杨长青
- 作品数：6 被引量：13H指数：3
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- 肥大细胞缺陷大鼠经骨髓移植重建消化道肥大细胞
- 2013年
- 目的探讨骨髓移植（BMT）是否能重建肥大细胞缺陷大鼠（Ws／Ws大鼠）的消化道肥大细胞，并了解新生肥大细胞的生长发育特性。方法42只Ws／Ws大鼠分成对照组及6种毁髓照射剂量组（6．0、7．0、8．0、9．0、10．0和11．0Gy），每组6只，以确定Co60 放射源的适宜毁髓照射剂量。16只Ws／Ws大鼠进行7．5Gy照射，于照射后第1、5、8、12天检测血象及骨髓象，每个时间点4只，另取4只无照射Ws／Ws大鼠的血象与骨髓象作为对照。将与Ws／Ws大鼠同基因背景的正常BrownNorway（BN）大鼠的骨髓细胞悬液，输注入经7．5Gy剂量照射后的Ws／Ws大鼠体内，构建BMT-Ws／Ws大鼠。4只雌性Ws／Ws大鼠接受雄性BN大鼠BMT后4周经Y染色体原位杂交（Y-FISH）鉴定BN大鼠骨髓在BMT-Ws／Ws大鼠体内的存活及分化迁移。另使用相同方法构建雄性BMT-Ws／Ws大鼠24只，于移植后5、8、13及23周（各6只）通过阿尔新蓝．番红O染色观察肥大细胞在全消化道的重建情况，对其进行计数，通过Western印迹法定量肥大细胞类胰蛋白酶和糜蛋白酶表达。结果Y-FISH显示雄性供体的骨髓可在雌性Ws／Ws大鼠体内存活并迁移分化为成熟的消化道肥大细胞。8周时BMT-Ws／Ws大鼠食管、胃及回肠远端肥大细胞数目最多，均明显高于BN对照大鼠[（103±6）比（35±4），（271±23）比（124±13），（200±13）比（103±7）个／mm2，均P〈0．05，n=6）；食管及回肠组织类胰蛋白酶含量也最高，明显高于BN对照大鼠（1．3±0．3比0．6±0．2，3．6±0．8比1．9±0．4，均P〈0．05，n=4）。13周之后肥大细胞数量及蛋白酶含量逐渐回落。结论骨髓移植可以重建Ws／Ws大鼠消化道肥大细胞，移植后8周至13周消化道肥大细胞及类胰蛋白酶含量最丰富，此期可作为BMT-Ws／Ws大鼠用于肥大细胞功能实验研究的最佳时间窗。
- 钟婵娟杨长青段丽萍周淑佩张阔
- 关键词：肥大细胞骨髓移植原位杂交
- 先天抑郁大鼠内脏敏感性研究被引量：4
- 2011年
- 目的比较先天抑郁Fawn-Hooded（FH／wjd）大鼠与Sprague-Dawley（SD）大鼠的内脏敏感性，探讨FH／Wjd大鼠作为精神障碍与肠易激综合征共病模型的可行性。方法采用强迫游泳实验（FST）和糖水实验（SPT）验证FH／Wjd大鼠的抑郁特性。通过腹壁回撤反射（AwR）评估大鼠对不同压力结直肠扩张（CRD）的敏感性。免疫组织化学法检测大鼠结肠5-HT表达水平及结肠、大脑前额叶下边缘皮质（IL）、前边缘皮质（PrL）、前喙扣带回皮质（rACC）区域的e-fos表达水平。结果FST中FH／Wjd大鼠水中静止时间显著长于SD大鼠（t=-8．931，P=0．000）。SPT中FH／Wjd大鼠糖水饮用量占总饮水量的比例显著低于SD大鼠（t=4．155，P=0．001）。FH／Wjd大鼠在各CRD压力梯度（20、40、60、80nh,-nHg，lnifnHg=0．133kPa）下的AWR评分均显著高于SD大鼠（z值分别=-2．697、-3．464、-6．822、-3．976，P值分别=0．022、0．006、0．000、0．003）。FH／Wjd大鼠对照组结肠5-HT表达水平高于SD大鼠对照组（t=-11．371，P=0．000）。FH／Wjd大鼠扩张组和SD大鼠扩张组结肠5-HT表达水平均较各自的对照组上升，且FH／Wjd大鼠表达水平高于SD大鼠（t=-3．364，P=0．007）。FH／wjd大鼠对照组和SD大鼠对照组结肠、前额叶各脑区c-fos表达水平差异无统计学意义（结肠：t=-0．129、P=0．900；IL：t=-1．316、P=0．218；PrL：t-1．241、P=-0．243；rACC：t=2．151、P=0．057）。FH／Wjd大鼠扩张组和SD大鼠扩张组结肠与前额叶脑区c-fos表达水平均较各自的对照组显著上升，且FH／wjd大鼠表达水平高于SD大鼠（结肠：t=-5．864、P=0．000；IL：t=-2．530、P=0．030；PrL：t=-7．039，P=0．000；rACC：t=-6．489、P=0．000）。结论先天抑郁FH／Wjd大鼠存在内脏高敏感性，其肠道高表达5-HT及结肠和大脑IL、PrL、rACC区域对内脏伤害性刺激的高反应性。有可能作为精神障碍和肠易激综�
- 张永燊杨长青段丽萍钟延丰
- 关键词：肠易激综合征内脏
- 瘦素在人溃疡性结肠炎中的表达及作用机制研究被引量：4
- 2010年
- 目的观察瘦素在人溃疡性结肠炎组织中的表达及其作用机制。方法收集我院2006年6月~2009年6月确诊的溃疡性结肠炎患者35例,以结肠镜检查无明显异常者25例作为阴性对照。酶联免疫法观察血清细胞因子（TNF-α和IL-2）浓度的变化,免疫组化方法检测溃疡性结肠炎病理组织中瘦素的表达情况。结果在溃疡性结肠炎患者的病理组织中,瘦素的表达明显高于对照者,其血清中TNF-α的含量也高于对照者,IL-2则相反。结论瘦素在溃疡性结肠炎组织中过量表达,可能通过细胞因子TNF-α的上调和IL-2的下调诱导溃疡性结肠炎的发生。
- 刘江奎冯志杰杨长青吴晖沈毅慧
- 关键词：瘦素溃疡性结肠炎TNF-ΑIL-2
- 先天抑郁对大鼠幼年结肠乙酸刺激致慢性内脏高敏感的影响被引量：6
- 2015年
- 目的:比较先天抑郁大鼠Fawn-Hooded(FH/Wjd)与普通Sprague-Dawley(SD)大鼠对幼年结肠乙酸刺激导致的内脏高敏感和脑区激活的差异,了解先天抑郁对内脏敏感性形成的影响及可能的中枢机制。方法:构建大鼠幼年结肠乙酸刺激致慢性内脏高敏感模型(irritable bowel syndrome,IBS)。结肠扩张实验检测大鼠内脏敏感性;免疫组织化学技术检测大鼠结肠黏膜肥大细胞(mast cell,MC)数目和结肠黏膜5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)的表达,以及结肠黏膜和特定脑区包括前边缘皮质(prelimbic cortex,Pr L)和前喙扣带皮质(rostral anterior cingulated cortex,r ACC)中吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)的表达。结果:(1)大鼠幼年结肠乙酸刺激导致腹壁回测反射(abdominal withdrawal reflex,AWR)评分升高(FH/Wjd:2.44±0.04 vs.1.96±0.07,P<0.05;SD:1.75±0.13 vs.1.32±0.05,P<0.05),且FH/Wjd IBS大鼠高于SD-IBS大鼠(2.44±0.04 vs.1.75±0.13,P<0.05);(2)大鼠幼年结肠乙酸刺激导致结肠黏膜MC数目增加(FH/Wjd:43.24±1.72 vs.24.92±1.38,P<0.01;SD:23.80±1.28 vs.14.24±0.92,P<0.01),FH/Wjd大鼠无论是对照组还是IBS组,结肠黏膜MC数目均高于SD组(P均<0.01);(3)幼年结肠乙酸刺激导致FH/Wjd及SD大鼠IBS组结肠黏膜IDO及5-HT阳性细胞数均升高(P均<0.01),且FH/Wjd大鼠对照及IBS组的IDO及5-HT阳性细胞数高于SD大鼠(对照:IDO,24.64±2.22 vs.15.52±1.39;5-HT,21.32±1.26 vs.12.72±1.12。IBS:IDO,44.92±2.31 vs.20.85±1.72;5-HT,31.84±1.57 vs.19.65±1.09,P均<0.01);(4)FH/Wjd-IBS大鼠Pr L脑区IDO表达高于SD-IBS组(49.60±4.31 vs.35.60±2.42,P<0.01),r ACC脑区IDO表达高于FH/Wjd对照(45.44±1.16 vs.34.08±2.76,P<0.01)。结论:先天抑郁使大鼠结肠乙酸刺激后表现出更为显著的内脏高敏感,可能与结肠MC数目和5-HT、IDO表达升高有关,提示抑郁可能通过影响机体对炎症刺激的反应而加重胃肠道功能紊乱。
- 刘懿萱张永燊段丽萍张璐杨长青
- 关键词：抑郁血清素
- 感染和应激对肥大细胞缺陷大鼠脊髓瞬时感受器电位香草酸受体1和胞外信号调节蛋白激酶的影响被引量：2
- 2011年
- 目的:研究感染和应激所致的内脏高敏感性大鼠中肥大细胞的作用以及与信号通路瞬时感受器电位香草酸受体1(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1)和胞外信号调节蛋白激酶(extracellular-regulated kinase,ERK)的关系。方法:以肥大细胞缺陷大鼠(WsRC Ws/Ws,Ws/Ws)和野生对照大鼠(WsRC+/+,+/+)为基础构建一过性旋毛虫感染(post-infection,PI)和急性冷束缚应激(acute cold restraint stress,ACRS)内脏高敏感模型,腹部回撤反射评分评估大鼠内脏敏感性。通过Western blotting方法检测大鼠第6腰椎和第1骶椎(lumbar 6 sacral1,L6S1)段脊髓TRPV1和磷酸化的ERK1/2(pERK1/2)蛋白的表达水平。结果:与对照组(3.7±0.09)相比,PI(2.52±0.13)、ACRS(2.28±0.17)和PI+ACRS(2.25±0.12)组+/+大鼠内脏敏感性均增高,P<0.05,差异有统计学意义。在Ws/Ws大鼠中,与对照组(3.25±0.20)相比,PI(2.87±0.14)和PI+ACRS(2.50±0.27)组内脏敏感性增高,P<0.05,差异有统计学意义,但是,ACRS组(2.97±0.22)内脏敏感性与对照组相比差异无统计学意义。Western blotting结果提示,与对照组(0.090±0.009)相比,PI(0.121±0.012)、ACRS(0.122±0.008)和PI+ACRS(0.129±0.008)组+/+大鼠脊髓TRPV1蛋白水平均明显增加,P<0.05,差异有统计学意义;但是,在Ws/Ws大鼠中,与对照组相比(0.106±0.012),ACRS(0.132±0.014)组脊髓TRPV1差异无统计学意义,而PI(0.140±0.008,P<0.05)以及PI+ACRS(0.156±0.010,P<0.01)组脊髓TRPV1蛋白水平表达显著增加,差异有统计学意义。同样,在+/+大鼠中,与对照组(0.58±0.03)相比,PI(0.72±0.04)、ACRS(0.75±0.04)以及PI+ACRS(0.78±0.01)组脊髓pERK1/2蛋白水平明显增加,P<0.01,差异有统计学意义;但是,在Ws/Ws大鼠中,与对照组相比(0.59±0.04),ACRS组(0.69±0.04)脊髓pERK1/2差异无统计学意义,而PI(0.72±0.04)以及PI+ACRS(0.74±0.04)均可导致脊髓pERK1/2蛋白水平表达显著增强,P<0.05,差异有统计学意义。结论:一过性旋毛虫感染和ACRS均可引起大鼠内脏高敏�
- 杨长青卫艳予冷玉鑫段丽萍
- 关键词：内脏痛觉过敏细胞外信号调节MAP激酶类
- 囊泡谷氨酸转运体-3研究进展
- 2011年
- 囊泡谷氨酸转运体（vesicular glutamate transporter，VGLUT）在神经递质谷氨酸的储存和释放过程中起着重要的作用，包括3个亚型，VGLUT1和VGLUT2是所有谷氨酸能神经元的特异性标志，VGLUT3与前2种亚型在分布和功能上有着明显的不同之处，特别是其与人体某些疾病关系的重要性近些年越来越受到研究者的关注。本文着重综述VGLUT3在人体的分布和功能，以及与某些疾病的关系。
- 杨长青段丽萍
- 关键词：谷氨酸能神经元特异性标志疾病
