELISA定量检测方法检测样本,连续测定6 d,计算多糖抗体IgG回收率和变异系数(coefficient of variation,CV),并以回收率CV低于20%的相应参考血清含量作为定量限(limit of quantitation,LOQ)。采用相同检测方法连续6 d测定血清样本S10及质控血清,每天重复检测3次,计算CV;采用参考血清进行多糖竞争抑制ELISA试验,计算血清对多糖的抑制率。采用企业提供的方法检测参考血清,确定线性范围,获得曲线方程,计算相关系数(R^(2))。采用验证的方法检测1842份福氏宋内痢疾双价疫苗免疫前后的人血清样本。结果10份血清样本中福氏2a和宋内多糖抗体IgG回收率分别为73.21%~222.68%和83.67%~123.56%;试验间及试验内精密性CV均<30%;参考血清对100μg/mL福氏2a和宋内多糖的抑制率分别为85.95%和88.42%;福氏2a和宋内多糖抗体IgG检测的线性范围分别为0.05~0.125和0.025~0.125 EU/mL,R^(2)均≥0.99,LOQ分别为0.050和0.025 EU/mL。福氏宋内痢疾双价疫苗免疫后血清IgG含量大幅高于免疫前。结论企业提供的ELISA定量检测方法具有良好的准确性、精密性及特异性,可用于痢疾疫苗免疫血清的检测。; 李红石刚郭丽娜陈琼付宏斌王国东胡小华朱卫华王斌叶强; 关键词：抗体IGG 志贺菌痢疾疫苗

三种不同血清型肺炎球菌多糖国家参考品的研制: 2022年; 肺炎球菌感染是导致老年人死亡的主要原因之一,WHO将其列为12种造成严重疾病负担的重点致病菌之一,且耐药性肺炎球菌的出现对当前临床治疗造成很大的挑战。大量研究证实疫苗的免疫接种是预防和控制肺炎球菌感染最经济、最有效的措施。当前针对成人肺炎球菌感染的预防性疫苗主要为覆盖了已报道的65%~91%血清型分离菌株的23价肺炎球菌多糖疫苗(PPV23)。多糖作为PPV23中有效组分,与疫苗的免疫原性密切相关。; 王珊珊陈琼许美凤李亚南徐颖华叶强; 关键词：肺炎球菌血清型预防性疫苗分离菌株国家参考品

6群肺炎链球菌荚膜多糖合成相关基因的分子生物学研究被引量：3: 2017年; 目的利用分子生物学方法,对25株6群肺炎链球菌荚膜多糖合成相关基因(cps loci)进行研究。方法采用多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)技术,对25株6群肺炎链球菌进行分型;依据Gen Bank中收录的6群肺炎链球菌cps loci设计合成引物,以25株肺炎链球菌基因组DNA作为模板进行PCR扩增,并对扩增产物进行基因测定及分析;采用相邻合并分析(neighbour-joining analysis),根据MLST的7个管家基因和wciP、wzy、wzx这三个cps loci的代表基因分别绘制出系统发育树。结果根据MLST技术分析发现7株新的ST型菌株。25株6群肺炎链球菌cps loci的G+C含量为35.4%~35.5%,均属于I类;所有6C型wzy基因均有6个碱基的缺失。根据MLST的7个管家基因绘制的系统发育树,并根据cps loci的3个代表基因wciP、wzy和wzx绘制的系统发育树,差异很大。3个代表基因绘制的系统发育树,6C型为进化距离比较远的分枝,6A型和6B型的分枝进化距离相对较近;6D型与6B型在同一分枝内。结论获得了25株6群肺炎链球菌ST型和全长cps loci,完善了6群肺炎链球菌的菌种档案。; 陈琼龙新星李红黄洋王春娥陈翠萍叶强; 关键词：多位点序列分型系统发育树

淋球菌核酸检测试剂盒的质量评价被引量：2: 2016年; 目的对12种淋球菌核酸检测试剂盒进行质量评价。方法应用12种淋球菌PCR试剂盒质控参考品，按照各试剂盒说明书的方法提取模板及核酸扩增，检测各试剂盒的阳性参考品符合率、阴性参考品符合率、批内精密度及最低检测限，并进行比较分析。结果12种试剂盒的阳性参考品符合率及阴性参考品符合率均为100％；批内精密度：各试剂盒检测结果D值的变异系数均小于5．0％；12种试剂盒中有10种试剂盒的最低检出限能达到1×10^3个菌／mL，其中3种能达到1×10^2个菌／mL，但另外2种试剂盒的最低检出限仅达到1×10^4个菌／mL。结论12种淋球菌核酸检测试剂盒质量均较好，性能可靠。; 王春娥卢旭石继春刘茹凤李红陈琼唐静陈翠萍叶强; 关键词：淋球菌试剂盒国家参考品实时PCR

速率比浊法测定13价肺炎球菌结合疫苗中的结合多糖抗原含量被引量：5: 2015年; 目的建立速率比浊法检测13价肺炎球菌结合疫苗中的结合多糖抗原含量,并对方法进行验证。方法采用免疫化学系统（IMMAGE 800）,选择非竞争性浊度模式,样品或标准品20μl,血清20μl,反应缓冲液200μl,增益系数为4,反应时间为2.5 min;样品离心沉淀后用缓冲溶液复溶,经Na OH解吸附法处理样品和标准品。对方法进行线性、重复性、准确性、专属性、适用性验证,并采用建立的方法检测3批13价肺炎球菌结合疫苗样品中的各型多糖抗原含量。结果在设定的条件下,各型多糖抗原浓度在1-6μg/ml范围内,线性良好（相关系数〉0.99）;各型多糖抗原含量重复检测的相对标准偏差（RSD）均低于8%;13型多糖结合抗原含量的回收率在70%-130%之间;6A与19A型特异性血清与其他12型多糖抗原有交叉反应,但与阳性对照的比值均较低（〈5%）,其他12种特异性血清特异性良好,无交叉反应;除1、3型抗原外,其余型别的游离多糖抗原基本不干扰结合抗原的检测结果。结论建立的速率比浊法检测13价肺炎球菌结合疫苗中的结合多糖抗原含量重复性、准确性良好,1、3型结合抗原不适用于直接离心沉淀获得。; 陈琼李茂光李红王春娥石继春陈翠萍叶强

11群肺炎链球菌荚膜多糖合成相关基因的分子生物学研究被引量：5: 2018年; 目的利用分子生物学方法,研究7株11群肺炎链球菌荚膜多糖合成相关基因(cps loci)。方法根据11群肺炎链球菌荚膜多糖合成相关基因设计合成5对特异性引物,以7株肺炎链球菌基因组DNA作为模板进行PCR扩增,并对扩增产物进行序列测定及基因序列比对,确定其血清型。多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)技术分析7株11群肺炎链球菌序列型(ST)。采用相邻合并分析(neighbour-joining analysis),根据MLST的7个管家基因和cps基因分别绘制系统发育树。结果根据wcw C、gct和wcj E等3个基因产物确定5株原11A型肺炎链球菌为11A型,无11E型;根据wcwR和gct等2个基因产物确定2株原11B型肺炎链球菌为11B型。获得7株不包括4个合成调控基因(wzg、wzh、wzd和wze)的11群肺炎链球菌cps loci,长度为11～12 kb,11A型具有12个开放式阅读框(ORF),11B型具有11个ORF。5株11A型肺炎链球菌部分cps基因序列差异较大; 2株11B型肺炎链球菌部分cps基因序列相似性高于99%。根据MLST分析发现3种新的ST型。根据MLST的7个管家基因绘制的系统发育树和cps基因绘制的系统发育树差异很大。结论从分子水平上确定了11A和11B血清型。获得了5株11A型和2株11B型肺炎链球菌ST型和部分荚膜多糖合成相关基因(cps loci),完善了11群肺炎链球菌的菌种档案。; 陈琼龙新星李红李康黄洋陈翠萍叶强; 关键词：多位点序列分型系统发育树

8、10A、11A及15B型肺炎链球菌荚膜多糖血清IgG抗体定量ELISA检测方法的验证被引量：2: 2017年; 目的对8、10A、11A及15B型肺炎链球菌荚膜多糖血清Ig G抗体定量ELISA检测方法进行验证。方法以第二代国际参考血清007sp为标准,检测国际参考血清89SF的8、10A、11A及15B型Ig G抗体值,绘制标准曲线,确定检测范围、线性(R^2)及最低检测限;以第二代国际参考血清007sp为标准,测定肺炎国际质控血清盘(12/278)共12份血清的各型抗体水平3次,以第一代国际参考血清89SF为标准,测定第二代国际参考血清007sp的各型抗体水平10次,计算回收率;连续测定质控血清2009S、QC5、QC6及第二代国际参考血清007sp的各型Ig G抗体各10次,计算变异系数(CV);利用质控血清920进行抑制试验,验证方法的特异性。结果国际参考血清89SF的8、10A、11A及15B型Ig G抗体的最低检测限分别为0.58、0.85、0.46及0.67 ng/ml,检测范围分别为0.15~35.60、0.13~32.50、0.05~12.70及0.17~42.40 ng/ml,线性R^2均>0.99;除10A型的准确度较低外(46.15%),8、11A及15B型均较高(分别为76.92%、84.62%及84.62%);连续10次测定质控血清2009S、QC5、QC6及国际参考血清007sp各型Ig G抗体的CV值为6.44%~18.19%;多糖抗原与血清抗体的反应具有特异性。结论该方法具有良好的准确性、精密性及特异性,可用于肺炎球菌疫苗临床血清的检测。; 李红李亚南石刚陈琼王春娥唐静陈翠萍叶强; 关键词：肺炎链球菌荚膜多糖血清抗体酶联免疫吸附试验

陈琼

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