杨秉芬
- 作品数：51 被引量：118H指数：6
- 供职机构：解放军第309医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 重症继发性肺结核患者外周血单个核细胞c-Jun水平降低被引量：4
- 2015年
- 目的研究重症与轻症继发性肺结核患者c-Jun表达的差异,探讨其在重症继发性肺结核炎症反应和免疫损伤中的意义。方法用Affymetrix基因表达谱芯片筛选重症、轻症肺结核患者和正常健康者差异表达基因,并对差异基因进行生物信息学分析;用实时定量PCR(qRT-PCR)测定重症、轻症肺结核患者和健康者c-Jun相对水平;ELISA测定c-Jun在重症、轻症肺结核患者和健康者外周血单个核细胞(PBMC)中的蛋白水平。结果芯片筛选发现重症与轻症继发性肺结核患者存在大量差异表达基因,参与较多免疫反应和炎症反应通路,其中c-Jun表达下调2.27倍,参与61个信号通路;qRT-PCR结果显示,相比轻症继发性肺结核患者,c-Jun在重症继发性肺结核患者水平显著下调;ELISA检测也证实c-Jun表达在重症继发性肺结核患者有下调趋势,与芯片结果相符。结论重症与轻症继发性肺结核患者相比,c-Jun表达下调,c-Jun参与广泛的免疫反应和炎症反应通路,其下调与重症患者的免疫损伤有相关性。
- 苏瑾文刘艳华杨秉芬王若安红娟程小星
- 关键词：重症肺结核C-JUN免疫病理
- CD244促进活动性肺结核患者抗原特异性CD8^+T细胞的细胞毒作用被引量：1
- 2014年
- 目的研究表面受体CD244在活动性肺结核患者抗原特异性CD8+T细胞中的功能。方法密度梯度离心法提取活动性肺结核患者和ELISPOT阳性潜伏感染者的外周血单个核细胞,用ESAT-6和CFP-10多肽刺激PBMCs,然后用CD69标记抗原特异性细胞,通过流式细胞术检测CD244在CD3+CD8+CD69+细胞中的表达;流式细胞术分析CD244与脱颗粒相关的CD107a表达的关系;通过细胞内染色方法检测CD244与穿孔素和颗粒酶B的关系。结果 CD244在活动性肺结核患者的CD8+T细胞表达显著高于潜伏感染者(P=0.000 5);在抗原特异性CD8+T细胞,CD244+细胞表达CD107a比例显著高于CD244-细胞(P=0.002 2);CD244+细胞表达穿孔素和颗粒酶B比例显著高于CD244-细胞(P值分别为0.021 2,0.002 3)。结论 CD244促进活动性肺结核患者的抗原特异性CD8+T细胞的细胞毒作用。
- 杨秉芬王心静翟斐蒋静曹志红程小星
- 关键词：肺结核CD8+T细胞
- 人血小板衍生生长因子BB的原核高表达及其包涵体复性被引量：2
- 2015年
- 目的:在原核系统内获得高表达的人血小板衍生生长因子BB(PGDF-BB),并对形成的包涵体进行复性。方法:对PGDF-BB核酸编码序列进行优化,构建pET-22b-PGDF-BB表达载体,以提高PCDF-BB的表达量;优化PGDF-BB包涵体复性条件,提高蛋白复性率和生物活性。结果:构建了pET-22b-PGDF-BB高效表达载体,原核表达的重组人PGDF-BB占细菌总蛋白的25%,PGDF-BB包涵体复性率达到15%。结论:对表达序列的优化设计可显著提高蛋白的表达量,复性方法的改良提高了蛋白的复性率和生物活性。
- 孙卫国张灵霞杨秉芬刘艳华程小星
- 关键词：包涵体复性
- 人血清白蛋白-睫状神经营养因子突变体融合蛋白基因在毕赤酵母中的表达及表达产物的纯化和活性鉴定被引量：11
- 2005年
- 为了延长人睫状神经营养因子突变体的体内半衰期 ,将人血清白蛋白 (HSA)的C 末端和人睫状神经营养因子突变体AX15 (R13K)的N 末端通过一个 11个氨基酸的连接肽融合在一起 ,构建了融合蛋白HSA AX15 (R13K)。HSA AX15 (R13K)融合蛋白基因在巴斯德毕赤酵母中进行表达后通过阳离子交换层析、反向层析和凝胶过滤对表达产物进行了分离纯化。体外TF 1细胞存活实验表明与HSA融合并未影响AX15 (R13K)的生物学活性。体内动物实验表明HSA AX15 (R13K)融合蛋白的疗效比AX15 (R13K)更为持久 :每 3天注射一次 4 8mg kg的HSA AX15 (R13K)融合蛋白的治疗效果优于每天注射一次 1 6mg kg的AX15 (R13K)的治疗效果。HSA AX15 (R13K)融合蛋白不但可以减少用药次数 ,提高病人的顺应性 ,而且还可以减少用药量和血药浓度的波动 ,从而降低副反应 ,在临床应用上具有一定的优势。
- 赵洪亮薛冲熊向华张伟杨秉芬刘志敏
- 关键词：睫状神经营养因子巴斯德毕赤酵母
- 趋化因子在重症继发性肺结核患者表达研究
- 2015年
- 目的对基因表达谱芯片筛选出的重症比对轻症继发性肺结核患者基因CCL3、CCL4、CXCL2进行验证,探索其表达下调与重症继发性肺结核免疫病理机制的关系。方法用Affymetrix基因表达谱芯片检测重症和轻症继发性肺结核患者以及与健康对照相比的差异表达基因;用real-time PCR法测定重症、轻症患者和健康对照CCL3、CCL4、CX-CL2的相对表达量;用方差分析和非参数检验统计方法判断组间比较的统计学意义。结果表达谱芯片筛选出重症继发性肺结核患者有大量差异表达基因,一些免疫基因表现为下调,可能与病变严重程度有相关性。real-time PCR结果显示CCL3在重症vs轻症表达下调(P<0.05),重症vs健康有下调趋势;CCL4在组间比较虽无统计学差异但重症vs轻症、重症vs健康有下调表达趋势;CXCL2在重症vs轻症有下调趋势,相对于健康人有轻度上调(P<0.05)。结论基因表达谱芯片检测CCL3、CCL4、CXCL2在重症vs轻症继发性肺结核患者表达下调,验证结果与芯片基本相符,趋化因子下调可能在重症继发性肺结核免疫病理机制中有重要作用。
- 苏瑾文刘艳华杨秉芬程小星
- 关键词：结核趋化因子聚合酶链反应
- MS4A3蛋白作为标志物在诊断活动性结核病中的应用
- 本发明公开了MS4A3蛋白作为标志物在诊断活动性结核病中的应用。与健康人和结核潜伏感染者相比，活动性结核病患者的PBMCs中MS4A3基因的表达量显著增加；MS4A3基因的表达量可以用于区分活动性结核病患者和结核潜伏感染...
- 程小星杨秉芬翟斐安红娟曹志红刘艳华王若
- 文献传递
- CCL3、CCL4下调表达和重症继发性肺结核病理损伤的关系被引量：4
- 2015年
- 目的研究趋化因子CCL3和CCL4下调表达与重症继发性肺结核病理损伤的相关性。方法用基因表达谱芯片对5例重症、5例轻症继发性肺结核和5例健康对照进行差异基因的筛选;用实时荧光定量PCR测定20例重症、20例轻症,患者和8例健康对照外周血单个核细胞CCL3、CCL4相对表达量;酶联免疫吸附法测定20例重症、20例轻症和20例健康对照CCL3、CCL4在血浆中的蛋白表达量;用方差分析和非参数检验统计方法判断组间比较的统计学差异。结果芯片筛选重症与轻症组比较的差异基因显示CCL3、CCL4表达下调,下调比值分别为0.153 1和0.122 7。实时荧光定量PCR结果、酶联免疫吸附法均显示重症组与轻症组相比CCL3、CCL4表达下调(均P<0.05)。结论重症继发性肺结核患者CCL3、CCL4表达下调,可能是促进重症继发性肺结核肺结构破坏的因素之一。
- 苏瑾文刘艳华杨秉芬程小星
- 关键词：重症肺结核免疫反应
- 重症继发性肺结核患者差异表达基因和IL-1β表达的验证被引量：1
- 2014年
- 目的对基因表达谱芯片中筛选的差异表达基因IL-1β进行验证,分析其表达下调与重症继发性肺结核免疫病理的关系。方法 (1)用Affymetrix基因表达谱芯片对重症继发性肺结核(重症)、轻症继发性肺结核(轻症)患者和正常对照者(对照)筛选差异表达基因;(2)用实时荧光定量PCR(RT-PCR)扩增来测定重症、轻症患者和对照IL-1β相对表达量;(3)ELISA法测定IL-1β在重症、轻症患者和对照血浆中的蛋白表达量;(4)用方差分析和非参数检验统计方法判断组间比较的差异,P<0.05为差异有统计学意义。结果 (1)芯片筛选差异基因显示重症肺结核患者IL-1β表达下调13.06倍,参与30个信号通路;(2)RT-PCR结果显示IL-1β在重症和对照组表达下调,P<0.05;(3)ELISA验证IL-1β在重症及轻症组和重症及对照组均表达下调,P<0.05,与芯片结果相符。结论重症继发性肺结核患者IL-1β表达下调,IL-1β可能是其肺结构免疫病理损伤发生发展的重要因素之一。
- 苏瑾文刘艳华杨秉芬王若安红娟程小星
- 关键词：白细胞介素1Β免疫反应
- CD244免疫调节作用及其机制的研究进展被引量：1
- 2012年
- 免疫受体CD244是信号淋巴细胞活化分子家族成员，在NK细胞、T细胞、嗜酸性粒细胞的活性调节中具有重要的作用，在感染免疫、炎症发生和肿瘤免疫中也发挥重要的调节作用，因而研究CD244的分子结构、免疫调节作用及其机制对感染和肿瘤的免疫治疗具有重要的意义。
- 杨秉芬程小星
- 关键词：免疫调节机制肿瘤
- 初治菌阳肺结核患者外周血NK细胞的分布特点研究
- 目的：研究活动性肺结核患者外周血淋巴细胞群内NK细胞比例及自发凋亡率特点.
方法：初治菌阳肺结核患者和体检正常的正常对照各20例,年龄和性别无显著差异,密度梯度离心分离PBMCs,用流式细胞仪分析CD3-CD1...
- 王心静杨秉芬翟斐程小星
- 关键词：外周血自然杀伤细胞
- 文献传递
