刘明芳
- 作品数：8 被引量：40H指数：4
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- 快速检测淋球菌porA和16S rRNA基因的环介导等温扩增技术的建立被引量：4
- 2010年
- 目的建立快速检测淋球菌porA和16S rRNA基因的环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术,探讨其用于淋球菌感染早期诊断的可行性。方法利用Primer-ExplorerV3软件分别针对淋球菌porA及16S rRNA基因设计6条引物(2条内引物FIP、BIP,2条外引物F3、B3,2条环引物LF、LB),以淋球菌标准菌株基因组DNA为模板,进行LAMP扩增,同时,以外引物F3、B3为PCR引物,进行PCR扩增,并比较2种扩增方法的灵敏度和特异性。结果LAMP法与PCR法灵敏度相同,可检测到10个拷贝的目的基因;其针对淋球菌porA和16S rRNA基因的引物对脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌和大肠埃希菌的DNA均不能扩增。结论已成功建立了检测淋球菌porA和16S rRNA基因的LAMP技术,为淋球菌的快速检测提供了新的手段,有望成为淋球菌常规检测的简便方法。
- 崔亚利何於娟刘鑫胥文春刘明芳龚艺贺潇
- 关键词：淋球菌RRNA基因环介导等温扩增技术聚合酶链反应
- HtrA基因缺陷对肺炎链球菌毒力影响的研究被引量：5
- 2006年
- 目的HtrA基因可编码肺炎链球菌的一种重要蛋白酶,本文目的是探索HtrA基因缺陷对细菌毒力的影响.方法用插入复制失活的方式使HtrA基因缺失,通过RT-PCR分析毒力因子表达,并通过动物试验观察HtrA基因缺陷株毒力改变情况.结果RT-PCR显示HtrA缺陷株毒力因子表达低于野毒株,两组比较P<0.05;转化试验发现缺陷菌株转化力下降;小鼠毒力试验表明野毒株半数致死时间22h,而缺陷株半数致死时间8d,P<0.01,有显著性差异;缺陷菌在小鼠体内被清除速度也显著快于野毒株.结论HtrA基因缺陷使肺炎链球菌多种毒力因子表达减弱,自然转化能力下降,毒力降低.
- 黄远帅许颂霄朱旦阳强刘明芳陈淑惠张雪梅尹一兵
- 关键词：肺炎链球菌毒力因子密度感应系统
- 鼻腔滴注法建立小鼠肺炎链球菌性脑膜炎模型被引量：2
- 2008年
- 目的鼻腔滴注法建立小鼠肺炎链球菌性脑膜炎模型，为研究肺炎链球菌致脑膜炎的分子机制奠定基础。方法将冻存的TIGR4在新鲜TSA血平板上培养16h～18h后，刮取细菌并稀释成3种不同密度的菌液，每种密度分成2份，其中1份加入一定量的透明质酸酶，另1份不加。对小鼠行浅麻醉，用卡介苗注射器将上述菌悬液缓缓滴入小鼠鼻腔，待其自动吸入，每只小鼠50μl。每天观察小鼠情况，分别于感染后24、48和72h处死小鼠，取心脏血和一半脑组织匀浆，做细菌计数，另一半脑组织用于组织病理学检查。结果加透明质酸酶的TIGR4 3个剂量组小鼠脑膜炎发生率分别为20．00％、65．00％和46．67％，对照组分别为13．33％、53．33％和66．67％，差异无统计学意义（P=1．0000）；其中3×10^7 CFU组和3×10^4 CFU组差异无统计学意义（P=0．4621），两组合并后与3×10^6 CFU组差异有统计学意义（P=0．0196）。结论1）透明质酸酶不能促进鼻腔滴注TIGR4致小鼠脑膜炎的发生；2）小鼠脑膜炎的发生率与鼻腔感染TIGR4剂量有关，适宜剂量为3×10^7 CFU，低于该剂量脑膜炎的发生率显著降低。
- 胥文春单幼兰李南赵清张雪梅刘明芳尹一兵
- 关键词：肺炎链球菌脑膜炎
- 肺炎链球菌的转化缺陷导致细菌毒力减弱被引量：1
- 2005年
- 目的 探讨肺炎链球菌的自然转化与其条件致病的关系。方法 采用插入失活的方法制备肺炎链球菌的转化缺陷菌株 ,通过黏附实验和小鼠毒力实验观察它们毒力的变化 ,应用RT PCR测定黏附因子PsaA在野生和缺陷菌株中的表达。结果 实验获得了 3株肺炎链球菌 (1、2和 2 2 )的转化缺陷菌株 (1d、2d和 2 2d)。毒力研究发现转化缺陷菌株对ECV 30 4细胞的黏附能力显著弱于相应的野生菌株 ,1和 2株肺炎链球菌腹腔感染BALB c小鼠的能力显著强于相应的转化缺陷菌株 ;研究还发现PsaA基因在 2和 2 2株肺炎链球菌中的表达量显著高于其缺陷菌株。结论 肺炎链球菌具有自然转化的能力有助于其毒力的表现 ,且可能通过黏附因子PsaA等相关毒力因子表达增加而增强其毒力。
- 张雪梅尹一兵朱旦陈保德罗进勇邓一平刘明芳陈淑慧孟江萍徐邦牢康格非
- 关键词：肺炎链球菌细菌毒力PSAAPCR测定野生菌株4细胞
- 金银花水提物对双歧杆菌、乳杆菌生长的影响被引量：8
- 2007年
- 目的:探讨金银花水提物对双歧杆菌、乳杆菌体外生长的作用。方法:制备金银花水提物浓度为50%、25%、12.5%、6.25%、3.125%、2%、1.0625%的BL肉汤和MRS液体培养基;取两歧双歧杆菌Bif1101和保加利亚乳杆菌标准株悬液在药物培养液中生长后接种到平板,作平板菌落计数;不同培养时间点测定稀释10倍后含不同浓度金银花水提物的细菌培养液和对照组细菌培养液的吸光度(A)值,计算各培养基吸光度增加值(A);测定细菌培养液20h、24h时的pH值。结果:当金银花水提物浓度<6.25%时,则显著高于对照组;金银花水提物浓度>6.25%,则显著低于对照组;乳杆菌培养液和双歧杆菌培养液20h、24h的A分别在金银花水提物浓度≤6.25%和≤3.125%时高于对照组;金银花水提物浓度<6.25%时,则pH值显著低于对照组;而金银花水提物浓度>6.25%时则相反。结论:低浓度金银花水提物可以促进双歧杆菌、乳酸杆菌在体外的生长。高浓度金银花水提物则抑制双歧杆菌、乳酸杆菌在体外的生长。
- 冉域辰黎海芪刘明芳
- 关键词：金银花双歧杆菌乳杆菌
- 金银花水提物对双歧杆菌与乳酸杆菌体外生长的影响被引量：20
- 2008年
- 目的探讨金银花水提物对双歧杆菌、乳酸杆菌体外生长的作用。方法制备金银花水提物浓度为50%,25%,12.5%,6.25%,3.125%,2%,1.0625%的BL肉汤和MRS液体培养基;取两歧双歧杆菌Bif1101和保加利亚乳酸杆菌标准株悬液在药物培养液中生长后接种到平板,作平板菌落计数;不同培养时间点测定稀释10倍后含不同浓度金银花水提物的细菌培养液和对照组细菌培养液的吸光度(A)值,计算各培养基吸光度增加值(D A);测定细菌培养液20,24 h时的pH值。结果当金银花水提物浓度<6.25%时,则显著高于对照组;金银花水提物浓度>6.25%,则显著低于对照组;乳酸杆菌培养液和双歧杆菌培养液20,24 h的D A分别在金银花水提物浓度≤6.25%和≤3.125%时高于对照组;金银花水提物浓度<6.25%时,则pH值显著低于对照组;而金银花水提物浓度>6.25%时则相反。结论低浓度金银花水提物可以促进双歧杆菌、乳酸杆菌在体外的生长。高浓度金银花水提物则抑制双歧杆菌、乳酸杆菌在体外的生长。
- 冉域辰黎海芪刘明芳
- 关键词：金银花双歧杆菌乳酸杆菌双歧因子益生菌
- 环介导等温扩增技术(LAMP)快速检测淋球菌porA基因和16SrRNA基因
- 目的:建立检测淋球菌porA基因和16S rRNA基因的环介导等温扩增技术,探讨其在淋球菌感染早期诊断中的应用。方法:利用Primer-Explorer V3软件分别针对淋球菌porA及16S rRNA基因设计六条引物(...
- 崔亚利刘鑫胥文春刘明芳龚艺贺潇王虹何於娟
- 关键词：淋球菌16SRRNA基因PCR
- 文献传递
- 金银花水提物对双歧杆菌、乳杆菌生长的影响
- 目的：探讨金银花水提物对双歧杆菌、乳杆菌体外生长的作用。方法：制备金银花水提物浓度为50%、25%、12． 5%、6．25%、3．125%、2%、1．0625%的 BL 肉汤和 MRS 液体培养基;取两歧双歧杆菌 Bif...
- 冉域辰黎海芪刘明芳
- 关键词：金银花双歧杆菌乳杆菌
- 文献传递
