陈正凯
- 作品数：7 被引量：31H指数：4
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- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 桑泛素延伸蛋白基因片段的克隆及序列分析被引量：5
- 2007年
- 目的:利用3’RACE技术克隆植物泛素基因,是进一步研究其功能的基础。方法:本研究从桑树(丰驰桑)(Morus bomby-cis)幼叶中提取总RNA,反转录成cDNA,根据已报道的泛素基因序列设计1条正向引物,利用3’RACE(Rapid Amplification of cDNAEnd)技术进行扩增。结果:扩增出1条690 bp的泛素基因片段。该片段5’端为编码156个氨基酸残基的阅读框,3’末端有219bp的非翻译区。结论:同源分析表明,此cDNA序列为泛素延伸蛋白基因(Genebank登录号为DQ839403)。用Genedoc软件对该片段编码的氨基酸序列进行同源性分析的结果表明:桑树泛素延伸蛋白与马铃薯、烟草、陆地棉、黄瓜的泛素延伸蛋白以及苜蓿的核糖体S27A蛋白的同源性都在96%以上。
- 王利芬陈正凯陆小平
- 关键词：桑树
- 桑树多聚泛素基因的克隆及序列分析被引量：9
- 2006年
- 将蒙古桑于-3℃诱导48 h后,提取幼茎RNA反转录合成cDNA(第一链),以cDNA为模板,利用RT-PCR技术克隆桑树的泛素基因(mUb)。研究结果表明:克隆片段序列为泛素基因的阅读框架,其中有2个起始密码子(ATG)和1个终止密码子(TAA),长度为459个碱基;序列与菠萝、三叶胶树、烟草等物种的泛素基因相比较,有84%以上的同源性。进一步分析表明,该基因是桑树的二串泛素基因。该基因已被GenBank收录(登录号DQ104334)。
- 陆小平肖靓陈正凯王利芬楼程富
- 生物技术在昆虫分类中的应用被引量：2
- 2006年
- 现代生物技术在昆虫分类研究中具有快速、准确等特点,综述了近年来生物技术(如同工酶电泳、PCR、RFLP、RAPD、核酸序列分析、探针杂交等)在昆虫分类学领域的应用情况。
- 包立军蔡平陈正凯
- 关键词：生物技术分子生物学昆虫分类
- 琼脂糖凝胶中DNA回收技术的探讨被引量：10
- 2007年
- 从琼脂糖凝胶电泳分离的条带中回收DNA是常用的分子生物学技术。本试验通过比较常用的几种DNA片段的回收方法,发现用改进的离心法回收琼脂糖凝胶中的DNA片段效果较好,成本低,操作简单。并探讨了回收大片段DNA时,回收率较低的原因。
- 周君陈正凯徐剑陆小平
- 关键词：琼脂糖凝胶DNA回收技术离心法
- 家蚕泛素基因的多态性与野蚕泛素基因的克隆及原核表达
- 泛素是一个由76个氨基酸组成的高度保守的多肽链，由于其广泛分布于各类细胞中而被称遍在蛋白。其相对分子质量约为8.6 kDa，从不同种属的真核生物中得到的泛素一级结构几乎相同。目前已知泛素主要是通过泛素一蛋白酶体途径高效并...
- 陈正凯
- 关键词：家蚕野桑蚕泛素原核表达
- 文献传递
- 野桑蚕泛素基因的克隆及原核表达被引量：5
- 2007年
- 泛素-蛋白酶体途径(ubiquitin-proteasome pathway)是具有高度选择性的蛋白质降解途径,该途径对细胞内蛋白的选择性降解起着重要作用。设计一对特异引物,从野桑蚕体壁细胞中克隆了单体泛素基因的编码区,其GenBank登录号DQ839401。序列分析表明,该编码区的长度为231 bp,编码76个氨基酸,编码蛋白的相对分子质量约为8.6 kD,等电点为5.73。同源性比较发现,野桑蚕泛素基因与其他真核生物泛素基因在核苷酸水平上有83%同源性,在氨基酸水平上具有94%以上的相似性。将野桑蚕泛素基因片段与pGEX-4T-2连接,构建原核表达载体pGEX-4T-2/ubi,重组载体转化大肠杆菌BL21后在37℃及30℃的培养条件下,泛素基因得到高效表达。
- 陈正凯周君包立军徐剑沈卫德陆小平
- 关键词：野桑蚕泛素原核表达
- 桑树多聚泛素基因的克隆及序列分析
- 蒙古桑经-3℃诱导48h后,提取幼茎RNA反转录合成cDNA(第一链),以cDNA为模板,利用RT-PCR技术克隆桑树的泛素基因(mUb).研究结表明:克隆片段序列为泛素基因的阅读框架;其中有2个起始密码(ATG)和1个...
- 陆小平肖靓陈正凯王利芬楼程富
- 关键词：桑树
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