董俊红
- 作品数：27 被引量：39H指数：4
- 供职机构：潍坊医学院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金山东省高等学校科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学化学工程更多>>
- hTERT和survivin双靶点RNAi表达载体的构建及对人结肠癌SW480细胞的抑制作用被引量：1
- 2013年
- 目的构建人端粒酶反转录酶(hTERT)和生存素(survivin)基因表达的RNA共干扰载体,并检测其对人结肠癌SW480细胞中hTERT基因和survivin基因的干扰作用。方法根据Genbank提供的hTERT和survivin cDNA序列,设计、筛选出高效、特异性强的干扰序列,构建特异性干扰hTERT基因和survivin基因的重组体pGenesil-1.1-survivin、pGenesil-1.2-hTERT,酶切、测序鉴定正确后,两个重组体均用HindⅢ和BamHⅠ双酶切,将pGenesil-1.1-survivin回收大片段,pGenesil-1.2-hTERT回收小片段,将回收大、小片段用T4 DNA连接酶定向连接,即构建成重组体pGenesil1.1-survivin-hTERT。将3个重组体分别转染SW480细胞,RT-PCR检测细胞中hTERT和survivin基因表达水平,MTT检测对SW480细胞增殖的影响。结果构建的各质粒经限制性酶切及DNA测序均证明其质粒构建正确,RT-PCR检测hTERT和survivin基因表达水平明显降低(P<0.05),各干扰质粒重组体对细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.05)。结论靶向survivin和hTERT基因的双干扰载体构建成功,为后续的结肠癌基因治疗研究奠定理论基础。
- 王平肖琳董俊红孙凤祥蒋吉英王守训
- 关键词：SURVIVINHTERT
- hTRT反义基因转染对人结肠癌细胞生长的抑制作用
- 2004年
- 利用基因重组技术,hTRT基因反向插入真核表达载体pcDNA3.0,获得重组体pcDRTRT,通过脂质体法导入人结肠癌细胞株SW-111C,获得稳定转染细胞系,即反义细胞,该细胞易脱落,出现明显生长抑制现象;失去叠落生长能力;流式细胞仪(FCM)证实导入反义hTRT后,G0/1期细胞增加,G,M和S期细胞减少,增殖指数(PI)降低;且不能在软琼脂中形成集落;并发现反义细胞中hTRT表达水平明显下降。说明反义hTRT基因体外导入结肠癌细胞株SW-111C可以明显降低端粒酶活性,抑制结肠癌细胞的生长、增殖且能使其恶性表型发生逆转。
- 傅桂莲董俊红杜培革
- 关键词：人端粒酶催化亚单位人结肠癌细胞反义基因治疗
- 腹水中分离出1株反硝化产碱菌
- 2006年
- 王振明董俊红谢立苹安玉亮苏芬徐淼
- 关键词：腹水
- 血清p185糖链检测在乳腺癌诊断中的应用
- 曾常茜于秀艳金海甲王文龙张晓伟高海燕薛振平王振明董俊红王宏宇
- 本研究利用p185蛋白单克隆抗体及生物素化麦胚凝集素等建立检测血清p185蛋白及其糖链水平的ELISA法及凝集素ELISA法，并利用本实验建立的方法对30例乳腺癌患者，26例乳腺增生患者，30例正常对照的血清进行p185...
- 关键词：
- 关键词：P185乳腺癌
- 慢性心理应激通过β-AR-PKA通路促进脑胶质瘤增殖的机制被引量：2
- 2017年
- 本研究旨在探讨慢性心理应激是否可以通过β-AR-PKA(β-adrenergic receptor,β-AR)信号通路调节乳酸生成进而促进胶质瘤的增殖。首先构建人胶质瘤荷瘤裸鼠模型,待成瘤后通过束缚方法给予应激刺激4周,观察裸鼠皮下肿瘤增殖情况;ELISA检测血清中肾上腺素(epinephrine,EPI)、去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)及瘤组织乳酸的含量;RT-PCR及Western-blotting法检测瘤组织LDHA的表达情况;用NE处理胶质瘤LN229细胞模拟应激刺激,同时加入β-AR-PKA信号通路抑制剂Propranolol及H89,检测细胞中乳酸含量、LDHA表达及细胞增殖的情况。结果显示给予应激刺激后,荷瘤应激组裸鼠皮下肿瘤体积增长明显快于单纯荷瘤组;荷瘤应激组裸鼠EPI、NE、乳酸及瘤体中LDHA的表达均高于荷瘤组;Propranolol及H89均能有效抑制NE诱导的LN229细胞增殖、LDHA的表达及乳酸生成。本研究提示慢性心理应激可以通过β-AR-PKA信号通路调节LDHA的表达,而高浓度的乳酸进一步促进了肿瘤的增殖。
- 吕坤鹏许清銮王平李桂芝刘长江董俊红
- 关键词：胶质瘤慢性心理应激乳酸
- 不同类型冠心病患者ACA及sCRP水平的测定
- 2006年
- 董俊红王振明
- 联合转染Survivin和hTERT对结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响
- 目的:探讨联合转染Survivin短发夹RNA(shorthairpin RNA,shRNA)和hTERT shRNA对结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响,为结肠癌的基因治疗提供实验依据.
- 肖琳王平王守训董俊红
- 在SW480细胞中沉默survivin基因抑制细胞增殖及hTERT表达被引量：4
- 2013年
- 目的观察生存素(survivin)基因干扰对SW480细胞增殖的影响,探讨其干扰对hTERT基因表达的影响及机制。方法构建携带survivin小发夹干扰RNA的重组表达载体pGenesil-1.1-survivin,转染结肠癌SW480细胞,MTT检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞增殖周期;荧光定量PCR和Western blot检测survivin、hTERT和Sp1的mRNA和蛋白表达,TRAP-ELISE法检测端粒酶活性。构建靶向Sp1基因的RNA干扰载体转染SW480细胞,检测hTERT基因mRNA和蛋白水平及端粒酶活性。结果 Survivin基因干扰后,SW480细胞增殖受到明显抑制,增殖抑制率为34.44%(P<0.05),G0/G1期细胞增加,S期和G2/M期细胞减少(P<0.01)。hTERT和Sp1基因的mRNA和蛋白表达水平显著降低,端粒酶活性降低(P<0.01)。Sp1基因干扰后,hTERT基因的mRNA和蛋白表达水平及端粒酶活性下降(P<0.01)。结论靶向沉默survivin基因对SW480细胞增殖有明显的抑制作用;同时下调hTERT基因表达,其机制可能与Sp1基因表达下调有关。
- 王平肖琳董俊红李桂枝赵春玲王守训
- 关键词：HTERTSP1
- 核糖核酸干扰沉默survivin基因对A549细胞增殖及顺铂敏感性的影响被引量：2
- 2009年
- 目的:利用核糖核酸干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默抗凋亡基因survivin,观察其对人肺腺癌细胞A549增殖以及顺铂药物敏感性的影响。方法:将靶向survivin的基因片段插入带有绿色荧光蛋白基因的载体后构建重组质粒,将其导入A549细胞,RT-PCR分析转染前后survivin mRNA的表达情况,免疫荧光及Western blot分析转染前后survivin蛋白的表达情况,TUNEL法检测细胞凋亡情况,MTT法检测转染后A549细胞对顺铂的敏感性变化。结果:成功构建pGenesil1。1-survivin重组质粒。与对照组相比,转染重组质粒后,survivin mRNA和蛋白的表达明显降低,抑制率分别为65%和71%;细胞凋亡率增加;转染前顺铂对A549细胞的IC50为转染后的7.68倍,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:靶向survivin的RNA干扰表达载体能下调survivin基因表达,增强A549细胞对顺铂药物敏感性。
- 董俊红王振明王平肖琳黄焕生
- 关键词：SURVIVIN顺铂肺腺癌细胞
- 反义人端粒酶催化亚单位基因转染对人结肠癌细胞恶性表型的逆转作用
- 2005年
- 利用基因重组技术,人端粒酶催化亚单位基因反向插入真核表达载体pcDNA3.0,获得重组体pcDRTRT,通过脂质体法导入人结肠癌细胞株SW-111C,获得稳定转染细胞系,即反义细胞.该细胞易脱落,出现明显生长抑制现象;失去叠落生长能力;流式细胞仪(FCM)证实导入反义hTRT后,G0/1期细胞增加,G2M和S期细胞减少,增殖指数(PI)降低;且不能在软琼脂中形成集落.说明反义hTRT基因体外导入结肠癌细胞株SW-111C可以明显降低端粒酶活性,抑制结肠癌细胞的增殖且能使其恶性表型发生逆转.
- 杜培革董俊红王振明安丽萍傅桂莲
- 关键词：人端粒酶催化亚单位人结肠癌细胞反义基因治疗
