石轩峰
- 作品数:5 被引量:22H指数:3
- 供职机构:江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程化学工程生物学农业科学更多>>
- 植物乳杆菌乳酸脱氢酶的抽提与初步纯化被引量:5
- 2004年
- 研究了从植物乳杆菌RS2 2中提取胞内乳酸脱氢酶的工艺过程,探讨了超声破碎时菌体质量浓度、处理量及处理时间对破碎效果的影响;对酶的提取工艺研究表明,0.05mol/L磷酸缓冲液(pH7.0)添加0.10~0.30mol/LNaCl可达到较好的抽提效果;对硫酸铵盐析去杂蛋白质及DEAE离子交换层析工艺进行了初步优化.在优化的工艺条件下,酶的总回收率为40.2%,比酶活提高到原来的18.9倍.
- 王立艳石轩峰王武
- 关键词:乳酸脱氢酶抽提纯化植物乳杆菌
- 植物乳杆菌乳酸脱氢酶的分离纯化工艺研究被引量:12
- 2005年
- 为进一步研究植物乳杆菌乳酸脱氢酶的酶学性质,探讨了乳酸脱氢酶的分离纯化工艺.采用了硫酸铵沉淀、DEAESepharoseF.F.离子交换层析、PhenylSepharose6F.F.疏水层析及SephadexG—25Fine凝胶过滤等纯化方法,确定了较为合理的纯化工艺.酶蛋白纯化倍数达到21.4倍,酶活回收率为53.9%,为以后乳酸脱氢酶的进一步纯化提供了一定基础.高效液相色谱和SDSPAGE电泳初步表明:乳酸脱氢酶相对分子质量为80000,含有2个亚基,且每个亚基相对分子质量大致为39000.
- 石轩峰谢慧杨海麟王武
- 关键词:植物乳杆菌乳酸脱氢酶纯化硫酸铵沉淀离子交换层析疏水层析
- 植物乳杆菌RS2-2发酵法生产乳酸脱氢酶被引量:2
- 2005年
- 筛选到一株产乳酸脱氢酶的植物乳杆菌RS2-2(Lactobacillus plantarumRS2-2)。产酶条件研究表明,以蔗糖为碳源,酵母膏为氮源,起始pH 6.5左右,30℃发酵,接种量为10%,产酶量最高。在25 L发酵罐放大实验,并通过流加NaOH控制发酵过程中的pH,所产乳酸脱氢酶比活力为18.73 U/mg,菌重量为1 g/L以上。粗酶液经分离纯化得到成品酶液,比酶活提高了51.7倍,达到1210.7 U/mg,总收率为30.2%。用凝胶过滤检测其分子量分布,分子量约为85,000 Da,酶纯度为88%。
- 杨海麟石轩峰王立艳汪建军王武
- 关键词:乳酸脱氢酶培养基优化
- 响应面分析应用于短杆菌产酶工艺的优化被引量:3
- 2004年
- 本文研究了用响应面分析法(RSM)优化短杆菌产胆固醇氧化酶的工艺,发现胆固醇添加量及超声处理时间是影响短杆菌产酶最重要的因素。在模拟优化的条件下:胆固醇为4.076g/L,吐温-80为0.2932%(v/v),照射时间为22.361min,COD最大产量1.483U/mL。
- 杨胜利张慧石轩峰李亚琴王武
- 关键词:胆固醇吐温-80照射时间超声处理添加量
- 高纯度诊断用乳酸脱氢酶的制备和酶促反应被引量:5
- 2005年
- 设计并优化了植物乳杆菌发酵制备高纯度诊断用乳酸脱氢酶的技术路线.从培育的厌氧型植物乳杆菌中粗提乳酸脱氢酶制备液,经过DEAE Sepharose F.F.离子交换层析、PhenylSepharose 6 F.F.疏水层析及Sephadex G-25 Fine凝胶过滤等方法进行分离纯化,比酶活达1 096.8 U/mg,纯度达88%,纯化倍数达到21.4倍,酶活力回收率为53.9%;高效液相色谱和SDS—PAGE电泳结果显示制得乳酸脱氢酶相对分子质量约为80 000,含有两个亚基,每个亚基分子量约为39 000.
- 石轩峰杨海麟王武
- 关键词:乳酸脱氢酶植物乳杆菌纯化酶促反应