崔湘林
- 作品数:3 被引量:7H指数:1
- 供职机构:北京大学基础医学院生理学与病理生理学系更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 肿瘤转移抑制相关基因TMSG-1核仁定位信号序列的鉴定被引量:5
- 2011年
- 目的鉴定肿瘤转移抑制相关基因TMSG-1蛋白中潜在的特异性定位信号序列并探索其亚细胞定位机制。方法聚合酶链反应(PCR)扩增TMSG-1开放读码框全长及不同长度的截断片段,定向克隆于绿色荧光蛋白(GFP)表达质粒pEGFP—N1;各融合蛋白表达质粒转染人胚。肾细胞系HEK293细胞;转染48h后提取细胞总蛋白进行GFP的Western b1ot检测或用冷丙酮固定细胞后激光共聚焦显微镜观察融合蛋白的亚细胞定位。结果GFP分别融合TMSG-1全长蛋白(aa1-380)及其截断片段T1(aa1-70)、T2(aa1-128)、T3(aa129—380)、T4(aa71—128)、T5(aa71—179)和T6(aa71—380),Westernb1ot检测结果显示成功表达了各融合蛋白。激光共聚焦显微镜观察亚细胞定位显示融合蛋白T4(aa71—128)主要定位于细胞核内的核仁部位,融合蛋白T6(aa71—380)以细胞核内弥散分布为主,而TMSG—1全长融合蛋白及融合蛋白T1、T2、T3、T5则定位于胞质。进-步的序列缺失去除T4(aa71—128)羧基末端10个氨基酸得到截断片段T4△119-128,T4△119-128融合的GFP仍位于细胞核,但核仁内的绿色荧光信号明显减弱。结论肿瘤转移抑制相关基因TMSG-1存在潜在的核仁定位信号,位于aa119—128(RRRRNQDRPS),这一发现为深入研究TMSG-1的亚细胞定位及相关功能奠定了基础。
- 龚苗子由江峰崔湘林郑杰
- 关键词:肿瘤转移绿色荧光蛋白质类核仁组成区
- 自泌性白细胞介素-6对人肺巨细胞癌系PG生长的刺激作用被引量:1
- 1997年
- 目的探讨白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)对人肺巨细胞癌系PG生长的影响。方法应用逆转录PCR技术,Northern杂交方法分析IL-6及其受体基因表达;应用生物活性检测方法测定IL-6分泌;应用抗IL-6中和抗体鉴定IL-6对PG细胞生长的作用。结果PG细胞表达IL-6受体,重组人IL-6刺激PG细胞增殖;PG细胞表达IL-6且产生有生物活性的IL-6,抗IL-6抗体可特异性地抑制PG细胞生长。结论IL-6为PG细胞自泌性生长刺激因子。
- 付坚郑杰方伟岗吴秉铨曾灵芳由江峰王洁良崔湘林
- 关键词:肺肿瘤白细胞介素-6
- 结缔组织生长因子转染对人乳腺癌细胞系生物学行为的影响被引量:1
- 2007年
- 背景与目的:结缔组织生长因子(CTGF)是CCN家族成员之一,参与体内多种生理和病理生理过程。本研究探讨CTGF对人乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法:构建含有CTGF开放读码框的真核表达质粒,通过脂质体介导的方法将正义质粒转染MCF-7细胞,反义质粒转染MDA-MB-231细胞。观察CTGF不同表达水平与乳腺癌细胞增殖、凋亡、周期分布和体外侵袭等生物学行为的关系。结果:转染正义质粒使MCF-7细胞CTGF表达上调,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,细胞发生G0G1期阻滞,体外侵袭能力下降。转染反义质粒使MDA-MB-231细胞CTGF表达下调,促进细胞增殖,减少细胞凋亡,增强细胞体外侵袭能力,但对细胞周期无影响。结论:CTGF具有抑制乳腺癌细胞生长和侵袭的功能。促进细胞凋亡是CTGF抑制乳腺癌细胞体外生长的机制之一。CTGF可能对细胞周期有一定的影响。
- 陆敏由江峰王洁良崔湘林郑杰
- 关键词:结缔组织生长因子乳腺癌凋亡肿瘤侵袭