刘佳佳
- 作品数：73 被引量：253H指数：8
- 供职机构：泸州医学院基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省杰出青年科技基金四川省学术和技术带头人培养资金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- ONO-AE-248诱发中性粒细胞非凋亡性程序化细胞死亡的生化信号转导初探被引量：2
- 2007年
- 目的:研究ONO-AE-248诱发中性粒细胞(PMN)非凋亡性程序化细胞死亡过程中,细胞死亡相关的蛋白分子caspase-3、caspase-8、p-38MAPK和PKC的作用,探讨这种细胞死亡的分子机制。方法:运用光镜和DNA电泳对PMN形态学变化和生化特征进行观察和评估;通过Western blot显示PMN中caspase-3、caspase-8活性改变和p-38MAPK磷酸化改变;运用MTS法检测PKC抑制剂对PMN活性的影响。结果:PMN经ONO-AE-248刺激,绝大多数分叶核融合成单叶核(12小时),DNA琼脂糖电泳结果显示缺乏梯状条带(24小时),而且ONO-AE-248对caspase-3、caspase-8活性和p-38MAPK磷酸化水平无明显影响。然而,PKC抑制剂STS和H-7能显著抑制ONO-AE-248对PMN的促死亡效应。结论:ONO-AE-248所诱导的PMN死亡可能是一种非凋亡性的主动性细胞死亡,即非凋亡性程序化细胞死亡。该死亡过程不依赖caspase-3、caspase-8的活化和p-38MAPK的磷酸化,但是PKC可能发挥正向的调控作用。
- 何浩刘佳佳张姿李昕段承刚谢华福刘晓燕何涛何延政
- 关键词：ONO-AE-248中性粒细胞CASPASEPKC
- 凋亡相关基因在ONO-AE-248诱发的中性粒细胞非凋亡性程序化死亡中的表达被引量：1
- 2008年
- 薛晓婕刘佳佳羊建段承刚刘晓燕谢华福
- 关键词：ONO-AE-248中性粒细胞凋亡
- ONO-AE-248诱发中性粒细胞非凋亡性程序化死亡中Mcl-1表达的研究被引量：2
- 2011年
- 目的研究淋巴瘤细胞株的髓细胞白血病1(myeloid cell leukemia-1,Mcl-1)在ONO-AE-248刺激的中性粒细胞(polymorpho nuclear neutrophils,PMN)非凋亡程序化细胞死亡中的作用,为进一步确定这种新型细胞死亡模式提供线索。方法 Ficoll法新鲜分离健康志愿者外周静脉血中性粒细胞,与ONO-AE-248共同培养运用流式、RT-PCR和Western-bloting技术,对接受ONO-AE-248刺激的PMN的Mcl-1的表达进行检测。结果 ONO-AE-248刺激2 h时中性粒细胞Mcl-1 mRNA的表达明显上调,特异性抗Mcl-1单克隆抗体通过Western blotting技术检测发现其在凋亡组与非凋亡组的表达有明显差异性,表现为上升的趋势。结论 Mcl-1在ONO-AE-248诱导的非凋亡性程序化死亡中蛋白表达的上调可能是中性粒细胞凋亡和ONO-AE-248诱导的中性粒细胞非凋亡性程序化细胞死亡的关键性差异点。Mcl-1在ONO-AE-248诱导的非凋亡性程序化死亡和传统凋亡中发挥的调控作用可能是不相同的。
- 薛晓婕刘佳佳
- 关键词：中性粒细胞ONO-AE-248非凋亡性程序化细胞死亡凋亡
- 槲皮素对LPS延迟中性粒细胞自发性凋亡效应的抑制作用被引量：38
- 2005年
- 目的 :研究槲皮素对接受细菌脂多糖 (LPS)刺激的中性粒细胞 (PMN)自发性凋亡的影响 ,探讨槲皮素的抗炎作用机制。方法 :以人外周血PMN为研究对象 ,选择光镜和流式细胞术检测细胞凋亡情况 ,对裂解的片段化DNA进行定量 (二苯胺测定法 )和定性 (琼脂糖凝胶电泳 )分析。结果 :槲皮素 (1～ 10 0 μmol/L)对PMN的自发性凋亡率并无影响 ,但却能部分恢复由LPS所延迟的PMN自发性凋亡进程。当槲皮素的浓度为 4 0 μmol/L时 ,其恢复作用达到最大。 结论 :槲皮素对LPS延迟PMN自发性凋亡的效应产生了抑制作用 ,减轻了因预激因子活化PMN而加重的炎症反应 ,部分揭示了槲皮素的抗炎作用机制。
- 宋传旺刘佳佳段承刚谢华福甘淋刘晓燕何涛何延政
- 关键词：中性粒细胞凋亡槲皮素细菌脂多糖炎症
- 正常人同活动性SLE患者的PHA刺激T细胞对IL-2/IL-4/IL-6/PMA反应性的比较被引量：2
- 1992年
- 在PHA刺激下,IL-2/IL-4/IL-6诱发了正常人和活动性SLE患者的静止T细胞的增殖反应,而且两者的增殖反应的强度相同.然而,PHA联合PMA只能诱导正常人的静止T细胞发生增殖反应,对活动性SLE患者的静止T细胞却无作用。PMA是细胞内PKC的直接激活剂,由它提供的信号协同PHA提供的信号可以使T细胞活化增殖。因此,这些结果提示:活动性SLE患者在接受PHA刺激后其表达淋巴因子受体无异常,而在接受PMA提供的刺激信号方面有障碍,这可能与其细胞内PKC的活性化功能失调有关。
- 刘佳佳阪根刚恒松德五郎
- 关键词：PMASLE红斑狼疮
- 槲皮素对LPS诱导的中性粒细胞产生白介素6的影响被引量：31
- 2006年
- 目的研究离体培养的人中性粒细胞在被LPS激活的情况下,槲皮素对中性粒细胞产生IL-6的影响。方法运用ELISA法检测槲皮素对LPS诱导的中性粒细胞分泌IL-6的影响;运用流式细胞术检测槲皮素对LPS活化的中性粒细胞内IL-6的蛋白水平的影响;运用逆转录PCR(RT-PCR)技术检测槲皮素对LPS活化的中性粒细胞表达IL-6 mRNA的影响。结果在无刺激的情况下中性粒细胞不产生IL-6,LPS(1μg/mL)以时间依赖性的方式诱导中性粒细胞表达IL-6 mRNA,合成并分泌IL-6,并在16 h达到高峰。然而,预先用槲皮素(40μmol/L)处理中性粒细胞30 min后,LPS诱导的中性粒细胞表达IL-6 mRNA,合成并分泌IL-6则受到了抑制。结论IL-6是炎症早期重要的促炎症因子。因此,槲皮素抑制LPS诱导中性粒细胞产生IL-6,提示槲皮素可能通过对炎症因子负性调控而发挥其抗炎作用。
- 李昕刘佳佳何浩张姿段承刚谢华福何涛
- 关键词：槲皮素中性粒细胞白细胞介素6脂多糖
- 中性粒细胞自发性凋亡的研究概况被引量：11
- 2002年
- 中性粒细胞是血细胞中寿命最短的终末分化细胞 ,也是机体最主要的炎症细胞。同其它的血细胞和组织细胞在凋亡的发生机制上有所不同 ,中性粒细胞从分化成熟开始 ,就启动它的自发性凋亡程序 (spontaneousapoptosisprogram)。机体的炎症反应是一把双刃剑 ,在清除异物的同时也带来损伤。中性粒细胞这一最主要的炎症细胞则可以通过自发性凋亡的机制调控和减轻炎症损伤 ,构成炎症反应的主要收敛机制之一。中性粒细胞的自发性凋亡是一个受自身多基因调控和众多细胞因子及其它多种因素调节的复杂过程。
- 刘佳佳何涛宋传旺胡福泉
- 关键词：中性粒细胞自发性凋亡炎症
- 鼠NF～IL～6反义真核表达载体的构建和鉴定
- 2011年
- 目的构建包含鼠细胞转录因子白介素6（NF～IL6）反义基因的部分功能区的重组反义真核表达载体pcDNA3.0/NF～IL6,为进一步研究鼠巨噬细胞中NF～IL6的功能奠定基础。方法 Trizol试剂法提取体外分离培养的鼠巨噬细胞总RNA,经逆转录聚合酶链式反应（RT～PCR）扩增NF～IL6基因目的片段,PCR产物及真核表达载体pcD-NA3.0分别双酶切并进行连接,转化入大肠杆菌Ecoli Dh5α扩增后获得重组载体。结果 RT～PCR获得预期大小的特异性NF～IL6 DNA片段,经PCR、双酶切及测序分析证实已将鼠NF～IL6 cDNA片段正确的反向插入真核表达载体中。结论成功获得反义pcDNA3.0/NF～IL6重组质粒。
- 郑小莉谢晓东罗波梅志强刘佳佳
- 关键词：反义核酸巨噬细胞
- ONO-AE-248诱导中性粒细胞非凋亡性程序化死亡线粒体形态结构的变化被引量：2
- 2007年
- 目的:探讨线粒体形态结构的变化在ONO-AE-248诱导的中性粒细胞非凋亡性程序化死亡中的作用及意义。方法:Ficoll法分离健康志愿者外周静脉血中性粒细胞,与ONO-AE-248共同培养,透射电子显微镜观察线粒体形态结构的改变;流式细胞术检测线粒体膜势能的变化。结果:ONO-AE-248刺激6小时,中性粒细胞线粒体显著肿胀,嵴断裂,数目增多;ONO-AE-248早期迅速导致中性粒细胞线粒体膜势能的溃散。结论:线粒体变化是ONO-AE-248诱导中性粒细胞非凋亡性程序化死亡区别于凋亡的早期形态学特征事件之一。线粒体可能在ONO-AE-248诱导的中性粒细胞非凋亡性程序化细胞死亡中扮演更为关键性的角色。
- 羊建刘佳佳薛晓婕张姿何浩
- 关键词：线粒体中性粒细胞ONO-AE-248凋亡非凋亡性程序化细胞死亡
- 鼠Mincle蛋白B细胞抗原表位预测及多克隆抗体制备被引量：8
- 2011年
- 目的预测鼠Mincle蛋白的B细胞抗原表位及制备其多克隆抗体。方法以鼠Mincle蛋白氨基酸序列为基础,利用signalP3.0和TMHMM Server在线软件分析其信号肽和跨膜结构,利用DNAstar软件预测其二级结构、蛋白骨架区的柔韧性、亲水性、表面可能性及表面抗原性指数;融合表达PET30a(+)/Mincle蛋白并通过镍层析柱纯化后,免疫兔获得Mincle多克隆抗体。结果 Mincel蛋白是一种跨膜蛋白质,N末端第1-22号氨基酸可能位于蛋白的表面并可能为抗原表位;成功构建了重组载体PET30a(+)/Mincle,转化大肠杆菌BL21后表达包涵体融合蛋白,利用镍亲和层析得到了无生物活性的高纯度重组蛋白,纯化蛋白免疫兔,制备了滴度达1:128 000的多克隆抗体;Western-blot检测显示抗体特异性高。结论 Mincle蛋白N端即胞外区的第1-22氨基酸可作为Mincle蛋白的主要抗原表位区以制备Mincle多克隆抗体。
- 郑小莉张艺谢晓东罗波刘佳佳
- 关键词：B细胞抗原表位多克隆抗体
