洪艳
- 作品数：92 被引量：183H指数：7
- 供职机构：浙江省医学科学院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金浙江省科技厅项目浙江省科技厅重点资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学化学工程更多>>
- 戊型肝炎病毒跨物种感染的研究进展
- 2008年
- HEV是引起经肠道传播的戊型肝炎的病原体，已经在多种动物体内检测到。最近，研究者们发现HEV可能跨越物种屏障感染人类，这就极大地提高了人群感染HEV的风险，威胁到人类的健康。因此，对于HEV种间感染的研究将为今后控制和预防HEV由动物经多种途径感染人类提供依据和方向。
- 陶薇陈勇洪艳
- 关键词：人畜共患
- 巢式PCR扩增性别决定基因序列检测兔骨髓间充质干细胞移植治疗关节软骨缺损的修复组织来源被引量：6
- 2007年
- 目的:明确骨髓间充质干细胞移植到关节软骨损伤处后,该处修复组织的细胞来源,以了解组织修复的过程。方法:实验于2006-01/2007-01在浙江省医学科学院生物工程所完成。①实验材料:3月龄新西兰大白兔,清洁级,体质量约2kg,由浙江省实验动物中心提供。②实验方法:利用兔性别决定基因序列设计两对PCR引物。取雄性新西兰大白兔进行骨髓间充质干细胞的分离培养与扩增。取雌性新西兰大白兔,暴露其膝关节软骨,用电钻钻孔造成膝关节软骨内侧直径4.5mm深3.5mm的全层关节软骨缺损,达软骨下骨。一侧植入骨髓间充质干细胞/胶原海绵,另一侧仅植入胶原海绵。③实验评估:于术后1,2,3,4,5个月取兔关节软骨缺损修复处组织提取总DNA,进行PCR扩增,鉴定移植物中是否存在性别决定基因,以明确细胞来源。结果:移植后1,2,3,4,5个月移植雄兔骨髓间充质干细胞及胶原海绵的关节修复处组织提取的DNA,用设计的引物通过PCR扩增出一条约200bp大小的条带,大小与阳性对照一致;而另一侧仅移植胶原海绵的关节软骨修复处组织提取的DNA,用设计的引物通过PCR扩增后未发现有条带。PCR扩增阳性样本测序分析显示,每个样本碱基序列一致,与GenBank上性别决定区Y基因组gb|AY785433.1|比较,扩增的样本序列与标准序列完全一致,序列同源性达100%。结论:雌兔关节骨髓间充质干细胞/胶原海绵复合物移植处的新生组织中含有雄性组织,提示新生软骨中有移植的雄性骨髓间充质干细胞分化来的软骨细胞。
- 杨亚冬张文元房国坚沃恩康何卓晶洪艳陈勇
- 关键词：性别决定基因骨髓间充质干细胞关节软骨缺损
- 板蓝根多糖对单纯疱疹病毒-2型DNA疫苗免疫效果的影响被引量：6
- 2020年
- 目的探讨板蓝根多糖(isatis root polysaccharide,IRPS)对单纯疱疹病毒-2型(herpes simplex virus type-2,HSV-2)DNA疫苗(pgD)免疫效果的影响。方法水煎醇沉法提取IRPS,苯酚-硫酸法测定含量,计算产率。将BALB/c小鼠随机分为5组:PBS对照组、pgD疫苗组(100μg)、pgD+IRPS组(100μg+150μg)、pKan+IRPS组(100μg+150μg)、IRPS组(150μg),每组8只,均经小鼠后腿肌肉注射,100μL/只,初次免疫后2周,加强免疫1次。末次免疫2周后,经眼球采血,分离血清,ELISA法检测HSV-2特异性IgG水平及IgG1、IgG2a亚型抗体滴度;无菌制备小鼠脾细胞悬液,MTS法检测脾脏T细胞增殖能力,ELISA法检测IFNγ和IL-10的含量。结果IRPS含量约8.745 mg,产率为87.45%。pgD+IRPS组小鼠血清中IgG水平显著高于其他4组(P<0.001),IgG1和IgG2a的滴度、IgG2a/IgG1比值、脾脏T细胞增殖能力、IFNγ和IL-10的含量均显著高于pgD疫苗组(P<0.05)。结论IRPS作为疫苗佐剂可显著增强HSV-2 DNA疫苗的免疫水平,具有良好的应用前景。
- 周寒鹏陶薇傅婷何卓晶洪艳
- 关键词：板蓝根多糖DNA疫苗佐剂
- CD40L对单纯疱疹病毒2型DNA疫苗的免疫增强作用研究
- 2015年
- 目的研究重组质粒pc DNA3-Kan/CD40L辅佐HSV-2 DNA疫苗增强小鼠体液免疫和细胞免疫的作用效果,探讨其作为HSV-2 DNA疫苗佐剂的潜力。方法 (1)构建鼠CD40L基因的重组真核表达质粒pc DNA3-Kan/CD40L。(2)体外细胞实验:检测重组质粒p CD40L刺激小鼠外周血淋巴细胞增殖情况和脾细胞分泌IFN-γ的能力。(3)体内动物实验:48只雌性BALB/c小鼠随机分为4个免疫组p K组、pg D组、pc CD40L+pg D组和p K+pg D组。小鼠后腿肌内注射,共免疫2次,间隔3周。末次免疫3周后,每组随机取4只小鼠进行致死剂量攻毒实验验证疫苗的保护作用。ELISA检测小鼠血清抗HSV-2 Ig G抗体水平和趋化因子RANTES;流式细胞术检测全血中CD4+和CD8+T细胞百分率以及分泌IFN-γ和IL-4的T细胞的百分率;MTS法检测小鼠脾脏T细胞的增殖能力。结果 (1)体外实验结果:重组质粒pc DNA3-Kan/CD40L对小鼠外周血淋巴细胞的增殖能力和刺激脾细胞分泌IFN-γ的能力均显著大于空质粒pc DNA3-Kan(P<0.05)。(2)体内实验结果:小鼠血清抗HSV-2 Ig G水平、趋化因子RANTES、脾淋巴细胞刺激指数和外周血CD4+T细胞数和分泌IFN-γ的Th1细胞数均高于其他免疫组(P<0.05)。pc DNA3-Kan/CD40L+pg D组预防小鼠感染HSV-2效果好于其他免疫组。结论 (1)重组质粒pc DNA3-Kan/CD40L能够诱导外周血淋巴细胞增殖并刺激脾细胞分泌IFN-γ具有作为疫苗佐剂的潜力。(2)pc DNA3-Kan/CD40L可以辅助HSV-2 DNA疫苗诱导BALB/c小鼠产生特异性抗HSV-2的体液免疫和细胞免疫,具备作为HSV-2 DNA疫苗免疫佐剂的能力。
- 胡如西陶薇傅婷何卓晶贾岚洪艳陈勇
- 常规放射检查对人类精子影响的初步研究
- 2014年
- 目的初步探讨男性受到低剂量电离辐射后的生殖安全性。方法将21份新鲜精液标本每份精液分成3组(对照组、1mGy组、50mGy组),1mGy组、50mGy组的精液样本分别接受1mGy(相当于普通X线片的剂量)和50mGy(相当于CT检查的剂量)的X线照射。照射后分别对3组精液样本的精子活力、精子存活率、精子运动特征及精子DNA完整性等指标进行检测和比较。结果各组间精子活力、精子存活率、精子运动特征参数、精子DNA完整性经配对t检验比较不同组别指标间的差异没有统计学意义(均P>0.05)。结论常规放射学检查对男性成熟的精子是相对安全的,但对男性生精功能、精子的受精功能以及子代的安全性还需进一步深入研究。
- 盛慧强赵佳骏洪艳
- 关键词：电离辐射精子DNA
- 戊型肝炎病毒嵌合重组蛋白的表达及免疫原性研究被引量：2
- 2005年
- 洪艳陈勇杨连华王怡婷经络胡华军
- 关键词：戊型肝炎病毒免疫原性研究人群感染率嵌合蛋白ORF2流行区
- 壳聚糖季铵盐(HTCC)载HSV-2型DNA疫苗pgD诱导小鼠免疫应答的初步研究被引量：2
- 2012年
- 目的:制备了壳聚糖季铵盐-DNA疫苗(pgD)纳米粒复合物,并对其诱导BALB/c小鼠产生免疫应答的能力做了初步研究。方法:通过复凝聚法制备了HTCC-pgD纳米粒复合物并对其进行表征。60只BALB/c小鼠随机分成5组:①HTCC10对照组;②pcDNAkan空载体对照组;③重组质粒pgD组;④HTCC∶pgD=5∶1组;⑤HTCC∶pgD=10∶1组。各组小鼠后腿肌肉注射,注射剂量为100μg/(只.次),隔2周免疫1次,共免疫2次。末次免疫2周后,通过流式细胞仪检测外周血中CD4+、CD8+百分率,ELISA法检测血清中IgG抗体效价、IFN-γ、IL-4含量这4个方面来研究该纳米粒复合物对小鼠免疫反应的影响。结果:HTCC能与质粒pgD很好结合成纳米复合物,保护DNA免受核酸酶的降解。小鼠经免疫2次后,流式细胞仪检测外周血中CD4+T淋巴细胞亚群结果显示HTCC-pgD纳米粒复合物组的CD4+百分率要高于其他对照组(P<0.05)。血清ELISA检测IgG结果显示与对照组相比,HTCC-pgD纳米粒复合物可诱导小鼠机体产生较高滴度的IgG抗体。HTCC-pgD纳米粒复合物组的小鼠血清中IFN-γ水平与对照组相比有所上调,IL-4水平有下降。结论:通过复凝聚法制备的HTCC-pgD纳米粒复合物可诱导BALB/c小鼠产生特异性的细胞免疫和体液免疫,为HSV-2型DNA疫苗研制提供科学依据。
- 傅婷洪艳陈勇何卓晶陶薇
- 关键词：壳聚糖季铵盐单纯疱疹病毒2型DNA疫苗免疫应答
- HSV-2DNA疫苗诱导小鼠免疫应答研究被引量：2
- 2005年
- 目的探讨含有单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)糖蛋白D全基因序列的重组质粒作为DNA疫苗的可能性。方法采用PCR方法获得HSV-2gD片段，构建含HSV-gD片段的重组质粒pcDNA3-gD。重组质粒作为DNA疫苗免疫小鼠，观察其对小鼠免疫效果及保护作用。结果重组质粒pcDNA3-gD免疫小鼠后可产生特异性抗体，可保护小鼠免受HSV-2的致死性攻击，存活率达75％。结论重组质粒pcDNA3-gD可诱导小鼠产生特异性免疫反应，可以作为HSV的候选DNA疫苗。
- 洪艳杨连华陈勇经络蒋骏航王怡婷
- 关键词：HSV-2DNA疫苗诱导免疫应答全基因序列糖蛋白D
- 一种新型单纯疱疹病毒II型DNA疫苗的构建及其初步研究被引量：4
- 2008年
- 目的:构建新型的含单纯疱疹病毒II型糖蛋白D基因(gD)的卡那霉素抗性真核表达质粒pgD,并探讨其作为DNA疫苗的可能性。方法:通过PCR扩增、酶切、连接及克隆筛选从质粒pET-28a(+)和质粒pcDNA3获得新型真核表达质粒载体pcDNAkan。再通过PCR从重组真核表达质粒pcDNA3-gD上扩增出HSV-2糖蛋白D全基因序列(gD),最后克隆重组获得含gD的重组质粒pgD。pgD作为DNA疫苗免疫小鼠,观察其对小鼠的免疫效果及保护作用。结果:pgD免疫小鼠后能产生特异性抗体,与对照组相比较具有显著性差异(P<0.01),在HSV-2病毒致死性攻毒实验中,pgD组存活率达75%。结论:重组质粒pgD能诱导小鼠产生特异性免疫应答,可为HSV的DNA疫苗研制提供科学依据。
- 何方洪艳陈勇
- 关键词：单纯疱疹病毒DNA疫苗PCR糖蛋白D
- 疟原虫红内期糖基化磷脂酰肌醇锚定蛋白的研究进展
- 2011年
- 疟疾传播的防控迫切需要研制有效的疟疾疫苗,而疟原虫各发育阶段的表膜蛋白是疟疾疫苗的良好候选分子,其中糖基化磷脂酰肌醇（GPI）锚定蛋白因其特有的分子结构和生物功能而受到广泛关注.此文以恶性疟原虫为主,对疟原虫红内期GPI锚定蛋白的研究进展作了综述.
- 王越洪艳陈勇
- 关键词：疟疾恶性疟原虫
