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激活大麻素受体1诱导的单核巨噬细胞J774A.1的迁移依赖RNA结合蛋白HuR被引量：2: 2016年; 目的研究大麻素受体1(cannabinoid receptor 1,CB1)在单核巨噬细胞迁移中的重要作用以及RNA结合蛋白人抗原R(human antigen R,HuR)参与其中的可能机制。方法选用单核巨噬细胞系J774A.1,应用琼脂糖凝胶电泳和免疫荧光染色技术鉴定J774A.1中CB1以及HuR的表达;ACEA和AM281分别为CB1的药理学激动剂和拮抗剂,应用Boyden chamber法检测ACEA和AM281对J774A.1迁移活性的影响。HuR的基因干扰用于确定激活CB1诱导的J774A.1迁移功能是否依赖HuR;胞质蛋白的分离用于探究激活CB1是否能引起J774A.1胞质中HuR的富集;RT-qPCR和Western blotting法检测CB1和HuR mRNA和蛋白质的变化情况。结果该研究证明J774A.1在基因和蛋白质水平上均表达CB1和HuR;激活CB1能够促进J774A.1的迁移(P<0.01)并且能够被其药理学拮抗剂AM281所抑制;激活CB1诱导的J774A.1的迁移依赖HuR;激活CB1促进了J774A.1胞质中HuR的富集进一步影响了CB1的表达,由此HuR参与了激活CB1诱导的J774A.1的迁移。结论激活CB1能够诱导单核巨噬细胞系J774A.1的迁移,且此过程依赖RNA结合蛋白HuR。; 赵中新常娜盖菁菁田蕾李丽英; 关键词：大麻素受体1 细胞迁移

5d-PGJ2以miR-27b-3p、miR-181a-1-3p和miR-326-5p依赖的方式抗小鼠慢性肝损伤: 巨噬细胞是炎症的关键因素,可以导致肝损伤.有文献报道,巨噬细胞的持续激活启动了这一过程.本实验室前期研究结果表明,抗炎因子15-脱氧-Δ12,14-前列腺素J2(15d-PGJ2)抑制骨髓来源的巨噬细胞(BMM)迁移和炎...; 李伟阳纪晓方常娜田蕾杨静静谢杰施杨琳段向辉董成宾祁长波李丽英; 关键词：15D-PGJ2 PPARΓ MICRORNA

一种简单的分离、培养及鉴定小鼠外周血单核巨噬细胞方法的建立被引量：3: 2015年; 目的在L929条件培养基的作用下体外分离、培养小鼠外周血单核巨噬细胞,并进行鉴定。方法密度梯度离心法分离小鼠外周血单核巨噬细胞,用L929条件培养基培养7 d。采用免疫荧光的方法检测F4/80的表达以及细胞的吞噬作用,用流式细胞术进一步检测细胞吞噬率。结果用L929条件培养基诱导培养7 d后小鼠外周血单核细胞表达F4/80,加入细胞吞噬珠之后,在不同时间点用荧光显微镜可以看到红色荧光颗粒聚集在小鼠外周血单核巨噬细胞核周围,用流式细胞仪检测细胞的吞噬率为24.8%±0.79%。结论该方法是一种简单、易操作的体外分离培养和鉴定小鼠外周血单核巨噬细胞的方法。; 杨琳田蕾谢杰施李丽英; 关键词：小鼠

大麻素受体1通过PI3K/AKT信号通路介导单核巨噬细胞向M1型极化被引量：1: 2018年; 该文采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白印记实验(Western blot)、流式细胞分析(flurescence-activated cell sorting, FACS)技术检测骨髓单核巨噬细胞(bone marrow monocytes/macrophages, BMMs)中大麻素受体1(cannabinoid receptor 1, CB1)对BMMs极化的作用。结果表明,使用1μmol/L ACEA(CB1激动剂)处理细胞发现, BMMs中M1型的标志物CD86、IL-1、MIP-1β、NOS2、IL-6、TNF-α的m RNA水平均上调;用流式细胞分析技术检测发现, BMMs中M1型的标志物CD86蛋白质水平上调;使用PI3K/AKT信号通路的特异性抑制剂(LY294002)预处理BMMs,再加入1μmol/L ACEA刺激细胞,与未加入LY294002的对照组相比,这些M1型BMMs标志物的mRNA表达均被抑制;通过Western blot法证实ACEA使p-AKT增加,而使用1μmol/L AM281(CB1药理学拮抗剂)阻断CB1功能,则抑制了ACEA导致的p-AKT增加。上述结果说明, CB1通过PI3K/AKT信号通路介导BMMs向M1型极化。; 杨琳田蕾田蕾段向辉李丽英; 关键词：大麻素受体1 PI3K/AKT信号通路

大麻素受体1介导人类中性粒细胞dHL60的迁移功能: 2017年; 目的研究大麻素受体(cannabinoid receptors,CBs)对人类中性粒细胞(d HL60)迁移的影响。方法体外培养人早幼粒白血病细胞系HL60,使用二甲基亚砜(dimethylsulphoxide,DMSO)诱导为类中性粒细胞(d HL60),运用实时荧光定量聚合酶链反应检测其分化标志物CD11b mRNA的表达;应用琼脂糖凝胶电泳、Western blotting法及免疫荧光技术检测其大麻素受体1(CB1)及受体2(CB2)的表达;ACEA、AM281分别为CB1的药理学激动剂和拮抗剂,JWH133、AM630分别为CB2的药理学激动剂和拮抗剂,应用Boyden chamber法检测ACEA和JWH133对d HL60迁移的影响,并从药理学阻断CB1、CB2后,检测其迁移功能的变化;使用鬼笔环肽染细胞肌动蛋白纤维,并应用高内涵扫描分析的方法对肌动蛋白纤维的聚合进行分析。结果 d HL60在mRNA和蛋白质水平上均表达CB1、CB2;ACEA能够诱导d HL60的迁移及其细胞骨架的聚合,且其所诱导的迁移能够被CB1的药理学阻断剂AM281所阻断,而CB2的药理学阻断剂AM630对ACEA所诱导的迁移并无影响;给予CB2的激动剂JWH133对d HL60的迁移及细胞骨架的聚合无明显作用。结论激活CB1能够促进d HL60的迁移。; 樊晓婷田蕾杨琳李丽英; 关键词：大麻素受体细胞迁移

S1P/S1PR2/MAPKs信号轴在小鼠肝损伤中调控巨噬细胞NLRP3炎症小体的分子机制: 目的：前期研究证明：磷酸鞘氨醇(Sphingosine 1-phosphate,S1P)作为一种关键的炎症介质,募集并活化浸润至受损肝脏的骨髓来源的单核巨噬细胞(bone marrow-derived macrophag...; 侯雷田蕾杨静静常娜杨乐杨琳李丽英; 关键词：MAPKS

小鼠骨髓中性粒细胞分离纯化及活性检测研究被引量：1: 2018年; 目的探究小鼠骨髓中性粒细胞分离纯化,并进行鉴定以及活性的检测。方法使用密度梯度离心法分离纯化小鼠骨髓中性粒细胞,得到的中性粒细胞采用免疫荧光法和高内涵分析仪检测中性粒细胞表面标志物Ly6G的表达。同时对得到的细胞加入佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)刺激后,采用免疫荧光的方法检测中性粒细胞释放髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)的表达情况。结果用Histopaque~?-1077、Histopaque~?-1119分离纯化小鼠骨髓细胞后,细胞表达Ly6G,将分离纯化的细胞加入100 nmol/L PMA刺激2 h后检测MPO的表达增强,实验组是对照组的(3.26±0.22)倍。结论该方法是一种简单、易操作的体外分离纯化、鉴定小鼠骨髓中性粒细胞的方法。; 杨琳田蕾周璇杨乐李丽英; 关键词：小鼠分离纯化

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田蕾