李珅
- 作品数：5 被引量：67H指数：3
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- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 三七三萜皂甙合成途径鲨烯环氧酶基因的克隆及初步表达
- 本文对三七三萜皂甙合成途径鲨烯环氧酶基因的克隆及初步表达进行了研究。文章采用改进的异硫氰酸胍一步法提取三七根总RNA，通过RT-PCR法从三七根组织总RNA中扩增出SE基因的cDNA序列。将该cDNA插入克隆质粒pMD1...
- 李珅
- 关键词：药物含量基因工程
- 文献传递
- 抑制消减杂交(SSH)在植物功能基因研究中的应用被引量：2
- 2005年
- 基于PCR的抑制消减杂交(SSH PCR)是目前用于差异cDNA序列的检测,以及构建基因组差异DNA文库最有效、并且应用最广泛的方法之一。虽然这种方法有很多优点,但仍存在一定的局限性,具有一些不可避免的缺陷。从四个方面讨论SSH在植物功能基因研究中的应用,进而探讨SSH PCR方法在植物基因克隆方面遇到的问题及解决对策。
- 李珅吴耀生
- 关键词：消减杂交集中度
- 三七鲨烯合酶基因在三七根、茎、芦头中的转录表达与三萜皂苷合成被引量：23
- 2007年
- 三萜皂苷是三七、人参等重要药用植物的主要有效成分.采用改进的异硫氰酸胍法提取到三七RNA,经RT-PCR克隆技术获得三七三萜合成通路关键酶之一鲨烯合酶(squalene synthase,SS)cDNA,长1270 bp,读码框架编码415个氨基酸.比对分析表明,推衍的三七SS氨基酸序列与人参、积雪草、青蒿、拟南芥和水稻SS的一致性分别为98%、89%、81%、78%和71%.利用实时荧光定量RT-PCR技术对三七根、茎、芦头的SS转录表达研究发现,一年生三七根SS基因转录表达量最高,高于茎和芦头的表达;但总皂苷含量是:芦头>叶>根>茎.可能与SS之后其它三萜合成关键酶的活性差异或/和三萜合成后的定向输送及累积有关.
- 吴耀生朱华李珅赵瑞强蓝秀万
- 关键词：鲨烯合酶三萜皂苷CDNA克隆转录实时荧光定量RT-PCR
- 三七植物GAPDH基因克隆及序列分析被引量：31
- 2006年
- 采用改进的异硫氰酸胍法提取高质量三七总RNA,运用RT-PCR方法克隆了三七GAPDH基因的部分序列,长度为627 bp,编码209个氨基酸,为半定量RT-PCR以及Real-time RT-PCR等技术在三七植物研究中的应用提供了条件.氨基酸序列比对结果表明,该序列与拟南芥、烟草、人参的GAPDH氨基酸序列的同源性分别为91%、93%、95%;核苷酸序列的同源性分别为82%、84%、85%.
- 朱华李珅赵瑞强吴耀生
- 关键词：克隆
- 三七法呢基焦磷酸合酶的基因克隆及序列分析被引量：14
- 2006年
- 目的对三七法呢基焦磷酸合酶(FPS)进行基因克隆及序列分析。方法采用cDNA末端快速扩增法,以三七根总RNA为模板扩增出三七FPS基因。结果序列分析表明,所克隆的cDNA序列全长1 409 bp,开放阅读框共编码343个氨基酸残基,推测的氨基酸序列与积雪草、灰白银胶菊、黄花蒿的FPS的氨基酸序列同源性最高,分别达95%、87%、86%。结论首次分离并报道了三七FPS cDNA克隆,为进一步研究三萜皂苷生物合成机制及其在提高植物药用价值方面的应用奠定基础。
- 陈莉蓝秀万李珅朱华吴耀生
