司信喜
- 作品数：6 被引量：4H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 通过染色体整合表达古菌乙酰化酶合成N-末端乙酰化胸腺肽β4被引量：2
- 2011年
- 胸腺肽β4(Tβ4)是N-末端乙酰化的43肽,具有多种重要生物学功能.其生物合成存在两大难点,即乙酰化修饰和小分子肽的表达.本研究发现来自古菌Sulfolobus solfataricus的乙酰化酶ssArd1可以催化Tβ4的N-末端乙酰化修饰.利用Red同源重组技术将ssArd1基因表达盒整合至E.coli BL21(DE3)染色体的lpxM位点上,构建了可以实现Tβ4N-末端乙酰化修饰的新型宿主E.coli BDA.将Tβ4编码基因融合在改造的微型Spl DnaX Intein的N端,并在Intein的C端添加His标签,构建了表达载体pET-Tβ4-Intein.在E.coli BDA中表达的融合蛋白,经镍亲和层析纯化后用β-巯基乙醇诱导融合蛋白切割释放小分子多肽,获得了具有N-末端乙酰化的Tβ4.
- 曹赛戴红梅孙旭颛孙丹丹和金周司信喜李树龙方宏清陈惠鹏谢达平周长林
- 关键词：乙酰化酶INTEIN
- N-末端乙酰化蛋白或多肽的制备方法及其专用工程菌
- 本发明公开了一种能产生N-末端乙酰化的蛋白质或多肽的方法及其专用工程菌。该重组工程菌，是将表达来自古细菌的乙酰化酶的表达盒整合到宿主菌染色体上，得到在染色体上表达古细菌乙酰化酶的重组菌；所述表达古细菌乙酰化酶的表达盒包括...
- 方宏清戴红梅孙旭任元涛司信喜李树龙陈惠鹏周长林
- 化学切割重组融合蛋白制备人胸腺肽β_4被引量：1
- 2009年
- 目的:在大肠杆菌中表达人胸腺肽β4(Tβ4)的融合蛋白,通过CDAP介导的化学切割将融合部分切除,获得人Tβ4。方法:分别以质粒pET-Tβ4和pET-L12为模板,扩增Tβ4和核糖体亚基蛋白L12的基因片段,再以这2段基因为模板进行重叠PCR,并在连接处引入一个半胱氨酸(Cys)密码子,将得到的融合蛋白Tβ4-Cys-L12基因片段与pET-22b载体连接,构建表达质粒,将其与N-末端乙酰转移酶质粒共转化至大肠杆菌BL21(DE3)并共表达,获得N端乙酰化修饰的融合蛋白Tβ4-Cys-L12;利用CDAP氰基化Cys的巯基,于pH10.0条件下在Cys残基N端完成切割,分离纯化获得Tβ4。结果:质谱分析目的产物相对分子质量为4962.70,与天然Tβ4一致,表明获得了Tβ4。结论:CDAP介导的化学法可以有效切割融合蛋白获得Tβ4,建立了一套Tβ4的生物制备方法。
- 司信喜戴红梅方宏清陈惠鹏
- 胸腺肽β/_4的生物制备研究
- 胸腺肽是胸腺分泌的一种小分子多肽,根据等电点的不同分为α/(pI<5.0/)、β/(5.0<pI<7.0/)和γ/(pI>7.0/)三个家族,每一族成员按其发现的先后顺序注以相应下标。本课题的研究对象是β类胸腺肽中的第四...
- 司信喜
- 关键词：内含肽
- 文献传递
- 胸腺肽β_4研究进展被引量：2
- 2009年
- β胸腺肽是一个多肽家族,由高度保守的极性氨基酸组成,相对分子质量约5000。研究表明,在绝大多数哺乳动物组织中,胸腺肽β4都是该家族丰度最高的成员。1991年发现胸腺肽β4是人血小板中主要的肌动蛋白隐蔽肽,随后发现它在创伤愈合和血管生成、角膜修复、抑制炎症及肿瘤转移等方面具有重要作用。我们简要综述胸腺肽β4的上述作用及临床应用的研究进展。
- 司信喜方宏清陈惠鹏
- 关键词：创伤愈合炎症反应角膜修复肿瘤转移
- N-末端乙酰化蛋白或多肽的制备方法及其专用工程菌
- 本发明公开了一种能产生N-末端乙酰化的蛋白质或多肽的方法及其专用工程菌。该重组工程菌，是将表达来自古细菌的乙酰化酶的表达盒整合到宿主菌染色体上，得到在染色体上表达古细菌乙酰化酶的重组菌；所述表达古细菌乙酰化酶的表达盒包括...
- 方宏清戴红梅孙旭任元涛司信喜李树龙陈惠鹏周长林
- 文献传递
