林健聪
- 作品数:3 被引量:12H指数:2
- 供职机构:暨南大学更多>>
- 发文基金:国家科技部农业科技成果转化资金广东省教育部产学研结合项目博士科研启动基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- Tat-aFGF融合蛋白在大肠杆菌中的高效表达、纯化及对海马神经元的保护作用
- 目的: 在大肠杆菌中表达Tat蛋白转导结构域(Tat-Protein Transduction Domain,Tat-PTD49.57)与人酸性成纤维细胞生长因子(human acidic Fibroblast Grow...
- 林健聪
- 关键词:穿膜肽人酸性成纤维细胞生长因子融合蛋白保护神经元
- 文献传递
- 麦麸饲料中细菌对家蝇幼虫生长发育的影响被引量:9
- 2010年
- 从饲料用麦麸中分离出的12种细菌均能支持无菌家蝇Musca domesticaL.幼虫在胰化酪蛋白大豆卵黄琼脂(Trypticase Soy Egg Yolk Agar,TSEYA)培养基中完成整个生长发育过程。1)幼虫在接种香味类香味菌Myroides odoratimimus的TSEYA培养基中生长时间最短,仅需97.61±1.14h;2)幼虫在接种醋酸钙不动杆菌Acinetobacter calcoaceticus的TSEYA培养基中的化蛹率可达到86.81%;3)从接种嗜水汽单胞菌Aeromonas hydrophila的TSEYA培养基中得到的蝇蛹重量最高,达到20.15±0.23mg/个;4)除铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa饲养的家蝇羽化率较低(60.87%)外,其余各种细菌饲养的羽化率在84.33%~97.47%之间。此外,枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis、香味类香味菌、聚团肠杆菌Enterobacter agglomerans以及成团肠杆菌Pantoea agglomerans可作为单一营养来源支持幼虫完成整个生长发育过程。对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌Staphylococcus aurous、成团肠杆菌、大肠杆菌Escherichia coli、奇异变形杆菌Proteus mirabilis以及香味类香味菌中各种营养成分进行分析,结果发现,6种细菌均能提供大量的维生素B3(0.105~1.08g/kg)。在氨基酸方面,香味类香味菌和枯草芽孢杆菌中的10种昆虫必需氨基酸含量与总氨基酸含量之比(Essential amino acid/Total amino acid,EAA/TAA)最高,而金黄色葡萄球菌最低。这个比例与蛹重呈正相关(p=0.031)。在脂肪酸相对含量方面,金黄色葡萄球菌具有最高的饱和脂肪酸含量(76.38%),香味类香味菌含有56.79%的不饱和脂肪酸,而枯草芽孢杆菌则具有最高的支链脂肪酸含量(42.16%)。
- 苏志坚庞义李广宏张敏静林健聪黄亚东
- 关键词:麦麸细菌家蝇幼虫生长发育营养成分
- TAT-aFGF融合蛋白在大肠杆菌中的表达及其生物活性测定被引量:3
- 2010年
- 构建表达Tat与人酸性成纤维细胞生长因子(acidic fibroblast growth factor,aFGF)融合蛋白的重组质粒pET3c Tat-aFGF14-154和pET3c-Tat-aFGF27-154,并转化大肠杆菌BL21(DE3)中。37℃,1mmol/L的IPTG诱导4h后,获得分子量约为18kDa的融合蛋白,表达量分别占菌体总蛋白的42%和24%。利用阳离子交换(CM-Sepharose FF)、肝素亲和层析(Heparin-Sepharose CL-6B)以及分子筛(Sephadex G-25)联用的方法可获得纯度大于95%的目的蛋白,得率分别为93ml/L和78mg/L。Tat-aFGF14-154及其对照蛋白aFGF14-154对Balb/c3T3细胞有明显促细胞增殖的作用,最佳作用浓度分别为1280ng/ml和160ng/ml。而Tat-aFGF27-154及其对照蛋白aFGF27-154则几乎没有促细胞增殖活性。免疫荧光分析结果表明,Tat-aFGF14-154及Tat-aFGF27-154均能穿过PC12、Balbc/3T3、HaCaT和海马神经元细胞的细胞膜,并主要定位于细胞浆中。此外,四种重组蛋白均能降低Aβ25-35对大鼠海马神经元细胞的毒性,在剂量为1000ng/ml时,Tat-aFGF14-154、Tat-aFGF27-154、aFGF14-154及aFGF27-154细胞存活率分别为90.66%、81.87%、85.71%和78.02%,而Aβ25-35模型组的存活率仅为56.87%。
- 林健聪张敏静苏志坚陈红霞邱壮伟娄国锋项琪黄亚东
- 关键词:穿膜肽人酸性成纤维细胞生长因子融合蛋白