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郭娟

作品数：6 被引量：31H指数：3
供职机构：中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室更多>>
发文基金：天津市21世纪青年科学基金天津市自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 6篇中文期刊文章

领域

  • 4篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 3篇水蛭
  • 3篇水蛭素
  • 3篇克隆
  • 2篇分离纯化
  • 2篇纯化
  • 1篇血栓
  • 1篇血小板
  • 1篇血小板生成
  • 1篇血小板生成素
  • 1篇人类白血病
  • 1篇生物合成
  • 1篇凝血
  • 1篇凝血酶
  • 1篇重组水蛭素
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞系
  • 1篇酶链反应
  • 1篇耐药
  • 1篇耐药细胞
  • 1篇耐药细胞系

机构

  • 6篇中国医学科学...

作者

  • 6篇郭娟
  • 5篇王荷碧
  • 5篇顾洁
  • 3篇蔡英林
  • 1篇赵轼轩
  • 1篇杨纯正
  • 1篇王立
  • 1篇刘澎
  • 1篇王建祥
  • 1篇韩忠朝
  • 1篇李彬
  • 1篇刘杰文
  • 1篇张淑靖
  • 1篇冯敏

传媒

  • 3篇中华血液学杂...
  • 1篇生物技术
  • 1篇中国药学杂志
  • 1篇医学研究杂志

年份

  • 1篇2003
  • 1篇1999
  • 1篇1998
  • 1篇1997
  • 2篇1995
共 6 条 记 录，以下是 1-6
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排序方式：
血小板生成素改构体基因的克隆和序列分析
2003年
采用PCR技术 ,根据文献报道的鼠TPO成熟肽基因序列 ,设计并合成两对引物 ,以鼠TPOcDNA为模板 ,扩增获得mT PON端 15 3个氨基酸的 4 78bpcDNA片段及鼠TPO全长 10 32bpcDNA片段 ;mTPO15 3片段与合成的碱性成纤维生长因子序列中Lys119-Lys135aa的 5 1bp肝素结合位点DNA片段连接 ,克隆到M13mp18及M13mp19载体中进行双向测序 ;同时将扩增的鼠TPO全长cDNA片段克隆到M13mp18及M13mp19载体中进行双向测序 ,证明获得鼠血小板生成素与肝素结合位点基因及鼠TPO全长基因 ,继之以pMAL -C2X为表达载体构建表达质粒 。
李彬蔡英林韩忠朝郭娟顾洁刘澎
关键词：血小板生成素基因克隆碱性成纤维生长因子
水蛭素变异物1基因克隆与表达
1999年
Haycraft于1884年发现医用水蛭提取物中有抗凝物质。50年代末,Mark-Warat首次分离出纯品,命名为水蛭素(Hirudin)。水蛭素是至今为止所发现的凝血酶最有效最特异的天然抑制剂。
王荷碧郭娟蔡英林顾洁刘艳彤
关键词：水蛭素抗凝物质分离纯化凝血酶静脉血栓
水蛭素变异物1活性多肽基因的化学合成及克隆被引量：1
1995年
为了解决天然水蛭素来源匮乏问题，我们采用基因工程技术进行重组水蛭素的研究。根据水蛭素变异物１（ＨＶ１）的氨基酸序列，选择在原核细胞中高表达的密码子，设计了２２１个碱基对长度的ＨＶＩＤＮＡ片段。分１４个寡核苷酸片段进行化学合成，各片段连接成ＨＶ１全基因后，经ＥｃｏＲＩ、ＢａｍＨＩ切点克隆入ｐＵＣ１８／１９质粒，转化大肠杆菌ＪＭ１０５，蓝白菌落法筛选阳性克隆。限制性内切酶实验及ＤＮＡ序列分析证实了ＨＶ１全基因的正确性，克隆成功。并且获得活性表达。
郭娟王荷碧蔡英林刘艳彤顾洁
关键词：化学合成
重组水蛭素克隆的表达及其产物的分离纯化被引量：7
1998年
目的：在原核细胞中表达具有生物活性的重组水蛭素变异物１（ｒＨＶ１）并进行重组产物的分离纯化研究。方法：以质粒ｐＢＶ２２０为载体，在大肠杆菌ＤＨ５α中表达ｒＨＶ１，发色底物法测定其抗凝血酶生物活性；利用超滤、ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０以及凝血酶亲合层析进行重组产物的分离纯化。结果：在大肠杆菌中获得了ｒＨＶ１的活性表达，表达量约占总蛋白的１６．９％，活力达到２０～３０ＡＴＵ／ｍｌ培养液；初步的纯化研究得到了具抗凝生物活性的ｒＨＶ１纯品，ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳呈单一条带。结论：重组水蛭素变异物１的活性表达及其分离纯化研究填补了国内空白，为研制国产高效重组抗凝药物带来希望。
郭娟王荷碧顾洁朱宏彦
关键词：纯化水蛭素克隆
活血化淤药物764-3对胶原生物合成影响的研究被引量：15
1997年
目的：探讨活血化淤药物７６４３对细胞外间质合成的影响。方法：羟脯氨酸法、间接酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）测定博莱霉素Ａ６（ＢＬＭＡ６）诱发的小鼠、大鼠肺纤维化模型肺组织胶原含量及合成，阿利新蓝法测定其糖胺多糖（ＧＡＧ）含量；３ＨＰｒｏ掺入法测定体外培养兔角膜瘢痕成纤维细胞中胶原合成，ＥＬＩＳＡ测定其纤维粘连蛋白（Ｆｎ）含量。结果：７６４３对模型肺组织胶原合成有明显的抑制作用，抑制率５０．５％，尤其能使肺组织中Ⅰ型胶原及ＧＡＧ明显减少；体外实验证实，７６４３可抑制３ＨＰｒｏ及３ＨＴｄＲ掺入成纤维细胞，且使其表面Ｆｎ明显减少。结论：７６４３抗纤维化作用机制的研究，应以细胞外间质组分———胶原合成为基点深入进行。
王荷碧郭娟顾洁刘艳彤赵轼轩华国勋刘杰文杨纯正
关键词：胶原合成
人类白血病耐药细胞系K562／VCRmdrl及GST表达的研究被引量：8
1995年
建立了一种高度敏感、特异性强并能定量的逆转录／多聚酶链反应（ＲＴ／ＰＣＲ）检测ｍｄｒｌｍＲＮＡ的方法，用该法研究Ｋ５６２／Ｓ及Ｋ５６２／ＶＣＲ细胞系ｍｄｒｌ基因表达。结果显示Ｋ５６２／ＶＣＲ有较高水平ｍｄｒｌ基因表达（０．８６），而Ｋ５６２／Ｓ未检测到表达。此外，利用酶学方法和点杂交方法在蛋白质和ｍＲＮＡ水平上检测了Ｋ５６２／Ｓ和Ｋ５６２／ＶＣＲ中谷胱甘肽Ｓ转移酶（ＧＳＴ）活性及其基因表达，发现Ｋ５６２／ＶＣＲ中ＧＳＴ活性明显高于Ｋ５６２／Ｓ（Ｐ＜０．００５），且该种活性的增高是由ＧＳＴπ、ＧＳＴμ过度表达引起。
竺香才郭娟王荷碧王建祥张淑靖王立顾孔书刘艳彤冯敏
关键词：白血病抗药性GST聚合酶链反应
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