王娆
- 作品数：11 被引量：30H指数：3
- 供职机构：南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省名医工程研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 海马苔藓纤维发芽与颞叶癫痫的研究进展被引量：7
- 2006年
- 王娆徐如祥
- 关键词：海马苔藓纤维发芽颞叶癫痫
- 大鼠延髓内脏带与下丘脑室旁核、视上核往返投射通路参与高渗调节反应的研究(英文)被引量：1
- 2006年
- 目的探讨延髓内脏带(MVZ)与下丘脑室旁核(PVN)和视上核(SON)之间是否存在往返渗透压投射通路。方法通过给予大鼠饮用3%氯化钠的方法制作高渗刺激模型,并用WGA-HRP逆行追踪、抗Fos、抗酪氨酸羟化酶(TH)或加压素(VP)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组织化学相结合的四重标记方法,观察MVZ、PVN和SON中WGA-HRP、Fos、TH、VP和GFAP阳性分布及表达状况。结果高渗刺激后MVZ、PVN和SON内Fos阳性细胞明显增多;GFAP阳性结构也明显增多,其分布与Fos阳性细胞分布基本一致,表现为胞体肥大、突起粗长。星形胶质细胞(AST)紧密包绕在神经元周围形成神经元-AST复合体(N-ASC)。结论神经元和AST以N-ASC的形式共同参与渗透压调节反应,体内存在MVZ和SON或PVN之间往返的渗透压调节通路。
- 王娆彭苹杨志军徐如祥饶志仁段丽姜晓丹
- 关键词：星形胶质细胞渗透压胶质纤维酸性蛋白
- 颞叶癫痫患者海马苔藓纤维发芽的实验研究被引量：8
- 2007年
- 目的观察颞叶癫痫病人海马齿状同和CA3区苔藓纤维出芽情况。方法癫痫组样本来自12例颢叶癫痫病例的手术切除标本包含海马齿状回和CA3区的脑组织,对照组脑组织样本来自4例非癫痫病的尸检脑组织。应用Timm组织化学染色方法在光镜和电镜水平进行海马结构苔藓纤维发芽的研究。结果光镜下癫痫组可见苔藓纤维穿越海马齿状同颗粒细胞层到达内分子层,CA3区也可见明显的苔藓纤维发芽。癫痫组CA3区和齿状同内分子层苔藓纤维发芽评分高于对照组,统计学上差异有显著性意义。电子显微镜下观察显示癫痫组患者齿状回内分子层可见到银标记的突触末端,主要和树突形成突触连接,所形成的突触为非对称性突触。结论颞叶癫痫可致海马齿状同和CA3区苔藓纤维发芽增加,这可能是难治性癫痫形成的重要机制。
- 王娆杨志军杨顺海徐如祥樊娟刘智良姜晓丹马宏伟李安民梁树立蔡颖谦杜谋选邹雨汐
- 关键词：颞叶癫痫海马苔藓纤维发芽
- 人类GAD67基因转染骨髓基质源性神经干细胞及初步检测被引量：1
- 2007年
- 目的利用转基因技术将人类谷氨酸脱羧酶（GAD）67基因转染骨髓基质源性神经干细胞仍MSCs-D-NSCs），获得GAD67修饰的成体专能干细胞。方法以PCR、双酶切及测序鉴定pEGFP-C2-GAD67和pcDNA3.1-GAD67重组子；利用密度梯度离心法分离培养大鼠BMSCs并促其向NSCs方向分化，将编码人类GAD67基因的真核表达质粒pEGFP-C2-GAD67及pcDNA3．1-GAD67分别转染BMSCs-D-NSCs，荧光显微镜下观察并用流式细胞仪检测转染效率。结果pEGFP-C2-GAD67及pcDNA3.1-GAD6，均可扩增出约1800bp目的条带，经双酶切和基因测序证实。荧光显微镜下观察可见大量绿色荧光细胞，两种载体转染效率分别为39.3％和40.5％。结论pEGFP-C2-GAD67及pcDNA3.1-GAD67真核表达载体重组正确，利用脂质体介导人类GAD6，基因能有效转染BMSCs-D-NSCs，为进一步观察其GAD67基因和蛋白的表达提供了前提条件。
- 马宏伟徐如祥姜晓丹刘智良张雪陈镇洲郭爱林苏健王娆张冉黄伟黄永安
- 关键词：转染骨髓基质细胞神经干细胞
- 颞叶癫痫患者颞叶皮层和海马组织内多药耐药相关蛋白1和胶质原纤维酸性蛋白共表达
- 杨志军罗永王娆卢洪流徐如祥李安民梁树立
- 人类GAD_(67)基因扩增及pEGFP-C2-GAD_(67)真核表达载体的构建被引量：1
- 2006年
- 目的扩增人类谷氨酸脱羧酶(GAD)67基因,并构建pEGFP-C2-GAD67真核表达载体。方法应用基因重组技术,采用反转录PCR方法对来自人类脑组织cDNA中编码GAD67的基因片段进行扩增,插入PUC57克隆载体,经XhoⅠ和BamHⅠ双酶切出GAD67基因片段,再克隆入真核表达载体pEGFP-C2后构建pEGFP-C2-GAD67重组载体,经PCR扩增、酶切后测序鉴定。结果人类GAD67基因扩增产物大小为1785bp,编码594个氨基酸残基。重组真核表达载体经酶切鉴定表明为正确重组子,PCR正确扩增出目的条带。与GenBank中人类GAD67基因序列比较,核苷酸和氨基酸水平的同源性分别达99.78%和99.66%。结论人类GAD67基因克隆后,可成功构建真核表达载体pEGFP-C2-GAD67,为进一步该基因转染神经干细胞移植治疗癫痫提供了实验基础。
- 刘智良马宏伟姚志彬徐如祥张世忠王娆
- 关键词：克隆真核表达质粒
- 颞叶癫痫患者颞叶皮层和海马组织内多药耐药相关蛋白1和胶质原纤维酸性蛋白共表达被引量：1
- 2009年
- 目的观察颞叶癫痫患者多耐药基因1蛋白(MDR1)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)在颞叶和海马组织内的表达。方法癫痫组样本来自12例颞叶癫痫病例的手术切除标本,对照组为4例非癫痫病的尸检脑组织。应用双重免疫荧光组织化学方法结合激光共聚焦显微镜技术显示MDR1、GFAP和NSE在颞叶和海马组织内的表达。结果对照组颞叶皮质和海马齿状回内均可见到许多GFAP表达阳性的星形胶质细胞和NSE表达阳性的神经元,未见到表达MDR1的细胞。癫痫组颞叶皮质和海马齿状回内GFAP阳性星形胶质细胞高于对照组。颞叶皮层和海马组织内可见星形胶质细胞MDR1和GFAP共表达现象。结论颞叶难治性癫痫可能与星形胶质细胞的多药耐药性有关。
- 杨志军王春枝王娆卢洪流徐如祥李安民梁树立
- 关键词：颞叶癫痫海马胶质原纤维酸性蛋白
- 超小超顺磁性氧化铁微粒对神经干细胞生物学活性的影响被引量：1
- 2007年
- 目的应用超小超顺磁性氧化铁微粒Sinerem标记大鼠骨髓源性神经干细胞（NSCs），探讨Sinerem的安全性及合适的标记浓度。方法分离、培养大鼠骨髓源性NSCs。制备Sinerem多聚赖氨酸复合物，以不同浓度Sinerem对细胞进行标记。普鲁士蓝染色和电镜观察细胞内铁，CCK-8法检测细胞生长增殖情况，AnnexinV—PI法检测细胞凋亡及死亡情况。结果普鲁士蓝染色显示细胞质内大量铁颗粒存在，标记率在99％以上。电镜观察见Sinerem标记干细胞内含纳米铁颗粒。CCK-8法检测结果表明，25～1500μg/ml不同浓度范围的Sinerem对细胞增殖的影响差异无统计学意义。AnnexinV—PI检测结果显示，Sinerem在25～200μg/ml范围内的不同浓度对细胞凋亡和死亡的影响差异无统计学意义。结论超小超顺磁性氧化铁微粒Sinerem可以有效标记大鼠骨髓源性NSCs，可以应用25～200μg／ml浓度范围的Sinerem标记细胞。
- 樊娟徐如祥姜晓丹陈中灿裴少琨杨志军王娆邹雨汐
- 关键词：干细胞氧化铁细胞生物学细胞造影剂
- 颞叶癫痫患者海马组织中苔藓纤维发芽与多耐药基因的表达
- 一、研究背景
癫痫(epilepsy)是一种常见的神经系统疾病，是由多种病因引起的慢性脑功能障碍，因脑部神经元过度发放电活动所致突然、反复和短暂的中枢神经系统功能失常作为特征的综合征。癫痫确诊后，一般推荐给予患...
- 王娆
- 关键词：海马苔藓纤维发芽多药耐药基因胶质原纤维酸性蛋白
- 文献传递
- GABA_B受体对大鼠海马CA1区锥体细胞突触传递的作用被引量：3
- 2006年
- 目的研究激活GABA_B受体对大鼠海马CA1区锥体细胞突触传递的影响。方法对成年大鼠海马脑片CA1区锥体细胞采用“盲法”全细胞电压钳记录,分别检测和分析巴氯芬(10μmol/L)对自发性的兴奋性突触后电流(EPSCs)和抑制性突触后电流(IPSCs)的影响。结果巴氯芬可显著降低符氨酸能EPSCs和γ-氨基丁酸能IPSCs的频率(P＜0．01),各自达58%±7%(n=17)和42%±10%(n=15),而对它们的幅度无显著性影响。结论巴氯芬对海马CA1区锥体细胞EPSCs和IPSCs的抑制作用属于突触前抑制,推测GABA_B受体所介导的这种抑制作用对CA1区神经元兴奋性的传出具有抑制作用,从而对癫痫的产生有控制作用。
- 刘智良徐如祥姚志彬张世忠马宏伟王娆
- 关键词：GABAB受体全细胞记录电压钳兴奋性突触后电流
