陈金中
- 作品数：60 被引量：43H指数：4
- 供职机构：复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生政治法律文化科学更多>>
- 兔抗hCG CP22抗血清体外抑制肿瘤细胞生长的研究
- 2011年
- 目的:探讨抗原抗体反应检验若干人肿瘤细胞分泌β-hCG情况,和抗hCGCP22抗血清体外抑制肿瘤的作用。方法:采用细胞免疫荧光染色测定5个肿瘤细胞株是否表达β-hCG,用CCK-8试剂盒检测CP22抗血清(AS CP22)和β-hCG羧基端37肽(CTP)抗血清(AS CTP)体外抑制肿瘤细胞生长的光密度。结果:以AS CP22为探针和AS CTP为阳性对照,体外培养的人胰腺癌BXPC-3、人卵巢癌HO-8910和人结肠癌Lovo细胞膜上都能观察到绿色荧光,提示肿瘤细胞均表达β-hCG亚单位,而人前列腺癌PC-3和Du-145细胞则未检测到绿色荧光;与正常兔血清(NS)比较,AS CP22和AS CTP均可显著的体外抑制BXPC-3和HO-8910细胞生长,P<0.001。AS CP22抑制BXPC-3和HO-8910肿瘤细胞的作用都强于AS CTP,P<0.05。结论:人胰腺癌BXPC-3、人卵巢癌HO-8910和人结肠癌Lovo细胞在体外培养的情况下均表达β-hCG亚单位,且它们的体外生长都能被兔抗hCG嵌合肽(CP22)抗血清体外抑制。
- 何亚萍徐万祥廖矛川孙志达季朝能顾少华陈金中谢毅
- 关键词：人肿瘤细胞Β-HCG抗血清免疫荧光染色
- 一种嵌合的肿瘤特异性基因表达调控盒及其应用
- 本发明属于生物医药技术领域，具体提供一种嵌合的肿瘤特异性基因表达调控盒。它包含肿瘤特异性基因启动子、肿瘤特异性翻译调控元件5’端非翻译区、多克隆位点、基因表达增强子和多聚腺苷酸信号区；肿瘤特异性基因启动子、肿瘤特异性翻译...
- 田聆方煜翔陈金中薛京伦
- 文献传递
- 滋阴清热药对狼疮鼠肾组织自噬基因atg16L1和细胞焦亡炎症因子的影响被引量：7
- 2017年
- 目的探讨滋阴清热药对狼疮鼠肾组织自噬基因atg16L1和细胞焦亡炎症因子的影响。方法以滋阴清热方干预狼疮鼠,免疫组织化学方法观察自噬基因atg16L1肾组织中的组织形态,定量PCR检测atg16L1基因表达,同时检测肾组织细胞焦亡上下游炎症因子Caspase-1,IL-1β以及足细胞靶抗原Nephrin,Actinin4。结果滋阴清热药能提高狼疮模型鼠组肾组织自噬基因atg16L1的表达(P<0.01),降低细胞焦亡炎症因子IL-1β(P<0.01)以及足细胞靶抗原Nephrin表达(P<0.05)。结论滋阴清热药能调控狼疮鼠肾组织自噬基因atg16L1,减轻免疫炎症和器官损害。
- 凡慧王继辉范萍梁康礼胡小倩陈金中程喜平
- 关键词：自噬
- 中国血友病B生物基因治疗研究状况被引量：5
- 2009年
- 血友病B为一种严格的X连锁隐性遗传病,由于其单纯的分子遗传基础和明确的临床表现,容易观察疾病治疗的效果;hFⅨ较小的基因规模可以适用于几乎所有的常用基因载体系统.在多种细胞均可以获得有效的表达使得基因治疗时可以有广泛的细胞选择范围,同时也为生物工程制备重组蛋白药物提供了便利.而且,血友病B有天然和基因操作形成的动物模型便于治疗的临床前实验研究.基于上述理由,血友病B一直是遗传病基因生物治疗和重组蛋白药物制备的重要模型.我国在20世纪90年代成功完成了基因治疗血友病B的临床试验,对推进我国的基因治疗起到重要作用.本文简述我国在血友病B的生物基因治疗方面的研究情况与发展方向,希望为基因治疗和重组蛋白药物研究人员提供参考.
- 陈金中薛京伦
- 关键词：血友病B基因治疗生物治疗疾病模型
- 人类RBBP10和bimα3的克隆和功能研究
- 细胞增殖和细胞凋亡是多细胞生物控制组织细胞稳态的重要机制.细胞周期和细胞凋亡异常是多种人类疾病的根本原因.RB及bcl-2家族蛋白为细胞周期和细胞凋亡的核心控制成分,它们各有其功能特点又彼此协调.用RB口袋区结合蛋白保守...
- 陈金中
- 关键词：细胞增殖细胞凋亡免疫组织化学细胞分化
- 文献传递
- 一种重组单纯疱疹病毒遗传操作系统及其应用
- 本发明属于医药生物技术领域，提供了一种重组单纯疱疹病毒遗传操作系统。该重组单纯疱疹病毒遗传操作系统，包括HSV骨架载体和穿梭质粒；所述的HSV骨架载体包含HSV基因组DNA、BAC质粒骨架、多克隆位点、真核抗性基因以及原...
- 田聆方煜翔薛京伦陈金中
- 文献传递
- 基于Phi BT1整合酶及Phi C31整合酶的基因克隆质粒及其应用
- 本发明属生物技术和基因工程技术领域，具体涉及一种基于Phi BT1整合酶及Phi C31整合酶的基因克隆质粒(pBCFX+和pBCFX-)及其应用。该质粒使用含有Phi BT1整合酶及PhiC整合酶对应attP位点串连序...
- 陈金中李智慧姚纪花田聆薛京伦
- 文献传递
- 人类新血小板反应素R-spondin 3的细胞定位及其对肿瘤细胞功能的影响
- 2011年
- 目的观察人类新血小板反应素R-spondin 3(Rspo 3)的细胞定位,并探讨其在肿瘤发生发展中的可能作用。方法利用荧光显微成像法观察EGFP-Rspo 3在HEK293细胞中的分布。将重组质粒pcDNA-Rspo 3转染结肠癌细胞HT-29、LoVo,采用流式细胞术观察Rspo 3基因过表达对肿瘤细胞周期与凋亡的影响;采用Matrigel、Transwell实验分别检测Rspo 3基因过表达对肿瘤细胞黏附及侵袭能力的影响。结果荧光显微成像法观察发现,EGFP-Rspo 3融合蛋白在细胞核表达,呈弥散点状分布。流式细胞术观察发现,Rspo 3基因过表达对肿瘤细胞生长周期没有明显影响;Rspo 3基因过表达不影响低恶性的HT-29细胞凋亡,但诱导高恶性的LoVo细胞凋亡(P<0.01)。Rspo 3基因过表达增强肿瘤细胞黏附性(P<0.01),降低肿瘤细胞的侵袭力(P<0.01),对肿瘤细胞移行有一定抑制作用。结论 Rspo 3有核定位功能,能诱导部分肿瘤细胞凋亡并抑制其转移扩散。
- 杨伟志孙庆莉陈金中胡志前
- 关键词：亚细胞定位细胞黏附肿瘤侵润
- 人釉原蛋白的原核表达、纯化及鉴定被引量：2
- 2008年
- 目的构建含人釉原蛋白(hAm)成熟肽基因的重组原核表达质粒,在大肠杆菌中表达重组人釉原蛋白,鉴定经纯化获得的融合蛋白。方法利用限制性内切酶EcoRⅠ和SalⅠ将hAm基因插入原核表达载体PGEX4T1,对重组表达质粒PGEX4T1-hAm进行双酶切和测序鉴定。选择测序正确的质粒转化E.coli.RosettaTM,用终浓度0.3 mmol/L的IPTG诱导表达带有亲和标记谷胱甘肽-S-转移酶(GST)的重组hAm。经亲和层析纯化获得融合蛋白GST-hAm,并通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定原核表达的重组hAm。结果重组质粒经双酶切和测序鉴定证实插入序列准确无误。在大肠杆菌RosettaTM中经IPTG诱导表达并纯化得到的融合蛋白GST-hAm,经SDS-PAGE鉴定分子量约为46000,主要以包涵体形式存在,与预测一致;Western blotting证实该融合蛋白能被特异性抗hAm多克隆抗体识别。结论成功构建含有hAm成熟肽基因的重组原核表达质粒,表达的融合蛋白GST-hAm可通过纯化获得,经鉴定为hAm。大量纯化的hAm成熟肽的获得为开展其功能研究奠定了基础。
- 程岚束蓉薛京伦陈金中田聆方煜翔
- 关键词：原核表达载体融合蛋白
- 人釉原蛋白基因重组慢病毒载体的构建及在293T细胞中的表达被引量：1
- 2008年
- 目的:构建含人釉原蛋白(human Amelogenin,hAm)成熟肽编码区基因的慢病毒载体FUAmW,并观察在重组慢病毒感染的293T细胞中釉原蛋白的表达。方法:以构建好的重组质粒PQE30-Am为模板,采用PCR技术体外扩增hAm成熟肽编码区。将扩增产物与慢病毒载体转移质粒FUGW分别用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后连接,构建重组慢病毒载体,转移质粒FUAmW,并进行酶切及测序鉴定。通过聚乙烯亚胺(polytheylenimine,PEI)法将三质粒共转染293T细胞,包装得到重组慢病毒FUGW和FUAmW,然后分别离体感染293T细胞,培养72h后,经荧光显微镜下观察和流式细胞计数检测感染效率,采用RT-RCR及Western印迹法检测釉原蛋白基因的表达。结果:重组质粒经测序证实,插入片段与人釉原蛋白成熟肽基因序列完全一致。流式细胞仪测得重组病毒感染293T细胞绿色荧光蛋白(green fluoresence protein,GFP)的阳性率为67.38%。RT-RCR和Western印迹均证实,重组慢病毒FUAmW感染的293T细胞能够表达人釉原蛋白。结论:成功构建携带人釉原蛋白成熟肽基因的重组慢病毒载体质粒,以293T细胞包装得到的重组人釉原蛋白病毒能感染真核细胞并获得表达。
- 程岚束蓉宋忠臣张秀丽薛京伦陈金中田聆黄璐
- 关键词：釉原蛋白重组慢病毒载体转染
