徐国东
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
- 供职机构：武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室更多>>
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- 丙型肝炎病毒功能基因在CHO细胞中的表达研究
- 丙型肝炎病毒(HCV)与宿主细胞因子的相互作用已经成为国内外研究的热点和难点。近期研究已经证实 HCV 的感染对宿主多种途径中基因的转录均能产生影响。为了进一步研究 HCV 中的哪些功能基因在与特定细胞因子的相互作用中起
- 郭佳鄢然徐国东郑从义
- 文献传递
- 丙型肝炎病毒功能基因在CHO细胞中的表达研究
- 2007年
- 丙型肝炎病毒(HCV)与宿主细胞因子的相互作用已经成为国内外研究的热点和难点。近期研究已经证实HCV的感染对宿主多种途径中基因的转录均能产生影响。为了进一步研究究竟是HCV中的哪些功能基因在与特定细胞因子的相互作用中起主导作用,构建了分别含有HCV Core、E1、E2、p7、NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B基因的真核表达质粒,分别转入宿主细胞CHO-K1中,在G418的选择压力下筛选获得稳定表达HCV单个蛋白的细胞系(10株)。PCR和RT-PCR可分别从稳定细胞系中检测到相应的HCV基因的DNA和mRNA,冻存和复苏不会造成HCV基因的丢失。Western-blot检测到稳定细胞系中表达E1,E2和NS5B蛋白,说明HCV基因在CHO-K1中已经形成稳定表达。薄层层析(TLC)结果显示,含有不同HCV基因的稳定传代细胞系中,UDP-葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶(UGCG)活性均发生了不同程度的变化,其中E2和p7的表达使胞内UGCG的活性提高了约1倍,NS2和NS5A则使UGCG的酶活提高了约0.6倍。该稳定细胞系的建立为研究病毒与宿主因子的相互作用及药物筛选奠定了基础。
- 郭佳鄢然徐国东郑从义
- 关键词：丙型肝炎病毒真核表达稳定细胞系
- 细胞因子GPS2在HCV复制中的作用研究
- 丙型肝炎病毒(hepatitis c virus,HCV)是一种严重危害人类健康的病原微生物,慢性感染后会引起肝脏脂肪变性、肝硬化和肝癌。目前,全球约3%的人口感染HCV,至今仍没有有效的疫苗,而长期以来针对HCV的标准...
- 徐国东辛秀郑从义
- 文献传递
