目的:明确Lhx8过表达慢病毒在海马齿状回胆碱能神经元发生中的作用。方法:构建Lhx8过表达重组质粒、进行慢病毒包装,通过颅脑立体定位和微量注射的方法,将所得慢病毒Lenti6.3-Lhx8注入SD大鼠海马齿状回中;于注射后第1、3、7、10、14天在激光共聚焦显微镜下直接观察增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)的荧光表达;检测术后第7天时EGFP/Lhx8/ChAT三标阳性细胞的数目。结果:慢病毒注射后第3天,海马齿状回中EGFP绿色荧光信号最强;此后EGFP表达下降,注射后第14天,几乎检测不到EGFP阳性细胞;术后第7天,注射Lenti6.3-Lhx8的慢病毒侧海马齿状回门区内能够检测到EGFP/Lhx8/ChAT三标阳性细胞,与阴性对照侧比较明显增多。结论:海马齿状回内注射Lhx8过表达慢病毒能够促进胆碱能神经元的发生。
