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核糖核酸干扰沉默survivin基因对A549细胞增殖及顺铂敏感性的影响被引量：2: 2009年; 目的:利用核糖核酸干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默抗凋亡基因survivin,观察其对人肺腺癌细胞A549增殖以及顺铂药物敏感性的影响。方法:将靶向survivin的基因片段插入带有绿色荧光蛋白基因的载体后构建重组质粒,将其导入A549细胞,RT-PCR分析转染前后survivin mRNA的表达情况,免疫荧光及Western blot分析转染前后survivin蛋白的表达情况,TUNEL法检测细胞凋亡情况,MTT法检测转染后A549细胞对顺铂的敏感性变化。结果:成功构建pGenesil1。1-survivin重组质粒。与对照组相比,转染重组质粒后,survivin mRNA和蛋白的表达明显降低,抑制率分别为65%和71%;细胞凋亡率增加;转染前顺铂对A549细胞的IC50为转染后的7.68倍,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:靶向survivin的RNA干扰表达载体能下调survivin基因表达,增强A549细胞对顺铂药物敏感性。; 董俊红王振明王平肖琳黄焕生; 关键词：SURVIVIN 顺铂肺腺癌细胞

土拉菌套式PCR检测技术的研究被引量：4: 2007年; [目的]为快速诊断土拉菌病拟建立套式PCR技术。[方法]设计出2对特异引物,取1986年1月收集的13名土拉菌病患者的抗凝血及对照组细菌,提取DNA并进行套式PCR扩增。[结果]套式PCR检测到患者血液中土拉菌阳性率为84.6%,对照组细菌均为阴性。用直接PCR能观察到10条位于900 bp的暗带。而行套式PCR后能观察到11条亮度较高为于550 bp处的条带。[结论]套式PCR方法检测土拉菌具有特异性强、敏感性高,简便快速的特点。; 宫英强新李金海张劲峰王雪鹤肖琳; 关键词：套式PCR 微孔板杂交

一种换液式多细胞共培养模拟失重实验装置: 本发明公开了一种换液式多细胞共培养模拟失重实验装置，涉及多细胞培养技术领域，包括底座和培养单元；底座：左侧面固定有主电机，所述底座的内部转动连接有固定架，所述底座内部的左侧面安装有电刷滑环，所述主电机输出轴与固定架的左侧...; 肖琳

沉默Survivin基因抑制SW480细胞的增殖及下调hTERT基因表达: 目的观察生存素(SURVIVIN)基因干扰对SW480细胞增殖的影响,探讨其干扰对hTERT基因表达的影响及机制。方法构建携带Survivin小发夹干扰RNA的重组表达载体pGenesil-1.1-Survivin,转染...; 王平肖琳董俊红李桂枝赵春玲王守训; 关键词：SURVIVIN HTERT SP1; 文献传递

沉默Survivin基因抑制SW480细胞的增殖及下调hTERT基因表达: 目的观察生存素(SURVIVIN)基因干扰对SW480细胞增殖的影响,探讨其干扰对hTERT基因表达的影响及机制。方法构建携带Survivin小发夹干扰RNA的重组表达载体pGenesil-1.1-Survivin,转染...; 王平肖琳董俊红李桂枝赵春玲王守训; 关键词：SURVIVIN HTERT SP1

枸杞多糖对人肺癌A549细胞凋亡及Survivin表达的影响被引量：5: 2011年; 目的探讨枸杞多糖(LBP)诱导人肺癌A549细胞的凋亡的作用及其作用机制。方法在体外培养的肺癌A549细胞株中加入不同浓度的LBP,应用流式细胞仪FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,RT-PCR及Western blot法分析加药前后凋亡抑制基因Survivin mRNA和蛋白表达情况。结果流式细胞仪FITC/PI双染法检测结果显示LBP可诱导人肺癌A549细胞凋亡,并且随着LBP浓度增加,凋亡率逐渐增加;LBP可使Survivin mRNA和蛋白的表达明显降低,并成一定的量效关系。结论 LBP可显著诱导人肺癌A549细胞凋亡,其作用机制可能与LBP抑制A549细胞凋亡抑制基因Survivin表达有关。; 肖琳王平崔涛王守训; 关键词：肺癌 LBP 细胞凋亡 SURVIVIN

联合转染Survivin和hTERT对结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响: 目的:探讨联合转染Survivin短发夹RNA(shorthairpin RNA,shRNA)和hTERT shRNA对结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响,为结肠癌的基因治疗提供实验依据.; 肖琳王平王守训董俊红

在SW480细胞中沉默survivin基因抑制细胞增殖及hTERT表达被引量：4: 2013年; 目的观察生存素(survivin)基因干扰对SW480细胞增殖的影响,探讨其干扰对hTERT基因表达的影响及机制。方法构建携带survivin小发夹干扰RNA的重组表达载体pGenesil-1.1-survivin,转染结肠癌SW480细胞,MTT检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞增殖周期;荧光定量PCR和Western blot检测survivin、hTERT和Sp1的mRNA和蛋白表达,TRAP-ELISE法检测端粒酶活性。构建靶向Sp1基因的RNA干扰载体转染SW480细胞,检测hTERT基因mRNA和蛋白水平及端粒酶活性。结果 Survivin基因干扰后,SW480细胞增殖受到明显抑制,增殖抑制率为34.44%(P<0.05),G0/G1期细胞增加,S期和G2/M期细胞减少(P<0.01)。hTERT和Sp1基因的mRNA和蛋白表达水平显著降低,端粒酶活性降低(P<0.01)。Sp1基因干扰后,hTERT基因的mRNA和蛋白表达水平及端粒酶活性下降(P<0.01)。结论靶向沉默survivin基因对SW480细胞增殖有明显的抑制作用;同时下调hTERT基因表达,其机制可能与Sp1基因表达下调有关。; 王平肖琳董俊红李桂枝赵春玲王守训; 关键词：HTERT SP1

hTERT和survivin双靶点RNAi表达载体的构建及对人结肠癌SW480细胞的抑制作用被引量：1: 2013年; 目的构建人端粒酶反转录酶(hTERT)和生存素(survivin)基因表达的RNA共干扰载体,并检测其对人结肠癌SW480细胞中hTERT基因和survivin基因的干扰作用。方法根据Genbank提供的hTERT和survivin cDNA序列,设计、筛选出高效、特异性强的干扰序列,构建特异性干扰hTERT基因和survivin基因的重组体pGenesil-1.1-survivin、pGenesil-1.2-hTERT,酶切、测序鉴定正确后,两个重组体均用HindⅢ和BamHⅠ双酶切,将pGenesil-1.1-survivin回收大片段,pGenesil-1.2-hTERT回收小片段,将回收大、小片段用T4 DNA连接酶定向连接,即构建成重组体pGenesil1.1-survivin-hTERT。将3个重组体分别转染SW480细胞,RT-PCR检测细胞中hTERT和survivin基因表达水平,MTT检测对SW480细胞增殖的影响。结果构建的各质粒经限制性酶切及DNA测序均证明其质粒构建正确,RT-PCR检测hTERT和survivin基因表达水平明显降低(P<0.05),各干扰质粒重组体对细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.05)。结论靶向survivin和hTERT基因的双干扰载体构建成功,为后续的结肠癌基因治疗研究奠定理论基础。; 王平肖琳董俊红孙凤祥蒋吉英王守训; 关键词：SURVIVIN HTERT

RNAi技术对A549细胞survivin基因表达及顺铂敏感性的影响被引量：1: 2009年; 目的利用RNA干扰(RNAi)技术沉默抗凋亡基因survivin,观察其对人肺腺癌细胞A549增殖以及顺铂药物敏感性的影响。方法将靶向survivin的基因片段插入到载体后构建重组质粒,将其导入A549细胞,RT-PCR及免疫荧光法分析转染前后A549细胞survivin mRNA及蛋白的表达情况,MTT法检测转染后A549细胞对顺铂的敏感性变化。结果成功构建pGenesil1.1-survivin重组质粒。转染重组质粒后,A549细胞survivin mRNA和蛋白的表达明显降低;转染前顺铂对A549细胞的IC50明显高于转染后(P<0.05)。结论靶向survivin的RNAi表达载体能下调survivin基因表达,增强顺铂对A549细胞的药物敏感性。; 董俊红王振明肖琳王平; 关键词：RNA干扰 SURVIVIN A549细胞顺铂

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肖琳