阚士东
- 作品数:5 被引量:3H指数:1
- 供职机构:上海医药工业研究院更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项上海市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 银杏叶中银杏内酯A分离纯化工艺研究
- 2011年
- 目的:建立一种简易的自银杏叶中提取、分离和纯化银杏内酯A的方法。方法:依次通过乙醇溶液搅拌提取、乙酸乙酯萃取、大孔树脂吸附与洗脱及结晶和重结晶对银杏叶中的银杏内酯A进行分离纯化。以银杏内酯A的得率和纯度为指标,对银杏内酯A的分离纯化工艺进行优选。结果:确定银杏内酯A提取、分离和纯化的最佳工艺条件为:将银杏叶乙醇提取物混悬液的酸碱液调节至pH3后进行萃取;选择NM100树脂为固定相,萃取物溶液调节至pH3后上柱,流速控制为1 mL.min-1,再以体积分数为30%和50%的乙醇溶液进行梯度洗脱;收集50%乙醇洗脱液,浓缩后4℃下静置过夜,得粗晶体并进行重结晶,体系中乙醇与水的体积比为2∶1。该工艺制得的银杏内酯A晶体纯度高于99%,总收率约为60%。结论:该工艺稳定、简便易行,适合工业化大生产。
- 郭瑞峰屈凌波陈代杰李继安阚士东林惠敏
- 关键词:银杏内酯A分离纯化大孔吸附树脂
- 临床分离MRSA中氨基糖苷类抗生素磷酸化酶的克隆表达与活性测定被引量:1
- 2010年
- 目的:从临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)中克隆氨基糖苷类抗生素磷酸化酶基因并异源表达,建立其磷酸化反应的体外测活方法。方法:考察临床分离MRSA对氨基糖苷类抗生素的敏感性,从中克隆磷酸化酶基因,并连入pET28a构建表达载体和菌株,将表达的重组蛋白以亲和色谱分离纯化;使用ESI-MS以及抗菌活性实验测定其磷酸化酶活性。结果:药敏实验表明临床分离的6株MRSA均对氨基糖苷类抗生素不敏感,重组表达克隆到的磷酸化酶,表达产物纯化后的纯度大于90%,体外催化试验表明,重组磷酸化酶2h内可以催化反应体系内的卡那霉素B完全磷酸化。结论:异源表达的氨基糖苷类抗生素磷酸化酶具有很好的活性,体外测活方法可靠快捷,为建立氨基糖苷类抗生素磷酸化酶抑制剂筛选模型打下基础。
- 陈俊升苏敏陈代杰李继安阚士东邵雷
- 关键词:氨基糖苷类抗生素耐甲氧西林金葡菌磷酸化酶
- 不同提取条件对丹酚酸B和E相对含量的影响被引量:2
- 2011年
- 通过HPLC、LC-MS等手段确定了丹参提取物中的小组分丹酚酸E,并考察了加水量、提取温度、时间和pH对丹酚酸B、E相对含量及丹酚酸B提取率的影响。结果显示:不同提取条件下,丹酚酸B、E相对含量变化显著,推测两者存在一定转化机制。丹酚酸B的最佳提取工艺为:丹参药材中加入8倍体积水,用1 mol/L盐酸调至pH 4 0,70℃提取60min,丹酚酸B的收率大于90%。
- 刘文静阚士东陈代杰李继安邵雷
- 关键词:丹参丹酚酸B
- 一种高纯度丹酚酸B的制备方法
- 本发明公开了一种高纯度丹酚酸B的制备方法,所述的方法包括步骤:(1)将丹参水提物和禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)静息细胞混合,在20-35℃生物转化24-90小时,得到去除迷迭香酸的丹参水提物;和...
- 李继安阚士东陈代杰
- 文献传递
- 一种高纯度丹酚酸B的制备方法
- 本发明公开了一种高纯度丹酚酸B的制备方法,所述的方法包括步骤:(1)将丹参水提物和禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)静息细胞混合,在20-35℃生物转化24-90小时,得到去除迷迭香酸的丹参水提物;和...
- 李继安阚士东陈代杰
- 文献传递