李丽英
- 作品数：30 被引量：45H指数：4
- 供职机构：首都医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学政治法律更多>>
- “雨课堂”在《医学细胞生物学》课程教学中的应用研究被引量：6
- 2020年
- 基于疫情防控和教育现代化这个大背景,首都医科大学细胞生物学教研室在本学期使用"雨课堂"进行《医学细胞生物学》理论课的课程教学。结合使用雨课堂的教学实践,本文提出课前准备、课中教学和课后复习3个部分相应的实施方案,赋予整个教学过程全新的体验,并完成对教学过程和效果的全景式数据采集,以期提高总体教学质量和教学效果。
- 杨乐李丽英
- 关键词：医学细胞生物学教学设计混合教学模式
- 脂多糖通过TLR4参与小鼠脂肪性肝损伤模型炎症反应观察被引量：5
- 2019年
- 目的:研究在小鼠脂肪性肝损伤中脂多糖(LPS)参与肝脏炎症反应的机制。方法:动物实验采用30只雄性ICR小鼠,随机分为对照组、造模第3天组、造模第7天组、造模第14天组、造模第28天组,每组6只。对照组饲喂正常饲料,4个造模组饲喂蛋氨酸胆碱缺乏联合高脂饲料建立小鼠脂肪性肝损伤模型。造模后取肝脏采用ELISA法检测LPS含量; qRT-PCR法检测Toll样受体4 (TLR4) mRNA的表达;免疫荧光染色观察TLR4蛋白的分布。细胞实验采用从小鼠骨髓分离培养的单核/巨噬细胞,分为对照组和LPS组,分别用PBS或LPS刺激6 h后采用qRT-PCR法检测单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、巨噬细胞炎症蛋白-1β(MIP-1β)、白细胞介素-6(IL-6) mRNA的表达; ELISA法检测细胞培养上清中MCP-1蛋白的含量。结果:5组小鼠肝组织中LPS含量比较,差异无统计学意义(P=0. 313);与对照组比较,造模第14、28天组肝组织中TLR4 mRNA表达增加(P <0. 05); TLR4蛋白在造模第14天小鼠肝脏的非实质细胞中表达。与对照组比较,LPS组MCP-1、TNF-α、IL-1β、iNOS、MIP-1β、IL-6 mRNA和MCP-1蛋白表达增加(P <0. 05)。结论:LPS在小鼠脂肪性肝损伤中通过上调单核/巨噬细胞炎症因子的表达发挥促炎作用。
- 纪晓方李伟阳杨琳李丽英
- 关键词：小鼠脂多糖TOLL样受体4炎症
- 高内涵分析及Western blotting法在蛋白质核质分布研究中的应用及比较研究被引量：4
- 2016年
- 目的使用不同方法对蛋白质的核质分布进行检测并比较差异。方法细胞经免疫荧光染色后使用高内涵分析(high content analysis,HCA)对蛋白质的细胞质或细胞核总荧光强度进行分析;分别提取胞质及胞核蛋白,使用Western blotting法对核质组分中的蛋白质含量进行鉴定。结果两种方法均可检测到蛋白质的出核转运;经定量分析,HCA法检测到的HuR蛋白质/核比升高倍数小于Western blotting法。结论使用HCA法检测蛋白质核质定位具有准确、客观、成本低、快捷、多参数等特点,不失为Western blotting的有效补充及替代方法。
- 纪晓方李丽英常娜
- 关键词：WESTERNBLOTTING
- 高内涵分析及Western Blot在蛋白质核质分布研究中的应用及比较研究
- 目的：使用不同方法对蛋白质的核质分布进行检测并比较差异。方法 细胞经免疫荧光染色后使用高内涵分析对蛋白质的细胞质或细胞核总荧光强度进行分析;分别提取胞浆及胞核蛋白,使用Western Blot对核质组分中的蛋白质含量进行...
- 纪晓方李丽英常娜
- 通过单细胞测序分析瘢痕相关巨噬细胞影响肝星状细胞活化的分子机制
- 2024年
- 目的建立体外诱导人巨噬细胞为瘢痕相关巨噬细胞(scar-associated macrophages,SAMs)的实验方案,研究SAMs使肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)活化的分子机制。方法利用已发表的人和小鼠纤维化肝组织非实质细胞的单细胞测序数据,分析SAMs中纤维化相关功能基因的表达。使用佛波醇12-十四酸酯13-乙酸酯(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)和纤维蛋白溶酶原(plasminogen,PLG)把人单核细胞系THP-1诱导成为SAMs。收集SAMs培养上清与人HSCs细胞系LX-2共培养。采用实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)的方法检测SAMs标志物、纤维化相关功能基因和HSCs活化标志物的表达。结果单细胞测序结果显示,不同病因造成的小鼠纤维化肝组织或肥胖患者损伤肝组织中均存在SAMs,且均高表达其标志基因和纤维化相关基因SPP1、CTSD。联合使用PMA及PLG使THP-1的SAMs标志物CD9、TRME2、LGALS3、CD63表达水平升高,同时SPP1、CTSD表达水平升高。体外诱导的SAMs培养上清可以使LX-2活化。结论SAMs存在于各种病因导致的人或小鼠损伤/纤维化肝组织中,并具有相似的特征和功能。联合使用PMA及PLG可将THP-1诱导为SAMs。SAMs可能通过产生SPP1、CTSD促进肝星状细胞活化,从而推进肝纤维化的发生与发展。
- 刘畅李丽英常娜
- 关键词：肝星状细胞
- 舒拉明盐治疗肝纤维化的新用途
- 本发明公开了舒拉明盐在制备抗肝纤维化药物中的应用。舒拉明盐抗肝纤维化是指降低肝组织中羟脯氨酸含量，减少肝组织中胶原纤维的含量，降低肝组织中I、III型胶原mRNA表达水平，降低肝纤维化HA、LN、PCIII、IV-C4血...
- 李丽英
- 文献传递
- 激活大麻素受体1诱导的单核巨噬细胞J774A.1的迁移依赖RNA结合蛋白HuR被引量：2
- 2016年
- 目的研究大麻素受体1(cannabinoid receptor 1,CB1)在单核巨噬细胞迁移中的重要作用以及RNA结合蛋白人抗原R(human antigen R,HuR)参与其中的可能机制。方法选用单核巨噬细胞系J774A.1,应用琼脂糖凝胶电泳和免疫荧光染色技术鉴定J774A.1中CB1以及HuR的表达;ACEA和AM281分别为CB1的药理学激动剂和拮抗剂,应用Boyden chamber法检测ACEA和AM281对J774A.1迁移活性的影响。HuR的基因干扰用于确定激活CB1诱导的J774A.1迁移功能是否依赖HuR;胞质蛋白的分离用于探究激活CB1是否能引起J774A.1胞质中HuR的富集;RT-qPCR和Western blotting法检测CB1和HuR mRNA和蛋白质的变化情况。结果该研究证明J774A.1在基因和蛋白质水平上均表达CB1和HuR;激活CB1能够促进J774A.1的迁移(P<0.01)并且能够被其药理学拮抗剂AM281所抑制;激活CB1诱导的J774A.1的迁移依赖HuR;激活CB1促进了J774A.1胞质中HuR的富集进一步影响了CB1的表达,由此HuR参与了激活CB1诱导的J774A.1的迁移。结论激活CB1能够诱导单核巨噬细胞系J774A.1的迁移,且此过程依赖RNA结合蛋白HuR。
- 赵中新常娜盖菁菁田蕾李丽英
- 关键词：大麻素受体1细胞迁移
- 大麻素受体1通过PI3K/AKT信号通路介导单核巨噬细胞向M1型极化被引量：1
- 2018年
- 该文采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白印记实验(Western blot)、流式细胞分析(flurescence-activated cell sorting, FACS)技术检测骨髓单核巨噬细胞(bone marrow monocytes/macrophages, BMMs)中大麻素受体1(cannabinoid receptor 1, CB1)对BMMs极化的作用。结果表明,使用1μmol/L ACEA(CB1激动剂)处理细胞发现, BMMs中M1型的标志物CD86、IL-1、MIP-1β、NOS2、IL-6、TNF-α的m RNA水平均上调;用流式细胞分析技术检测发现, BMMs中M1型的标志物CD86蛋白质水平上调;使用PI3K/AKT信号通路的特异性抑制剂(LY294002)预处理BMMs,再加入1μmol/L ACEA刺激细胞,与未加入LY294002的对照组相比,这些M1型BMMs标志物的mRNA表达均被抑制;通过Western blot法证实ACEA使p-AKT增加,而使用1μmol/L AM281(CB1药理学拮抗剂)阻断CB1功能,则抑制了ACEA导致的p-AKT增加。上述结果说明, CB1通过PI3K/AKT信号通路介导BMMs向M1型极化。
- 杨琳田蕾田蕾段向辉李丽英
- 关键词：大麻素受体1PI3K/AKT信号通路
- 磷酸鞘胺醇对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的调控及机制研究被引量：2
- 2015年
- 采用Western blot、免疫荧光和PCR检测小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7中S1P受体1-3(S1PR1-3)的表达,然后应用吞噬实验和免疫荧光的方法检测磷酸鞘胺醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)对其吞噬功能的调节。分别应用药理学工具和小干扰RNA的方法研究S1P调节其吞噬活性的作用机制。结果显示,小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7表达S1PR1-3;S1P剂量依赖地增强小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7的吞噬功能,应用S1PR2或S1PR3的拮抗剂和si RNAs可抑制S1P增强的小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7的吞噬活性;而应用S1PR1的拮抗剂和si S1PR1并不影响S1P增强的RAW264.7的吞噬作用;且S1P可以显著上调RAW264.7中S1PR2和S1PR3的表达,但是不改变S1PR1的表达,提示S1P通过正反馈机制增强其介导的小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7的吞噬功能。结果表明,S1P/S1PR2/3信号通路增强小鼠单核巨噬细胞吞噬活性,为单核巨噬细胞吞噬作用的分子机制调控研究提供了新线索。
- 张媛媛李伟阳刘欣李丽英
- 关键词：单核巨噬细胞小干扰RNA
- 小鼠骨髓巨噬细胞分离培养及吞噬能力检测综合实验的设计
- 2021年
- 目的 细胞培养是现代生物技术中最核心、最基础的技术。目前细胞生物学实验课程对原代细胞分离培养技术培训不足。因此文章设计了实验以进一步提高医学生细胞培养技能。方法 分离4~6周龄雄性ICR小鼠骨髓细胞,在体外使用含有巨噬细胞集落刺激因子的RPMI 1640培养液培养七天,于第三天更换培养液一次,第七天通过乳胶珠吞噬实验检测细胞吞噬能力。结果 小鼠原代骨髓单核细胞经巨噬细胞集落刺激因子诱导一周后,分化为巨噬细胞,同时该细胞具有吞噬能力。结论通过实验,学生掌握了相关实验技能;加深对相关理论课程的理解;科研能力及综合素质得到有效提升。
- 李丽英常娜
- 关键词：细胞生物学课程设计细胞原代培养细胞分化细胞吞噬
