高敏杰
- 作品数：40 被引量：80H指数：5
- 供职机构：江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学文化科学更多>>
- 基于CFD模拟的新型径向流搅拌桨设计被引量：8
- 2017年
- 用CFD软件模拟了3种传统径向流搅拌桨—平直叶式、半圆管式和非对称抛物线式搅拌桨的功率消耗和泵送能力等搅拌性能,研究了不同桨叶结构和尺寸对搅拌桨功率准数和泵送能力的影响,设计扇环抛物面桨叶结构,比较了新型桨与传统桨的功率准数、泵送效率等搅拌性能和轴向投影面积率的差异.结果表明,桨叶外缘顶点曲率增大可减小功率准数和提高泵送效率,轴向高度减小可使功率准数降低但对泵送效率提升不大.基于空间自由曲面设计的带有新型非对称扇环抛物面桨叶的搅拌桨操作性能最佳,比非对称抛物线式搅拌桨功率准数下降30.8%,泵送效率提高22.6%.新型搅拌桨轴向投影面积率比非对称抛物线式搅拌桨增加21.5%,能用于气液分散操作.
- 孙东东郑志永李晶詹晓北高敏杰金亚楠
- 关键词：CFD模拟功率准数
- 土壤杆菌-毕赤酵母耦合培养直接生产热凝胶低聚糖被引量：4
- 2019年
- 为提高热凝胶低聚糖生产效率,构建了土壤杆菌-毕赤酵母耦合培养体系,其中土壤杆菌代谢产物热凝胶可被毕赤酵母分泌的内切-β-1,3-葡聚糖酶利用直接生产热凝胶低聚糖。用基于不同启动子(AOX1,GAP,FLD)调控的毕赤酵母重组菌株分泌表达内切-β-1,3-葡聚糖酶BGN13.1a,验证其均能有效水解热凝胶得到热凝胶低聚糖。在此基础上,选取GAP启动子调控的毕赤酵母工程菌与土壤杆菌耦合培养,通过设计两种物种之间的共生关系实现稳定共培养并生产聚合度为17~22的热凝胶低聚糖,产量为4.278 g/L。
- 李菲菲金树霞朱莉詹晓北赵玥刘丽萍高敏杰
- 关键词：土壤杆菌毕赤酵母
- 以甘油为底物发酵生产新型黄原胶被引量：5
- 2018年
- 经过驯化得到了一株可以利用甘油发酵生产黄原胶的野油菜黄单胞菌突变株,Xanthomonas. campestris WXLB-006。RT-PCR结果显示:X. campestris WXLB-006中甘油代谢相关基因(glpF,glpK,glpD,fbp)的相对表达量均高于原始菌株,依次为glpD (8.53)> glpF(7.64)> glpK(6.61)> fbp(5.79)。初始甘油质量浓度40 g/L、变通气量和变搅拌转速(0~24 h,0.5 vvm和200 r/min;24~60 h,1.0 vvm和400 r/min)以及三阶段变速流加甘油策略(24~34 h,3g/L/h;34~44 h,2 g/L/h;44~54 h,1 g/L/h),使生物量由1.65 g/L增加到1.94 g/L,黄原胶产量由17.8 g/L提高到33.9 g/L,发酵周期由120 h缩短至60 h。重要的是,以甘油为底物发酵得到的黄原胶具有粘度低、透明性高、水化速率快和反复冻融处理粘度增大的特点。
- 王子朝朱莉吴剑荣郑志永高敏杰詹晓北
- 关键词：驯化甘油黄原胶
- 基因突变提高毕赤酵母表达内切β-1,3-葡聚糖酶活性
- 2021年
- 为构建一株高效表达内切β-1,3-葡聚糖酶的毕赤酵母菌株,并用于水解热凝胶生产β-1,3-葡寡糖。作者首先对哈茨木霉来源内切β-1,3-葡聚糖酶基因进行随机突变,并构建BGN13.1a突变库;然后采用高通量技术及刚果红平板筛选高表达菌株;最后采用TLC薄层色谱和MALDI-TOF MS分析热凝胶水解产物,并分析了酶学性质。结果表明,本研究成功筛选得到毕赤酵母突变株K827,酶活较初始菌株提高了25%;其水解产物聚合度为2~10,且寡糖产量为1.492 g/L;其最适pH与最适温度分别为5.5和50℃;相较亲本酶,突变株K827的pH稳定性与温度稳定性都有明显提高。本研究为内切β-1,3-葡聚糖酶的工业化生产及应用提供依据。
- 金树霞王力朱莉李菲菲刘丽萍詹晓北郑志永高敏杰
- 关键词：毕赤酵母易错PCR酶学性质
- 大肠杆菌抗噬菌体基因的挖掘及其抗噬菌体菌株的构建
- 2023年
- 【目的】噬菌体是工业发酵侵染底盘细胞的专一性病毒,由于其广泛存在以及难以根除,极大影响了发酵生产,从基因水平进行抗噬菌体基因的挖掘以及功能验证可以显著增强底盘细胞的抗噬菌体的能力,从而达到从源头上抵御噬菌体污染的目的。为了选育具有噬菌体抗性的工程菌株,本研究旨在分析选取抗噬菌体的基因以及构建抗噬菌体的工程菌株。【方法】采用共进化筛选、重测序手段、重组菌株构建以及噬菌体侵染的敏感验证实验等方法,获得具有抗噬菌体属性的工程菌株。【结果】实验通过共进化共筛选得到7株抗噬菌体驯化菌株,基因组重测序以及Annovar软件分析,发现了12个基因发生位点突变,选取位点突变频率较高的dnaE (DNA聚合酶Ⅲ亚基α)、yhjH (环状二GMP磷酸二酯酶)及rzoD (假定的噬菌体裂解脂蛋白) 3个基因分析对噬菌体的抗性,突变基因过表达菌株对噬菌体BL21 Virus 01、BL21 Virus 02、BL21Virus06、T1和T7具有明显的抗性;吸附率测定结果表明,基因dnaE和yhjH影响噬菌体复制,而基因rzoD突变影响噬菌体吸附过程。使用定量PCR进一步分析突变基因dnaE和yhjH对噬菌体的抗性作用,结果表明基因dnaE、yhjH突变影响噬菌体基因组BL21 Virus 01的复制过程,而rzoD突变影响噬菌体BL21 Virus 01的吸附过程。【结论】基因dnaE、yhjH、rzoD的位点突变能够有效抵御噬菌体的侵染,同时含有3个位点突变的工程菌株BC11具有较广范围内的噬菌体抗性,是潜在的抗噬菌体底盘细胞。本研究为抗噬菌体基因挖掘与初步解析以及开发抗噬菌体工程菌株提供借鉴。
- 崔晓媛尤甲甲潘学玮张恒维张显高敏杰饶志明
- 关键词：工程菌株
- 优化碳源及Na_2SeO_3补料策略强化发酵生产富硒酵母被引量：5
- 2016年
- 为提高富硒酵母的生物量及富硒水平,在7 L发酵罐规模研究了碳源和无机硒的不同补料方式对富硒啤酒酵母发酵性能的影响。结果表明,采用碳源指数流加(μset=0.19 h-1)能够获得较高的生物量(32.9 g/L)及生产强度[1.50 g/(L·h)],相对碳源恒速流加发酵分别提高了15.8%和27.1%;在对数期采用两阶段恒速流加无机硒的策略可以实现高生物量和高硒含量的相对统一,发酵22 h后,酵母干重可达31.5 g/L,干酵母硒含量和有机硒转化率分别达到602.3mg/kg和72.0%,相对无机硒恒速流加发酵分别提升了13.2%和8.1%。
- 史泽旭朱莉高敏杰郑志永詹晓北秦楠
- 关键词：富硒酵母啤酒酵母发酵优化
- 高果糖浆废液杂糖组分分析及其作为毕赤酵母发酵碳源的资源化利用被引量：2
- 2020年
- 废杂糖的资源化利用是高果糖浆生产行业迫切需要解决的问题。该研究首先通过高效液相、质谱和红外光谱分析,确定了杂糖成分为葡萄糖、果糖和聚合度为2~16的线性葡聚糖,包括葡萄糖480 g/L,果糖92 g/L,麦芽糖103.6 g/L,麦芽三糖36.8 g/L,总糖含量802.3 g/L。进一步使用2种常用的毕赤酵母宿主(P AOX1型毕赤酵母、P GAP型毕赤酵母)利用杂糖发酵生产内切β-1,3葡聚糖酶并与标准碳源(甘油和葡萄糖)作对比。结果表明,对于P AOX1型毕赤酵母,杂糖做碳源时细胞密度和酶活性与甘油相比均有所下降,最大生物量分别为59.1和82.0 g/L,最高酶活性分别为157.29和199.2 U/mL。对于P GAP型毕赤酵母,杂糖与葡萄糖的发酵效果相当,说明杂糖可以作为P GAP型毕赤酵母生产内切β-1,3葡聚糖酶的优质替代性碳源。
- 刘丽萍王力詹晓北朱莉郑志永高敏杰
- 关键词：高果糖浆毕赤酵母碳源
- 环β-1,2-葡聚糖-姜黄素包合物的体外益生特性研究
- 2023年
- 姜黄素(curcumin,Cur)是一种具有益生功能的不溶性多酚类化合物。该文研究了环β-1,2-葡聚糖-姜黄素包合物(cyclosophoraose-curcumin,Cys/Cur)的体外益生特性。通过Cys及Cys/Cur的体外模拟消化实验得出,Cys的分子质量和总糖的含量在模拟消化过程中均无显著变化,呈现了较高的抗消化性。模拟胃肠道消化的过程中,Cys/Cur包合物中的Cur逐渐释放,最终释放率达到(88±1.8)%。通过6株双歧杆菌属(Bifidobacterium)和乳杆菌属(Lactobacillus)的体外静态发酵评估Cys/Cur促进益生菌生长的潜力。结果表明,与其他组相比,Cys/Cur能够显著促进双歧杆菌属和乳杆菌属的生长和短链脂肪酸的生成。进一步探究Cys/Cur对健康人粪便静态发酵影响,与Cys和FOS组相比,Cys/Cur在24 h内显著增强了乙酸、丙酸和乳酸的产量,显著促进双歧杆菌属和乳杆菌属等有益菌属的增殖,并显著抑制条件致病菌乳球菌属(Lactococcus)、链球菌属(Streptococcus)和克雷伯杆菌属(Klebsiella)的相对丰度,进而改善宿主肠道微生物区系的结构。这是关于Cys/Cur体外益生特性的首次报告,为其在食品工业中的应用提供了基础。
- 吴传超梁瑞雨张洪涛高敏杰朱莉詹晓北
- 关键词：姜黄素短链脂肪酸肠道微生物
- 固态发酵废菌棒高产哈茨木霉孢子被引量：1
- 2019年
- 以废菌棒为固态发酵主要基质,采用单因素和响应面分析法(RSM)优化哈茨木霉固态发酵生产孢子,最后进行固态发酵放大实验。结果显示:最佳培养条件为接种量(质量浓度)7.5 g/dL,装料量20 g,pH自然,培养温度28℃,发酵周期144 h;响应面分析法优化的理论值为:初始含水质量分数57.07%,淀粉质量分数3.08%,NaNO3质量分数1.99%,理论孢子产量5.65×10^9个/g,验证实验结果5.91×10^9个/g,符合理论预测;使用10 L自制固态发酵罐进行放大实验,通风条件下孢子产量显著提高,达到8.20×10^9个/g。
- 王巧河朱莉郑志永高敏杰高敏杰
- 关键词：孢子废菌棒固态发酵
- 结冷胶裂解酶在毕赤酵母中的异源表达及其性质和应用被引量：2
- 2022年
- 结冷胶寡糖由结冷胶降解所得,具有益生活性、植物诱导抗病性等多种生物学功能,其制备意义重大。该研究通过构建重组毕赤酵母以实现结冷胶裂解酶异源表达,并应用于裂解结冷胶制备结冷胶寡糖。重组菌株经筛选鉴定,首先于摇瓶水平诱导表达结冷胶裂解酶,获得酶活力最高为266.4 U/L的菌株;随后在7 L发酵罐中进行高密度发酵,酶活力达954.6 U/L。对重组结冷胶裂解酶进行分离纯化并研究其酶学性质,结果表明,酶促降解反应最适催化温度和pH分别为45℃和7.5,在45~50℃和pH 7.0~9.0下稳定,Zn^(2+)对酶活性略有促进作用,Al^(3+)对酶促反应具有较强的抑制作用。通过薄层色谱法联用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱分析降解产物,该结冷胶寡糖聚合度为4。该研究首次在毕赤酵母中成功表达Bacillus sp.GL1来源结冷胶裂解酶,特异性降解结冷胶制备寡糖,具有一定的工业应用潜力和指导意义。
- 段飞扬王力詹晓北蒋芸李志涛高敏杰
- 关键词：毕赤酵母异源表达酶学性质
