袁艳娟
- 作品数：7 被引量：68H指数：5
- 供职机构：南京工业大学生物与制药工程学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程理学生物学化学工程更多>>
- 柱前衍生化-高效液相色谱法跟踪检测酶法制备γ-D-谷氨酰-L-色氨酸反应过程被引量：1
- 2009年
- γ-D-谷氨酰-L-色氨酸(SCV-07)是一种新型广谱免疫调节类化合物。针对酶法合成SCV-07反应体系的特点,以邻硝基苯磺酰氯为柱前衍生试剂,RP-HPLC为分离模式,选用Lichrospher C18柱,20mmol/L磷酸盐溶液(pH3.0)和乙腈为流动相,梯度洗脱,检测波长230nm,建立了同时分析测定多种氨基酸和小肽的方法,所有组分于15min内洗脱完毕。氨基酸及二肽在0.96～260μmol/L范围内线性良好,相关系数大于0.9991;加标回收率在97.8%～101.6%之间;相对标准偏差为1.2%～2.9%。本方法适用于SCV-07产品的纯度分析,以及酶法转肽制备SCV-07反应过程跟踪检测,具有分析速度快,准确度高、操作简单等优点。
- 屠春燕吴燕娇袁艳娟姚忠唐美华韦萍
- 关键词：色氨酸衍生化反相高效液相色谱
- 胃蛋白酶水解绿豆分离蛋白的工艺被引量：6
- 2008年
- 选用胃蛋白酶对绿豆分离蛋白进行酶法水解,考察了原料预处理条件、pH、温度、底物浓度等对酶解的影响,结果表明:原料预处理最适条件为沸水浴中90℃处理20 min,在37℃、pH1.8、底物质量分数7%、酶量6 000U/g条件下酶解180 min,水解度(DH%)为19.86%,达到了制备小肽的水解度要求。实验证明,经过水解,绿豆分离蛋白各功能特性得到很好的改善。
- 徐娟袁艳娟屠春燕
- 关键词：酶法水解绿豆胃蛋白酶蛋白质
- Alcalase碱性蛋白酶酶解绿豆分离蛋白制备小分子肽的工艺研究被引量：19
- 2009年
- 以绿豆为原料,用Alcalase碱性蛋白酶酶解绿豆分离蛋白制备小分子多肽。采用单因素及多因素试验方法优化酶解条件,考察酶解过程中绿豆分离蛋白预处理、料液比、酶解温度、加酶量、酶解时间等对小肽得率的影响,测定水解产物的功能特性,并用液质联用技术(LC-MS)考察酶解得到的小肽的分子量分布范围。结果表明:绿豆分离蛋白预处理条件为95℃处理20min,酶解最佳条件为:65℃、pH8.5、底物浓度9%、加酶量6000U/g、酶解240min,水解度可达35.86%。经液质联用(HPLC-MS)分析证明水解产物的分子量集中在1000u以下,绿豆分离蛋白各功能特性得到很好地改善,表明该酶对绿豆分离蛋白水解效果良好,完全能达到制备多肽的水解度要求。
- 屠春燕袁艳娟徐娟唐美华
- 关键词：绿豆分离蛋白ALCALASE碱性蛋白酶酶解液质联用
- 新型衍生试剂柱前衍生氨基酸的高效液相色谱分析被引量：25
- 2008年
- 以邻硝基苯磺酰氯为标记试剂,RP-HPLC为分析模式,建立了一种新的氨基酸衍生化方法。通过液质联用对产物进行定性,研究并确定了最佳衍生化条件：衍生温度25℃,缓冲液pH 9.0,衍生时间10 min。实验建立了20种氨基酸的HPLC分离方法：选用Kromasil C18柱,流动相A为30 mmol/L的NH4Ac溶液（pH7.5）,B相为乙腈;采用梯度洗脱,检测波长275 nm,室温。20种氨基酸在0.025-6.4 mmol/L范围内线性关系良好,相关系数在0.998 0-0.999 8之间,检出限为0.01-0.113 nmol。
- 屠春燕赵珺葛佳璐吴燕娇唐美华袁艳娟韦萍李寿椿
- 关键词：衍生化氨基酸高效液相色谱
- 对甲氧基苯磺酰氯柱前衍生生物胺的高效液相色谱分离被引量：9
- 2010年
- 采用对甲氧基苯磺酰氯作为柱前衍生试剂,RP-HPLC为分析模式,建立了一种新的生物胺衍生化方法,并对葡萄酒中生物胺含量进行检测。通过液质联用对产物进行定性,研究并确定了最适衍生化条件:衍生温度50℃,缓冲液pH 9.0,衍生时间15 min。实验建立了7种生物胺的HPLC分离方法:Beckman ODS柱;流动相A为10 mmol/L的NH4Ac溶液(pH 6.37),B相为乙腈;采用梯度洗脱;流速1 mL/min;检测波长240 nm,室温。
- 屠春燕袁艳娟吴燕娇唐美华韦萍李寿椿
- 关键词：衍生化生物胺
- 响应曲面法优化绿豆皮中膳食纤维的提取工艺被引量：8
- 2008年
- [目的]为绿豆的综合开发利用提供有效途径。[方法]采用酶碱共处理法提取绿豆皮中的膳食纤维,以碱液浓度(NaOH)、提取时间、提取温度为考察因素进行单因素试验,再利用正交试验和响应曲面法优化提取工艺。[结果]膳食纤维提取率随碱液浓度、提取温度的增加而增加,随提取时间的延长而降低。各因素对绿豆皮膳食纤维提取率的影响由大到小依次为:提取温度>提取时间>碱液浓度。提取温度越高,提取时间越短,获得的膳食纤维量越多。[结论]绿豆皮中膳食纤维的最适提取工艺为:3 mol/L氢氧化钠,提取温度70℃,提取时间0.5 h,该条件下膳食纤维提取率达62.93%,所得膳食纤维的持水率为344%,溶胀性为3.2 ml/g。
- 袁艳娟金苗赵珺葛佳璐吴燕娇屠春燕
- 关键词：绿豆皮膳食纤维响应曲面法
- 中性蛋白酶酶解绿豆蛋白制备寡肽的研究被引量：5
- 2008年
- [目的]利用中性蛋白酶将绿豆蛋白质水解成肽和氨基酸,通过优化酶解条件得到水解度较高的绿豆肽。[方法]选用中性蛋白酶对绿豆分离蛋白进行酶法水解以制备寡肽。在单因素考察的基础上,采用四因素三水平的正交试验设计优化酶解条件。[结果]试验得出,最适的反应条件为温度50℃、pH值6.5、底物浓度7%、酶浓度6000 U/g、水解时间240 min。[结论]绿豆分离蛋白在此条件下酶解,水解度的平均值可达28.82%。
- 顾薇屠春燕袁艳娟潘永兰
- 关键词：绿豆蛋白中性蛋白酶酶解寡肽
