黄拓
- 作品数：7 被引量：36H指数：4
- 供职机构：教育部更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划上海市浦江人才计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生理学化学工程交通运输工程更多>>
- siRNA封闭BRCAA1基因对乳腺癌细胞MCF-7增殖和Rb基因表达的影响被引量：8
- 2006年
- 目的:研究siRNA封闭乳腺癌抗原相关基因1(BRCAA1)对乳腺癌细胞MCF-7增殖和Rb基因表达的影响。方法:采用RNAi技术对乳腺癌细胞MCF-7细胞BRCAA1基因进行特异性抑制,用阳离子脂质体与化学合成的Pre-designedan-ti-BRCAA1 siRNA构建转染复合体,反转染MCF-7细胞株48h后提取总RNA,分为未处理(NT)组、阴性对照组、阳性对照组和BRCAA1组,经反转录荧光实时PCR检测BRCAA1和Rb基因mRNA表达情况;检测细胞增殖抑制率。结果:与阴性对照组相比,siRNA转染MCF-7细胞后实验组BRCAA1基因mRNA水平降低了42.3%;Rb基因表达较之阴性对照组上升了11.1%;实验组MCF-7细胞增殖抑制率为(81.9±6.1)%,抑制作用明显强于对照组(P<0.05)。结论:BRCAA1基因的封闭明显抑制了MCF-7细胞的增殖,BRCAA1基因与Rb基因可能存在有某种相互拮抗的作用。
- 杨浩崔大祥李清黄拓高峰贺蓉潘碧峰邵君尤晓钢刘风涛
- 关键词：SIRNA乳腺癌RB基因
- 单向拉伸应力状态下沥青混合料强度和刚度特性被引量：5
- 2019年
- 为了解单向拉伸应力状态下沥青混合料的强度、刚度特性及破坏原因,进行不同加载速度的直接拉伸动回弹模量、静回弹模量及强度试验,揭示沥青混合料强度、回弹模量、破坏应变、应变能等参数随加载速度的变化规律。建立初始开裂对应的各个力学参数与加载速度之间的幂函数关系,并从破坏机理上将材料设计与结构层的设计相统一。研究结果表明:在单轴拉伸试验中,沥青混合料的动、静回弹模量随加载速度的增大而呈幂函数增大,且动回弹模量随着温度的升高而降低;进行不同加载速度的破坏试验时,试件的初始开裂应变基本保持稳定,且表现为拉应变破坏特征,故拉应变是导致沥青混合料发生破坏的原因,用第二强度理论作为直接拉伸条件下的破坏准则较合适。
- 黄拓黄拓蒋浩浩黄谋英李咪李亦鹏
- 关键词：沥青混合料
- 种子生长法制备长径比为2-5的金纳米棒被引量：18
- 2007年
- 报道了种子生长法合成金纳米棒。以氯金酸(HAuCl4)为原料,以硼氢化钠(NaBH4)为还原剂,首先还原金离子(Au3+)得到直径为3-4nm的金种子。以银离子(Ag+)为辅助离子,以十六烷基溴化铵(CTAB)为表面活性剂,以抗坏血酸为弱还原剂,加入金种子溶液之后可以获得纳米棒。研究表明,通过改变银离子的用量可以控制金纳米棒长径比为2-5。TEM和UV-vis光谱的表征证实了金纳米棒的形貌和光谱特征,并深入探讨了金纳米棒的生长机理。
- 潘碧峰崔大祥徐萍李清黄拓陈浩刘凤涛邵君尤晓刚贺蓉高峰
- 关键词：金纳米棒形貌控制
- brcaa1基因新抗原表位片段的扩增、快速表达和活性鉴定
- 2009年
- 目的制备包含乳腺癌新抗原表位的BRCAA1部分肽段。方法根据brcaa1基因序列与RTS技术要求,设计并合成带有His尾巴的PCR引物,利用brcaa1基因质粒作模板,利用PCR技术扩增获取相应基因片段并测序证实,然后采用RTS系统试剂盒与配套设备,快速翻译合成蛋白,利用PAGE电泳与Western Blot技术,鉴定表达蛋白的活性。结果PCR获取包含乳腺癌新抗原表位的BRCAA1基因片段;测序证实所获片段是所需的目的片段;Western Blot分析证实表达的肽段具有抗原活性。结论制备了具有活性包含乳腺癌新抗原表位的BRCAA1肽段,为进一步制备单克隆抗体与建立诊断方法奠定了基础。
- 李清崔大祥高峰黄拓徐萍贺蓉
- 关键词：聚合酶链反应WESTERNBLOT分析
- BRCAA1基因与蛋白功能的初步研究
- Brcaa1 是一个新近发现的基因，最近的研究发现该基因在乳腺癌及胃癌组织中有高表达，而在正常组织中无表达。对于它的序列分析发现这个蛋白与视网膜母细胞瘤结合蛋白有1226 个氨基酸序列一致，同时也有研究表明在乳腺癌MCF...
- 黄拓
- 关键词：蛋白功能乳腺癌胃癌基因表达病理分级
- 文献传递
- 树形分子递送survivin反义寡核苷酸对HepG2细胞的抑制效应被引量：5
- 2007年
- 目的:研究利用聚酰胺(polyamidoamine,PAMAM)树形分子递送survivin基因反义寡核苷酸(antisense oligodeoxy- nucleotide,asODN)抑制人肝癌细胞株HepG2细胞增殖的效应。方法:采用第1至第5代的聚酰胺树形分子室温下与反义survivin寡核苷酸混合制备树形分子与反义寡核苷酸的复合物(PAMAM-asODN),应用琼脂糖凝胶电泳及原子力学显微镜观察复合物的形态结构。PAMAM-asODN复合物转染HepG2细胞,同时设survivin反义寡核苷酸转染细胞作对照。共聚焦荧光显微镜检测复合物细胞转染效果;RT-PCR分析转染后细胞survivin mRNA的表达水平;MTT法检测复合物对HepG2细胞增殖的抑制效应。结果:琼脂糖凝胶电泳分析表明,树形分子与survivin反义寡核苷酸具有高效络合作用,形成了大小为25 nm左右的复合物;共聚焦荧光显微镜检测显示,与对照相比,PAMAM-asODN复合物转染细胞的效率显著提高;RT-PCR的结果表明,转染PAMAM-asODN复合物的肿瘤细胞中survivin mRNA表达显著降低;MTT结果表明,树形分子递送survivin反义寡核苷酸进入细胞后,HepG2细胞增殖明显受抑制,增殖抑制率随培养时间、复合物浓度、树形分子代数的增加而增加,6.0μmol/L G4.0 PAMAM-asODN与细胞培养96h可使抑制率达55%以上。结论:PAMAM树形分子能高效递送survivin asODN进入细胞,并抑制HepG2肿瘤细胞的增殖。树形分子可能是一种高效基因药物递送载体,在肿瘤治疗中具有潜在应用价值。
- 徐萍崔大祥潘碧峰李清黄拓刘凤涛陈浩鲍晨晨贺蓉高峰
- 关键词：树形分子SURVIVIN基因反义寡核苷酸肝癌细胞
- BRCAA1蛋白在胃癌组织与不同分化细胞株中的表达及其临床意义被引量：2
- 2007年
- 背景:BRCAA1蛋白是一个新蛋白,其在胃癌发生、发展中的作用尚不明确。目的:探讨BRCAA1蛋白在胃癌组织与不同分化细胞株中的表达水平及其临床意义。方法:收集60例胃腺癌患者,分别取胃癌和癌旁组织,应用免疫组化SP法检测BRCAA1蛋白的表达水平,并分析其与胃癌分级的关系。蛋白质印迹分析检测BRCAA1蛋白在胃癌高分化(MKN-1和MKN-74)、中分化(SGC-7901)和低分化(KATO-Ⅲ和MGC80-3)细胞株中的表达水平。结果:胃癌组织中BRCAA1蛋白的表达阳性率(23/60,38.3%)显著高于癌旁组织(0/60,0%)(P<0.01);BRCAA1蛋白在高分化(2/17,11.8%)、中分化(11/26,42.3%)和低分化胃癌组织中(10/17,58.8%)的表达阳性率存在显著差异(P<0.05)。蛋白质印迹分析结果表明BRCAA1蛋白在胃癌高、中、低分化细胞株中的表达水平逐渐增强。结论:BRCAA1蛋白参与了胃癌的发生、发展,其表达水平与胃癌低分化程度密切相关,BRCAA1蛋白可能是一个胃癌不良预后的标志物。
- 黄拓崔大祥李清徐萍孙荔
- 关键词：胃肿瘤免疫组织化学印迹法
