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付玲: 作品数：112 被引量：149H指数：7; 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划中国博士后科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>

合作作者

抗炭疽保护性抗原单克隆抗体可变区基因的克隆及序列分析被引量：5: 2007年; 目的:克隆并分析抗重组炭疽芽孢杆菌保护性抗原(rPA)单克隆抗体4B2、5E1和2A8轻、重链可变区基因。方法:从分泌抗rPA特异性单抗的杂交瘤细胞株4B2、5E1和2A8中提取总RNA;利用RT-PCR技术克隆抗rPA单抗4B2、5E1和2A8的VL、VH基因,并将其连入pMD18-T载体中进行测序分析。结果:4B2VL基因全长378bp,VH基因全长414bp;5E1VL基因全长420bp,VH基因全长426bp;2A8VL基因全长384bp,VH基因全长342bp。通过分析,这些基因均符合小鼠IgGV区基因的特征,含有4个框架区、3个抗原互补决定区,而且抗体特征性的半胱氨酸残基的数量和位置也正确。结论:克隆了抗rPA单抗4B2、5E1和2A8的VL、VH基因,为下一步构建多种形式的基因工程抗体奠定了良好的基础。; 李冰李建民徐俊杰刘树玲张羽付玲陈薇; 关键词：炭疽芽胞杆菌单克隆抗体

结核分枝杆菌分泌蛋白EspB在RAW264.7细胞中的稳定表达: 2011年; 【目的】建立能够稳定表达结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)分泌蛋白EspB(Rv3881c)的RAW264.7细胞系,为研究EspB蛋白在调控巨噬细胞功能中所起的作用提供科学依据。【方法】首先成功构建的重组质粒pEGFP-C1-EspB,然后将重组载体pEGFP-C1-EspB和空载体pEGFP-C1以脂质体介导的方法转染至小鼠巨噬细胞RAW264.7中,经过G418筛选后建立稳定表达EGFP-EspB融合蛋白以及EGFP的细胞系,并通过RT-PCR、荧光显微镜及Western blot方法,在基因和蛋白两个水平对所建立的稳转细胞系进行鉴定。【结果】EGFP-ESAT6融合基因成功整合入RAW264.7细胞基因组并能够稳定表达,成功获得了能够稳定表达EGFP-EspB融合蛋白以及EGFP的细胞系。【结论】本试验利用脂质体介导的方法,将构建的重组载体pEGFP-C1-EspB和空载体pEGFP-C1转染至Raw264.7细胞系中,获得了稳定表达EGFP-EspB融合蛋白的巨噬细胞系,为阐明EspB分泌蛋白在调控巨噬细胞功能中所起的作用以及EspB与巨噬细胞蛋白之间的相互作用提供了研究平台。; 李浩殷瑛董大勇张军付玲任军徐俊杰陈薇; 关键词：EGFP RAW264.7 稳定转染

LFn-MAGE3融合蛋白表达及生物学功能初步研究被引量：3: 2006年; 目的:表达融合蛋白LFn-MAGE3,探讨无毒炭疽毒素用于治疗肿瘤的可能性。方法:将LFn的编码序列导入PET21a表达载体中,构建LFn融合表达载体PET21a-LFn。将全长MAGE-3基因插LFn融合表达载体中,构建了PET21a-LFn-MAGE3融合蛋白表达载体。将该重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)中,诱导表达LFn-MAGE3融合蛋白。表达产物用QsepharoseFF离子交换柱和PheHP疏水柱进行纯化。LF毒性抑制实验和细胞免疫荧光实验检测融合蛋白的生物学活性。结果:融合蛋白LFn-MAGE3在大肠杆菌BL21a获得胞内可溶性表达,经纯化后,获得一定纯度的LFn-MAGE3融合蛋白。细胞免疫荧光实验显示LFn-MAGE3能在PA(炭疽保护性抗原)协同下高效进入巨噬细胞。结论:表达纯化获得的LFn-MAGE3融合蛋白能在PA协助高效进入细胞,可以用于下一步的肿瘤免疫治疗的动物实验中。; 孔毅荣付玲郭强于婷于长明陈薇; 关键词：炭疽毒素肿瘤免疫治疗

重组炭疽致死因子的表达及生物活性分析被引量：16: 2004年; 使用分泌型表达质粒 ,实现了重组炭疽致死因子 (rLF)在大肠杆菌周质腔中的分泌表达。表达量约占菌体总蛋白的 4 %。经过离子交换和凝胶过滤纯化 ,每升诱导培养物可获得约 3mg电泳纯的rLF。蛋白N端测序表明 ,rLF序列与天然炭疽LF一致。体外细胞毒性试验亦显示rLF具有很好的生物活性。rLF的成功表达为今后研究LF的作用机理、发展新型炭疽疫苗。; 郭强徐俊杰董大勇付玲陈薇宋小红; 关键词：炭疽杆菌蛋白表达蛋白纯化大肠杆菌

抗炭疽芽孢杆菌保护性抗原单克隆抗体轻、重链可变区基因及其应用: 本发明涉及抗炭疽芽孢杆菌保护性抗原(PA)单克隆抗体轻、重链可变区基因和基因编码的多肽，以及所述基因和多肽在制备炭疽的新型诊断试剂和治疗药物中的应用。本发明人制备了抗PA特异性单克隆抗体4B2、5E1和2A8杂交瘤细胞株...; 陈薇李冰徐俊杰李建民刘树玲侯利华付玲; 文献传递

对外源基因进行正确分泌表达的多拷贝酵母表达载体: 本发明涉及一种酵母表达载体及其构建引物。本发明的目的是提供一种能够使外源基因在酵母中正确分泌表达的多拷贝酵母表达载体，它的DNA序列为序列表中序列1的核苷酸序列。本发明的第二个目的是提供二对构建上述表达载体的专用引物，其...; 陈薇齐连权于长明付玲来大志; 文献传递

一种以人复制缺陷腺病毒为载体的埃博拉病毒病疫苗: 本发明公开了埃博拉病毒GP蛋白密码子优化的一种核苷酸序列，还公开了能够表达该核苷酸序列的人复制缺陷重组腺病毒及在制备预防埃博拉病毒病疫苗中的应用。所述核苷酸序列以E1、E3联合缺失的复制缺陷型人5型腺病毒为载体，以整合腺...; 陈薇吴诗坡侯利华宋小红张金龙付玲

炭疽毒素受体CMG2与人血清白蛋白的融合蛋白: 本发明公开了一种融合蛋白，所述融合蛋白第一部分为重组炭疽毒素受体CMG2，第二部分为重组人血清白蛋白，所述第一部分与第二部分由连接肽连接，所述融合蛋白在体内半衰期较重组炭疽毒素受体CMG2增加了近20倍，同时还具有很好的...; 陈薇徐俊杰李亮亮郭强张军董大勇殷瑛付玲

重组炭疽保护性抗原的表达、纯化与生物活性分析被引量：18: 2004年; 构建分泌型表达质粒 ,在大肠杆菌中实现了重组炭疽保护性抗原 (rPA)的分泌型表达。重组蛋白位于细菌外周质 ,表达量约占菌体总蛋白的 10 %。以离子交换、疏水层析和凝胶过滤为基础 ,建立了rPA的纯化工艺 ,每升培养物可获得约 15mgrPA ,纯度可达 95 %以上。体外细胞毒性试验显示rPA具有较好的生物学活性。用rPA免疫家兔产生的抗血清在体外可抑制炭疽致死毒素的活性 ,表明rPA可诱导机体产生保护性免疫。; 徐俊杰董大勇宋小红葛猛李冠霖付玲庄汉澜陈薇; 关键词：炭疽杆菌炭疽毒素保护性抗原纯化大肠杆菌

聚乙二醇化重组人干扰素ω偶合物: 本发明公开了聚乙二醇化重组人干扰素ω偶合物及其制备工艺，相比未修饰的人干扰素ω，在人体内具有更长的半衰期，能够明显减少用药次数，降低毒副作用，特别适合于治疗对干扰素ω敏感的慢性病毒感染，临床上具有广泛的应用前景。; 陈薇李建民侯利华付玲李冰徐春娥张金龙任军; 文献传递