张敏静
- 作品数：9 被引量：22H指数：3
- 供职机构：暨南大学更多>>
- 发文基金：广东省教育部产学研结合项目国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 麦麸饲料中细菌对家蝇幼虫生长发育的影响被引量：9
- 2010年
- 从饲料用麦麸中分离出的12种细菌均能支持无菌家蝇Musca domesticaL.幼虫在胰化酪蛋白大豆卵黄琼脂(Trypticase Soy Egg Yolk Agar,TSEYA)培养基中完成整个生长发育过程。1)幼虫在接种香味类香味菌Myroides odoratimimus的TSEYA培养基中生长时间最短,仅需97.61±1.14h;2)幼虫在接种醋酸钙不动杆菌Acinetobacter calcoaceticus的TSEYA培养基中的化蛹率可达到86.81%;3)从接种嗜水汽单胞菌Aeromonas hydrophila的TSEYA培养基中得到的蝇蛹重量最高,达到20.15±0.23mg/个;4)除铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa饲养的家蝇羽化率较低(60.87%)外,其余各种细菌饲养的羽化率在84.33%～97.47%之间。此外,枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis、香味类香味菌、聚团肠杆菌Enterobacter agglomerans以及成团肠杆菌Pantoea agglomerans可作为单一营养来源支持幼虫完成整个生长发育过程。对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌Staphylococcus aurous、成团肠杆菌、大肠杆菌Escherichia coli、奇异变形杆菌Proteus mirabilis以及香味类香味菌中各种营养成分进行分析,结果发现,6种细菌均能提供大量的维生素B3(0.105～1.08g/kg)。在氨基酸方面,香味类香味菌和枯草芽孢杆菌中的10种昆虫必需氨基酸含量与总氨基酸含量之比(Essential amino acid/Total amino acid,EAA/TAA)最高,而金黄色葡萄球菌最低。这个比例与蛹重呈正相关(p=0.031)。在脂肪酸相对含量方面,金黄色葡萄球菌具有最高的饱和脂肪酸含量(76.38%),香味类香味菌含有56.79%的不饱和脂肪酸,而枯草芽孢杆菌则具有最高的支链脂肪酸含量(42.16%)。
- 苏志坚庞义李广宏张敏静林健聪黄亚东
- 关键词：麦麸细菌家蝇幼虫生长发育营养成分
- 蚁狮干粉中抗菌蛋白的分离纯化
- 张敏静
- 关键词：水提物抗菌蛋白凝胶过滤层析
- 抗Her-2抗体与人β防御素Ⅱ融合蛋白的表达、纯化及活性鉴定
- 2011年
- 利用小分子泛素样修饰蛋白(small ubiquitin-like modifier,SUMO)融合表达系统,在大肠杆菌Origami B(DE3)中表达人β防御素Ⅱ(humanβdefensin 2,HBD2)与抗人表皮生长因子受体2(Her-2)单链抗体(4D5 scFv)的融合蛋白。经20℃,l mmol/L IPTG诱导24 h后,获得相对分子质量约为41 kD的SUMO-HBD2-4D5融合蛋白,为可溶性表达,表达量占菌体上清总蛋白的42.2%。利用组氨酸亲和凝胶色谱(Ni-NTAsepharose)、特异性SUMO蛋白酶(SUMO protease)酶切和分子筛(Sephadex G-25)联用的方法可获得纯度大于95%的目的蛋白HBD2-4D5,其最终得率达到15 mg/L。HBD2-4D5 200μg对金黄色葡萄球菌(ATCC25923)和大肠杆菌K12D31具有较明显的杀伤作用。免疫荧光分析结果显示,HBD2-4D5蛋白能结合于Her-2高表达的人乳腺癌细胞SK-BR-3表面。本实验表达的HBD2-4D5双功能蛋白具有较好的抗菌活性和特异性结合SK-BR-3表面Her-2的能力,为日后用于靶向治疗Her-2高表达的肿瘤疾病提供研究基础。
- 袁丰瑞张敏静仝雷苏志坚项琪黄亚东
- 关键词：人表皮生长因子受体2融合蛋白靶向作用
- 重组人成纤维细胞生长因子21的中试研究及其对非酒精性脂肪肝的治疗作用研究
- 成纤维细胞生长因子21(Fibroblast growth factor 21,FGF21)是成纤维细胞生长因子家族的新成员,是一种特异性作用于肝脏、胰岛、和脂肪组织的新型代谢调控因子。FGF21具有降低机体血糖血脂、改...
- 张敏静
- 关键词：可溶性表达纯化NAFLD
- 文献传递
- 融和蛋白GST-SUMO-MT在大肠杆菌中的表达、纯化及其活性研究被引量：3
- 2007年
- 将编码融合蛋白GST-SUMO-MT的DNA片段连接到大肠杆菌表达载体pET-28a中,构建重组表达质粒pET-GS-MT并转化到大肠杆菌Origami(DE3)中。20℃,1mmol/L的IPTG诱导20h后,获得分子量约为43kDa的融合蛋白,表达量占菌体上清总蛋白的38.4%。利用谷胱甘肽交联琼脂糖(glutathionesepharose4B)凝胶柱和SephardexG-25分子筛联用可以得到纯度为95%以上的融合蛋白,得率约为70mg/L。该融合蛋白可与GST抗体产生阳性反应。融合蛋白GST-SUMO-MT可以显著提高宿主对Cd2+、Zn2+和Cu2+离子聚积的能力,其耐受能力比对照组分别提高4.2倍、4倍及1.6倍。此外,原子吸收光谱法测定,每分子GST-SUMO-MT可以结合2～3个Cd2+离子。
- 黄亚东苏烨丁长才张敏静李校堃苏志坚
- 关键词：金属硫蛋白融合蛋白纯化
- 非促分裂haFGF对H_2O_2损伤的人RPE细胞的保护作用被引量：4
- 2008年
- 目的研究非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子（nm-haFGF）对H2O2损伤的人视网膜色素上皮（RPE）细胞的保护作用。方法利用H2O2建立人RPE细胞氧化损伤模型,采用MTT法检测RPE细胞的存活率,核染色观察RPE细胞的核形态,流式细胞仪检测RPE细胞死亡率以及Western blot检测bcl-2的表达。结果nm-haFGF预处理可以提高H2O2损伤的REP细胞的存活率;nm-haFGF质量浓度在0-10mg/L的范围内,RPE细胞存活率从67.4%上升至92%;nm-haFGF刺激后,RPE细胞的bcl-2表达增加。结论nm-haFGF对H2O2氧化损伤RPE的细胞具有保护作用,并在一定范围内呈质量浓度依赖性。其保护机制可能是通过bcl-2的增加而产生抗凋亡作用。
- 湛敏黄亚东丁长才张敏静朱德勇苏志坚
- 关键词：视网膜色素上皮细胞
- 复方抗病毒制剂中贯叶连翘对莪术油药动学的影响研究
- 2013年
- 目的:研究莪术油及自制的复方抗病毒制剂给药后莪术油在新西兰兔体内的药物动力学。方法:采用反相高效液相色谱法检测给药后血浆中莪术油的标志性成分吉马酮的含量。结果:莪术油与复方抗病毒制剂灌胃给药后吉马酮的药时曲线符合开放二室模型。单方莪术油的药动学参数t1/2α,t1/2β,Vd,CL,AUC,Ka分别为(1.52±0.59),(1.97±0.27)h,(47.59±2.29)L·kg-1,(176.77±7.65)L·h-1·kg-1,(5.70±0.70)mg·h·L-1,(0.97±0.11)h-1,复方中莪术油则为(0.41±0.03),(1.47±0.35)h,(75.21±5.21)L·kg-1,(287.79±6.39)L·h-1·kg-1,(3.91±0.53)mg·h·L-1,(5.14±1.26)h-1。两者的t1/2α,t1/2β,Vd,CL,AUC并没有显著性差异,而复方的吸收速率Ka显著高于单方(P<0.05)。结论:复方抗病毒制剂中贯叶连翘没有影响莪术油有效成分在新西兰兔体内的分布和消除,但提高了莪术油的吸收速度,缩短了药物吸收的时间,有利于药物在体内迅速发挥作用。
- 李银宇贝煜张卉李健安赵文肖巧学张敏静黄亚东项琪
- 关键词：莪术油贯叶连翘吉马酮RP-HPLC
- 酸性成纤维细胞生长因子脂质体的制备及体外释药动力学被引量：3
- 2010年
- 采用pH梯度法制备酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)脂质体,以包封率为考察指标,单因素筛选最优制备工艺:十八胺用量为0.02g,柠檬酸缓冲液浓度为0.03mol/L,aFGF投药量为0.04mg/mL,内外水相pH差(ΔpH)为3.5,孵育温度为35℃,孵育时间为15min。aFGF脂质体包封率为(78.82±2.56)%,Zeta电位为9.68mV,平均粒径124.03nm。透析法测定aFGF脂质体的体外释药动力学,研究结果表明aFGF脂质体与aFGF原液相比具有一定的缓释作用。稳定性研究表明,aFGF脂质体较aFGF原液稳定性得到提高,4℃贮存为佳。所制备的aFGF脂质体包封率较高,稳定性较好,具有一定的缓释作用。
- 王倩张敏静张卉苏志坚项琪黄亚东
- 关键词：酸性成纤维细胞生长因子脂质体体外释放
- TAT-aFGF融合蛋白在大肠杆菌中的表达及其生物活性测定被引量：3
- 2010年
- 构建表达Tat与人酸性成纤维细胞生长因子(acidic fibroblast growth factor,aFGF)融合蛋白的重组质粒pET3c Tat-aFGF14-154和pET3c-Tat-aFGF27-154,并转化大肠杆菌BL21(DE3)中。37℃,1mmol/L的IPTG诱导4h后,获得分子量约为18kDa的融合蛋白,表达量分别占菌体总蛋白的42%和24%。利用阳离子交换(CM-Sepharose FF)、肝素亲和层析(Heparin-Sepharose CL-6B)以及分子筛(Sephadex G-25)联用的方法可获得纯度大于95%的目的蛋白,得率分别为93ml/L和78mg/L。Tat-aFGF14-154及其对照蛋白aFGF14-154对Balb/c3T3细胞有明显促细胞增殖的作用,最佳作用浓度分别为1280ng/ml和160ng/ml。而Tat-aFGF27-154及其对照蛋白aFGF27-154则几乎没有促细胞增殖活性。免疫荧光分析结果表明,Tat-aFGF14-154及Tat-aFGF27-154均能穿过PC12、Balbc/3T3、HaCaT和海马神经元细胞的细胞膜,并主要定位于细胞浆中。此外,四种重组蛋白均能降低Aβ25-35对大鼠海马神经元细胞的毒性,在剂量为1000ng/ml时,Tat-aFGF14-154、Tat-aFGF27-154、aFGF14-154及aFGF27-154细胞存活率分别为90.66%、81.87%、85.71%和78.02%,而Aβ25-35模型组的存活率仅为56.87%。
- 林健聪张敏静苏志坚陈红霞邱壮伟娄国锋项琪黄亚东
- 关键词：穿膜肽人酸性成纤维细胞生长因子融合蛋白
