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CD34^+细胞移植后脊髓全横断大鼠脊髓功能恢复的形态学及行为学观察被引量：2: 2006年; 目的:观察脊髓全横断SD大鼠模型骨髓CD34+细胞移植术后,脊髓功能恢复情况。方法:实验于2004-11/2005-07在昆明医学院神经科学研究所完成。①采用Percoll细胞分离液离心+贴壁分离法对绿色荧光蛋白转基因小鼠骨髓细胞进行粗筛后,收集骨髓悬浮细胞进行体外培养,密切观察细胞生长情况。②收集培养至第3周的悬浮细胞,采用免疫细胞化学法进行CD34单克隆抗体鉴定。③选健康雌性SD大鼠30只,采用随机数字法分为移植组和对照组,每组15只(1d,1,2,4和8周各3只)。将经CD34单克隆抗体鉴定后的CD34+细胞移植入脊髓全横断大鼠模型脊髓横断处尾侧。④术后密切观察大鼠后肢运动功能恢复情况,分别在术后1d,2,4和8周行BBB评分检测大鼠后肢运动功能的恢复。⑤同时行冰冻切片于荧光显微镜下观察绿色荧光细胞的分布情况,并用免疫组织化学法检测CD34+细胞的存活。结果:对照组大鼠第22天死亡1只,进入结果分析29只。①免疫荧光镜下见,培养至两三周的骨髓悬浮细胞中,圆形绿色荧光细胞可达90%以上。②免疫细胞化学染色结果显示,培养至两三周后的骨髓悬浮细胞多数呈CD34阳性,阳性率达(74.6±1.7)%。③两组大鼠BBB评分结果显示,移植组大鼠后肢自主运动功能的恢复明显优于对照组。④移植后2,4和8周时移植组脊髓横断处头尾两侧均可见绿色荧光细胞,且多分布于灰质中,散在或聚集成片;免疫组织化学法可见移植组脊髓横断处头尾两侧切片中均有CD34+细胞散在。结论:移植骨髓CD34+细胞可在脊髓全横断大鼠脊髓中存活并迁移,其大鼠后肢自主运动功能得到部分恢复。; 程昊钰何明生王廷华张洪钿王方方刘鲲黄桂琴胡艳丽; 关键词：神经行为学表现

c-jun mRNA和c-fos mRNA在成年猫脊髓及L_6背根神经节的定位: 2009年; 目的了解成年猫脊髓及背根节内即刻早期基因c-jun mRNA、c-fos mRNA的定位分布情况.方法将成年健康雄性猫4只经灌注固定后取各只猫的脊髓L3～L6节段和L6DRG,应用原位杂交组织化学的方法分析c-jun mRNA和c-fos mRNA在成年猫脊髓及L6背根神经节中的亚细胞定位和分布.结果c-jun mRNA和c-fos mRNA的阳性反应产物呈紫蓝色颗粒状,主要位于细胞质.阳性细胞主要分布于脊髓灰质前角、背核和脊髓白质,L6背根神经节也呈c-jun和c-fos mRNA反应阳性.结论脊髓及背根节内有大量c-jun mRNA和c-fos mRNA的分布,提示c-jun和c-fos的作用可能与脊髓及背根节的生理过程有关,且其功能的发挥可能涉及神经轴突的再生.; 胡艳丽王廷华孟庆姝; 关键词：C-JUN MRNA C-FOS MRNA 脊髓

绿色荧光蛋白转基因小鼠CD34^+/CD45^+细胞在脊髓全横断大鼠模型中的存活及迁移被引量：4: 2007年; 目的:探讨CD34+/CD45+细胞移植入脊髓全横断大鼠模型后的存活、迁移及分布情况。方法:体外培养绿色荧光蛋白(GFP)转基因小鼠骨髓细胞,经CD34、CD45单克隆抗体鉴定后移植入脊髓全横断大鼠模型脊髓横断处尾侧,分别在术后24h、48h、1周、2周、4周和8周行左心腔内灌注,取出脊髓,连续切片(片厚10μm),置于荧光显微镜下观察切片中有无绿色荧光细胞,并观察荧光细胞的分布范围;用免疫组化法检测CD34+/CD45+细胞的存活。结果:脊髓横断处头尾两侧均可见绿色荧光细胞,且多分布于灰质中,散在或聚集成片;免疫组化法可见切片中有CD34+/CD45+细胞散在。结论:CD34+/CD45+细胞可在脊髓全横断大鼠模型的脊髓中存活,并可迁移至脊髓横断处头侧,且随时间的延长迁移距离有所增加。; 程昊钰何明生王廷华张洪钿王熙才伍治平王方方刘鲲黄桂琴胡艳丽; 关键词：脊髓全横断绿色荧光蛋白细胞运动

NGF、BDNF和NT3在AD大鼠海马中的分布及表达变化被引量：17: 2005年; 目的观察NGF、BDNF和NT3在A lzhe im er d isease(AD)大鼠海马中的分布及其表达变化。方法采用海马注射Aβ淀粉蛋白的方法建立AD模型。10 d后对大鼠进行灌注,取脑,冰冻切片,用NGF、BNDF和NT3抗体行免疫组织化学染色。对海马恒定视野内NGF、BDNF和NT3的阳性细胞进行记数并进行统计学分析。结果AD组海马中的NGF阳性细胞较正常组显著增多(P<0.01),且染色增强。BDNF阳性细胞较正常组明显减少(P<0.01),染色强度减弱。而NT3的阳性细胞数及染色强度与正常组比较差异均没有统计学意义(P>0.05)。结论NGF、BDNF和NT3在AD的海马中发生了不同的变化,提示NGF、BDNF和NT3在AD中发挥了不同的作用,尤其是BDNF阳性细胞的减少可能与AD的神经功能减退有关。; 张卓王廷华朱榆红冯忠堂孙冰胡艳丽; 关键词：神经生长因子脑源性神经生长因子神经营养因子3 ALZHEIMER

骨髓基质干细胞移植治疗大鼠脊髓挫伤对脊髓脑源性神经生长因子表达的影响被引量：2: 2007年; 目的:探讨骨髓基质干细胞移植治疗脊髓挫伤后脊髓腹角早期脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)的表达变化。方法:转绿色荧光蛋白基因骨髓基质干细胞移植治疗大鼠脊髓挫伤,脊髓冰冻切片行BDNF免疫组化ABC染色。结果:各移植组均见绿色荧光物质。脊髓挫伤后1dBDNF阳性细胞开始增多,7d达高峰,21d仍有较高表达。同一时间段内与挫伤对照组相比,移植组阳性细胞均增多,1d、3d和21d有显著性差异;3d和14d移植组平均灰度值有显著性差异;1d和14d移植组MOD有显著性差异。结论:脊髓挫伤后移植骨髓基质干细胞可以到达脊髓损伤处并可增加挫伤脊髓BDNF表达。; 和凤军李明王廷华陆地胡艳丽杨晓华邓莉; 关键词：脊髓挫伤脑源性神经营养因子骨髓基质干细胞

Caspase-3在D-半乳糖致衰老SD大鼠海马的表达被引量：4: 2009年; 目的了解Caspase-3在D-半乳糖致衰老SD大鼠脑海马的表达情况.方法将健康成年雄性SD大鼠40只随机分为两组,分别为对照组和衰老组,每组各20只.以Morris水迷宫实验评估动物的学习记忆功能,应用免疫组织化学染色法检测Caspase-3在两组大鼠脑海马中的表达水平.结果衰老组大鼠的逃避潜伏期较对照组明显延长,在第Ⅲ象限逗留的时间和跨越平台次数较对照组明显减少.Caspase-3的免疫阳性反应物的表达在衰老组较对照组明显增多.结论D-半乳糖可通过活化Caspase-3,促进海马神经元的凋亡,引发大鼠学习记忆功能减退.; 胡艳丽李守民傅希玥李明孙俊陆地; 关键词：D-半乳糖 SD大鼠衰老海马 CASPASE-3

D-半乳糖调控SD大鼠海马巯醇抗氧化物(酶)致衰老的作用研究被引量：3: 2009年; 目的构建D-半乳糖(D-galactose,D-ga)l致衰老模型,探讨D-gal诱导衰老的分子机制,为临床治疗阿尔茨海默病(AD)提供理论依据.方法大鼠腹腔注射D-gal100mg/(kg.d)×56d造模.第50～56天进行Morris水迷宫实验(MWM);第57天取脑组织,生物化学方法分光光度法检测大脑海马一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)、铜锌-过氧化物岐化酶(Cu,Zn-SOD)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽还原酶(GR)、谷胱甘肽s-转移酶(GSH-ST)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-PX)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA),总抗氧化能力(T-AOC)和过氧化氢(H2O)2的表达水平.结果模型大鼠较正常大鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.05),在第Ⅲ象限逗留的时间明显减少(P<0.05),跨越平台次数明显减少(P<0.05),海马内MDA、H2O2和NO表达增加,SOD、GSH、GSH-ST、GSH-Px、T-AOC表达降低,而NOS表达没有明显变化(P>0.05).结论D-gal能通过调控内源性巯基抗氧化物(酶),减退学习记忆能力,诱导大鼠神经系统的衰老.; 李守民王婷婷胡艳丽艾青龙孙俊陆地; 关键词：阿尔茨海默病

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胡艳丽

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