薛国柱
- 作品数：26 被引量：66H指数：6
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 结、直肠癌卵巢转移被引量：2
- 2001年
- 贾国强周瀛薛国柱金国祥
- 关键词：结肠癌直肠癌病理卵巢转移
- 全人源肝癌噬菌体单链抗体的筛选及特异性鉴定被引量：4
- 2005年
- 目的对全人源肝癌噬菌体单链抗体库进行鉴定,筛选肝癌抗体,同时对抗体的活性及特异性进行鉴定。方法PCR鉴定阳性重组菌TG1中人肝癌ScFv的插入率。先以人成纤维细胞吸附后再以体外培养的肝癌细胞SMMC7721为抗原对所建抗体库进行3轮“吸附洗脱扩增”的亲和筛选。将筛选后的ScFv进行PCR鉴定及双酶切鉴定;通过ELISA法及FCM鉴定其与人肝癌细胞及正常细胞的结合活性。结果ScFv基因插入率为70%。在亲和筛选过程中,肝癌噬菌体单链抗体得到富集,收获率逐轮得到提高,第3轮为第1轮的214倍。筛选后的ScFv进行PCR鉴定及双酶切鉴定,均可检测到目的基因。ELISA分析结果显示18个克隆与SMMC7721呈阳性反应,阳性率为90%,15个克隆与成纤维细胞有交叉反应。得到3株肝癌单链抗体。ScFv的FCM鉴定表明,以正常胎肝细胞L02为对照,ScFv与肝癌结合比率为41.3%。特异性鉴定表明,其与肝癌细胞结合活性明显高于正常细胞。结论利用噬菌体抗体库技术结合减数筛选得到了肝癌噬菌体单链抗体及其基因,且筛选后的抗体片段与人肝癌细胞有特异性的结合活性。
- 薛国柱窦科峰赵爱志药立波
- 关键词：噬菌体抗体库单链抗体肝肿瘤
- 创伤性空肠横断并嵌顿性腹壁疝1例
- 1998年
- 闭合性腹外伤有形成腹内疝或腹外疝者,但不多见。作者遇到1例空肠横断伤并断端嵌入腹壁形成腹外疝,报告如下。 病例介绍 李××,男,23岁。因车祸致腹部外伤2天入院,曾在外院保守治疗2天。查体:脉搏122次/分,血压13/8kPa。双肺呼吸音清,心律齐。腹部略膨隆,左上腹腹直肌外侧有一约5cm×5cm局限性隆起,局部皮肤微红,质软,边界清,触痛明显。左侧胸、腹壁有大片皮下气肿。腹肌略紧,有压痛及反跳痛,肠鸣音减弱。腹腔穿刺抽出不凝血。拟诊为闭合性腹外伤:①空腔脏器破裂;
- 薛国柱陈芦斌许克勤
- 关键词：嵌顿性创伤性腹内疝腹壁腹外伤皮下气肿
- 人肝细胞系生物功能筛选测定被引量：10
- 2002年
- 薛国柱刘冰艳陈芦斌高毅杨继震
- 关键词：人肝细胞系生物功能生物人工肝
- 全人源性肝癌单链抗体的表达、纯化及功能鉴定被引量：6
- 2007年
- 目的:在大肠杆菌中表达人源性肝癌单链抗体(scFv),并分析他的结合活性。方法:应用噬菌体表面呈现技术获得人源性肝癌scFv,利用重叠延伸PCR将VL和VH基因以(Gly4ser)3linker连接成单链,插入表达载体pET28a(+),诱导目的蛋白表达,对包涵体进行溶解、复性、纯化,得到可溶性目的蛋白,应用非竞争细胞ELISA检测与肝癌细胞结合的特异性及结合能力。结果:在A600为0.8时开始诱导,持续6h,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的26%,包涵体经过复性纯化后,得到纯度达到95%的重组scFv,其亲和常数为:3.6×107mol/L。结论:实现了人源性肝癌scFv的蛋白表达,抗体蛋白与肝癌细胞具有较强的特异性结合能力,为今后进行免疫学检测和开发肿瘤靶向治疗提供了研究手段。
- 赵清涛马龙洋薛国柱赵爱志窦科峰
- 关键词：肝癌单链抗体生物活性
- 噬菌体抗体库筛选技术及在肿瘤研究中的应用被引量：2
- 2005年
- 噬菌体抗体是指表达在噬菌体表面的抗体分子Fab或scFv,这些分子的群体称为抗体库。经特定抗原或细胞筛选后可以获得针对该抗原或细胞表面标志物的特异性抗体。经典的筛选方法为固相或液相抗原识别,前提条件是能得到抗原纯品,对于抗原无法提纯或抗原性质不确定的情况则不能适用,所以又出现全细胞筛选,直接利用肿瘤细胞或组织细胞进行筛选,无需纯抗原,但目标抗原一定要有较高的表达水平,对于表达较低的情况,一种策略是先利用正常细胞筛选,去掉无关抗原后,再利用肿瘤细胞筛选;另一种策略是细胞内化筛选,特异性抗体被内化入细胞,然后用酸性洗脱液洗脱掉细胞膜上非特异结合的噬菌体抗体后裂解细胞,获得特异性抗体。其余筛选方法还有切片组织筛选、体内筛选等,适用面较窄,未获推广。筛选效率主要通过以下几项的检测:转化数,即被感染的噬菌体数,它随筛选轮数的增加而增加;抗体基因插入载体的频率,高比例的丢失意味着筛选的低效率;抗体亲和性。抗体库技术避免了杂交瘤技术中的许多难点,如细胞融合、动物免疫等,目前该技术已逐渐在肿瘤诊断和肿瘤治疗中发挥重要作用。
- 薛国柱吕勇刚窦科峰
- 噬菌体抗体库筛选技术研究进展被引量：5
- 2005年
- 薛国柱窦科峰
- 关键词：抗体抗体筛选肿瘤
- 组合性人工肝的研究现状
- 1996年
- 作者复习近10年文献,简要回顾了人工肝的历史,着重介绍了组合性人工肝装置(hybrid artificial liver system)的研究现状,分析存在的问题,提出了研究方向。 1 人工肝的过去 人工肝的研制过程中曾采用过两种形式:机械型和生物型。前者包括血液透析、血液灌注、血浆灌注等,仅能提供被动解毒功能。后者包括离体肝灌注、人-狗交叉透析,人-人交叉循环等,存在免疫排斥和生物肝缺乏等问题。
- 薛国柱杨继震高毅
- 关键词：人工肝肝细胞
- 全人源肝癌噬菌体单链抗体库的鉴定及筛选被引量：1
- 2004年
- 目的:对全人源肝癌噬菌体单链抗体库进行鉴定,筛选肝癌抗体,同时对抗体的活性进行鉴定. 方法:PCR鉴定阳性重组菌TG1中人肝癌ScFv的插入率.先以人成纤维细胞黏附后再以肝癌细胞SMMC-7721为抗原对所建抗体库进行3轮“黏附-洗脱-扩增”的亲和筛选. 将筛选后的ScFv进行PCR鉴定及双酶切鉴定;通过EIASA 法鉴定其与人肝癌细胞的结合活性. 结果:ScFv基因插入率为70%.在亲和筛选过程中,肝癌噬菌体单链抗体得到富集,收获率逐轮得到提高,第3轮为第1轮的214倍.筛选后的ScFv进行PCR鉴定及双酶切鉴定后,均可检测到目的基因.得到3株特异性肝癌单链抗体. 结论:利用噬菌体抗体库技术结合减数筛选得到了肝癌噬菌体单链抗体及其基因,且筛选后的抗体片段与人肝癌细胞有特异性的结合活性.
- 薛国柱窦科峰赵爱志药立波
- 关键词：肝癌细胞
- 两种菌落聚合酶链反应在抗体库筛选中的应用比较被引量：4
- 2004年
- 目的 :探讨两种菌落PCR方法在抗体库筛选中的应用价值。 方法 :分别以 5个阳性克隆细菌菌落直接悬浮于去离子水中及悬浮于含 0 .1%的TritonX 10 0后经水浴煮沸作为模板 ,进行PCR反应。同时提取质粒DNA ,进行双酶切鉴定。 结果 :5个克隆的菌落PCR及酶切鉴定均检测到目的基因。 结论 :菌落PCR可用于筛选阳性重组克隆。
- 薛国柱窦科峰吕勇刚药立波
- 关键词：聚合酶链反应菌落抗体库目的基因
