杜爱芳
- 作品数：206 被引量：837H指数：15
- 供职机构：浙江大学动物科学学院浙江省动物预防医学重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省重大科技专项基金国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 中草药饲料添加剂抗鸡球虫效果研究
- 试验选用隔离饲养的艾维菌肉仔鸡,探讨了以甙、酚为主要成分的复合中草药制剂抗鸡球虫效果。试验共设五个处理,(1)球虫感染前2天于基础日粮中添加0.1％复合中草药制剂;(2)从1日龄开始饲喂含0．1％复合中草药制剂的日粮;(...
- 叶均安杜爱芳施明华杨宏诸葛洋胡平飞
- 关键词：中草药抗球虫
- 文献传递
- 捻转血矛线虫Hc-daf-22基因的原核表达及重组蛋白酶活性测定被引量：2
- 2017年
- 【目的】捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)是反刍动物主要的胃肠道线虫之一,该病在中国呈全国性流行。为研究捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)脂肪酸代谢相关蛋白DAF-22的生化特性,对其基因进行了克隆、原核表达,并对重组蛋白进行了体外酶活性测定。以期了解捻转血矛线虫Hc-DAF-22蛋白在过氧化物酶体脂肪酸β氧化中的作用。【方法】根据NCBI公布的H.contortus ZJ株daf-22 cDNA序列(Gen Bank:HQ738470.1)设计特异性引物,克隆Hc-daf-22基因并构建重组质粒pET-22b-Hc-daf-22,经测序鉴定正确后将其转化E.coli BL21,经终浓度为0.1 m mol·L^(-1) IPTG(isopropyl-β-d-thiogalactoside)诱导表达4h,离心菌液,50 mmol·L^(-1)浓度的PBS溶液重悬菌体溶液,冰浴超声破碎后上清沉淀分别进行SDS-PAGE分析。超声破碎后产物以镍柱亲和色谱法分离纯化重组蛋白Hc-DAF-22,并用SDS-PAGE检测蛋白纯化情况及以抗His血清作为一抗Western Blot鉴定。纯化后蛋白用超滤管浓缩除去盐分,并按照蛋白浓度测定试剂盒进行蛋白浓度测定。利用天然状态下的乙酰乙酰CoA(AcAc-CoA)分子会发生酮-烯醇互变形成烯醇化合物特性,酶活试验以乙酰乙酰辅酶a为底物建立标准曲线。硫解酶体外测活体系为(50 mmol·L^(-1) Tris-Cl pH 8.1,20 mmol·L^(-1) MgCl_2,60μmol·L^(-1)CoA,10μmol·L^(-1) AcAc-CoA,加入约0.1μg蛋白),通过记录反应过程中由于底物(AcAc-CoA)的减少而引起303 nm波长下的吸收值的变化,从而计算出硫解反应的初始反应速率,最终确定复性后的Hc-DAF-22的硫解酶活性。在相同条件下,取AcAc-CoA底物浓度为10μmol·L^(-1)的反应体系(50 mmol·L^(-1) Tris-Cl pH 8.1,20 mmol·L^(-1)MgCl_2,60μmol·L^(-1) CoA,10μmol·L^(-1) AcAc-CoA,加入约0.1μg蛋白于室温起始反应),分别调节反应体系的温度及pH梯度,确定Hc-DAF-22最佳酶活反应温度及pH条件。【结果】成功克隆Hc-daf-22基因,测序结果与NCBI已公布的H.
- 郑秀平丁豪杰郭筱璐杨怡黄艳陈学秋周前进杜爱芳
- 关键词：捻转血矛线虫原核表达酶活测定
- 鸡柔嫩艾美耳球虫DNA疫苗的免疫保护效果研究
- 比较了减毒沙门氏菌为载体传递鸡球虫DNA 疫苗、活球虫卵囊和5401融合蛋白的免疫保护效果。试验共分9组,即空白对照组、感染对照组、药物对照组、ZJlll/pcDNA3 10cfu免疫对照组、活球虫卵囊免疫组、5401融...
- 杜爱芳王素华胡松华
- 关键词：鸡柔嫩艾美耳球虫DNA疫苗抗球虫指数
- 文献传递
- 捻转血矛线虫(H.contortus)ZJ株H11蛋白基因的克隆及序列分析
- 参照已发表的捻转血矛线虫H11蛋白基因序列设计引物,以H.contortus zJ 株的总RNA为模板,进行RT-PCR 扩增,成功扩增出H11基因.将PCR 产物与pUCm-T 载体连接后,转化DH5-a 感受态细胞,...
- 杜爱芳李孝军侯玉慧王素华
- 关键词：捻转血矛线虫基因克隆
- 文献传递
- 弓形虫半巢式PCR检测方法的建立被引量：18
- 2009年
- 根据GenBank上公布的弓形虫RH株的P30基因(X14080)设计了3条特异性引物P1、P2和P3,建立了半巢式PCR检测体系,并将P1和P3的扩增产物克隆到pUCm-T载体上进行测序。结果表明,该体系能够扩增出约250 bp的片段,P1和P3能扩增出约500 bp的片段,克隆到pUCm-T载体上的504 bp片段与P30基因(X14080)的序列同源性为99.8%。该PCR检测体系特异性强,在健康猪血液、猪链球菌、多杀性巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌和猪圆环病毒DNA上未扩增出条带;敏感性高,最低检测为18 fg。该检测体系的成功构建为猪弓形虫的检测和流行病学调查提供了有力的技术支持。
- 孔得翔王素华曲道峰蔡渭明杜爱芳
- 关键词：猪弓形虫病P30基因半巢式PCR克隆
- 首次在红嘴相思鸟体内发现多变环肠吸虫被引量：2
- 2004年
- 王素华杜爱芳顾建宏陈成海寿晓玲
- 关键词：红嘴相思鸟亚种症状病理变化
- 弓形虫速殖子表膜蛋白的研究进展被引量：2
- 2007年
- 王素华孔得翔曲道峰杜爱芳
- 关键词：膜蛋白弓形虫无性生殖有性生殖生殖阶段生活史
- 鸡柔嫩艾美耳球虫ZJ株TA4基因的克隆及原核表达
- 本试验对E．tenella ZJ株的TA4基因进行了克隆和表达。根据已报道的柔嫩艾美尔球虫TA4基因序列设计引物,以孢子化卵囊总RNA为模板,用RT-PCR的方法扩增得到一特异片段,将扩增产物克隆至 pMD18-T转化D...
- 杜爱芳高翔徐慧侯玉慧庞林海孔得翔
- 关键词：柔嫩艾美尔球虫RT-PCR原核表达
- 文献传递
- 东海海鱼异尖线虫幼虫感染的初步调查被引量：15
- 2009年
- 李孝军曹庭盛杜爱芳蔡渭明
- 关键词：幼虫感染海鱼自然疫源性疾病海洋动物消化道VAN
- 水产品中孔雀石绿残留的风险评估被引量：11
- 2009年
- 孔雀石绿一直作为重要的工业原料和治疗水产动物水霉病的有效药物。近年来,由于经其处理的水产品具有高残留毒性,故引起了人们的高度关注。本文从危害鉴定、危害特征描述、暴露评估、风险特征描述等方面综述孔雀石绿在水产品中残留的风险评估。
- 李孝军唐行忠王素华杜爱芳
- 关键词：水产品孔雀石绿风险评估
