邱为民
- 作品数：6 被引量：21H指数：2
- 供职机构：四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 小鼠znf230和人TCP11基因的克隆和功能研究
- 小鼠作为一种模式生物被广泛地运用在精子发生相关基因的功能研究中.该文运用cDNA末端快速扩增技术和电子克隆的方法,克隆了人类精子发生相关基因ZNF230的小鼠同源基因znf230(GenBank接受号AF353167)....
- 邱为民
- 关键词：精子发生锌指蛋白转录调控
- ZNF230/荧光蛋白融合基因表达载体的构建及其在Cos细胞中的表达与定位被引量：4
- 2004年
- 为了用绿色荧光蛋白标记观察人类无精症相关基因ZNF230在Cos7细胞中的蛋白质表达及定位,用PCR方法扩增得到突变的人和小鼠mt ZNF230和mt znf230基因,使其3′端的终止密码TGA突变为TGG,并装入T 载体,双酶切后通过定向克隆将其与真核表达载体pEGFP N1的绿色荧光蛋白(greenfluorescenceprotein,GFP)基因融合,构建了ZNF230—荧光蛋白融合基因表达载体。然后经真核表达质粒-脂质体介导,导入Cos7细胞系。荧光显微镜观察显示:在空白载体pEGFP N1转染的Cos细胞中荧光布满整个细胞,而在转染阳性载体pEGFP ZNF230和pEGFP znf230的Cos细胞中荧光主要聚集在细胞核中。表明转染的Cos细胞系能高效表达人ZNF230和小鼠znf230蛋白,ZNF230基因表达的蛋白定位于细胞核内。
- 许文明张思仲邱为民何国平刘运强马用信孙岩
- 关键词：绿色荧光蛋白COS细胞
- 一种新的cDNA末端快速扩增获取全长cDNA的方法被引量：15
- 2001年
- 为克隆精子发生相关基因的全长cDNA ,根据mRNA差异显示获得的ESTs设计引物 ,利用一种新的cDNA末端快速扩增方法 (SMARTRACE)扩增该EST的 5′末端 ,并进行克隆测序 ,与mRNA差异显示获得ESTs拼接后 ,获得了三个新的全长cDNA。结果表明 ,SMARTRACE是一种简便、有效的克隆cDNA5′末端未知序列的技术。
- 邱为民张思仲武辉张戈肖翠英
- 关键词：CDNA末端快速扩增睾丸
- 人受精促进肽受体(TCPllc)基因的克隆、表达及选择性剪接
- 2003年
- 目的 分离、克隆人受精促进肽受体TCPll基因1个新的转录本TCPllc的全长cDNA,研究其表达的阶段性、组织特异性及TCPll基因3种转录本的剪接方式。方法 运用BLAST方法获得与TCPlla同源的ESTs,以逆转录的人睾丸cDNA为模板进行PCR扩增,将PCR扩增片段克隆入pGEM-T easy载体并测序;采用BLAST、ClustalW及RT-PCR方法分析各转录本的基因组结构及剪接方式;RT-PCR方法分析其组织表达的特异性和阶段性。结果 获得1个新的全长cDNA,它编码440个氨基酸的蛋白质,与TCPlla、b相比,在基因组的5′-端存在复杂的外显子剪接现象。RT-PCR结果显示该转录本在正常睾丸中表达,而其他组织、无精症患者及胎儿睾丸组织中未见该基因表达。结论 从人睾丸组织中分离到人受精促进肽受体TCPll基因1个新的转录本TCPllc, 结合mTcp-11的功能提示,TCPll基因a、b、c这3种转录本对精子发生和人受精过程可能起重要作用。
- 马用信张思仲吴洽庆孙岩邱为民许文明
- 关键词：克隆
- 原发无精症相关候选基因的克隆、定位及表达研究
- 该文从克隆新的与无精症相关基因入手,并对新基因做了初步的表达研究和功能分析,结果如下:1、运用mRNA差异显示和cDNA末端快速扩增技术,克降了人类精子发生相关基因ZNF230极其小鼠同源基因Znf230.两者均编码一个...
- 邱为民
- 关键词：精子发生男性不育锌指蛋白基因基因克隆
- 文献传递
- 人类生精的相关基因被引量：2
- 2004年
- 遗传因素在男性的生精过程中起重要作用。目前大多数的研究以小鼠为模型。该文以精子发生过程的先后为主线 ,主要阐述通过基因剔除等技术 ,对与生殖相关的一些较重要基因功能的认识 ,并简述目前研究方法的局限性和对未来研究进展的展望。
- 许文明张思仲邱为民
- 关键词：人类遗传学精子发生基因剔除生殖
