目的研究丹参(salvia miltiorrhiza,SM)对庆大霉素(gentamicin,GM)耳中毒豚鼠耳蜗核因子-κ B(nuclear factor-kappa B,NF-κB)活性的影响,探讨SM对GM耳毒性损伤的防护作用及其分子机制。方法豚鼠随机分成正常对照组、GM组、GM+SM组和SM组,应用免疫组织化学SP法检测耳蜗组织中NF-κBP65和P50的活性;同时结合电生理指标听脑干反应(auditory brainstem response,ABR)测试,观察用药前后豚鼠听阈的变化。结果GM组ABR阈值比用药前明显提高,与正常对照组比较,差异有显著性,并且高于GM+SM组。各组NF-κ B P65阳性免疫反应仅见于耳蜗螺旋韧带,而其他部位均呈阴性。GM组、GM+SM组及SM组耳蜗P65阳性免疫反应的分布和正常对照组相同,反应活性与正常对照组比较差异无显著性。各组NF-κ B P50阳性免疫反应见于耳蜗螺旋神经节、神经纤维、螺旋韧带、血管纹、骨螺旋板缘及螺旋器。GM组耳蜗螺旋韧带和血管纹的NF-κ B P50活性较正常对照组明显增强;而同时给予SM的豚鼠,其耳蜗螺旋韧带和血管纹的NF-κ B P50活性较GM组则明显减弱。正常对照组和SM组耳蜗外毛细胞胞浆可见P50阳性染色,胞核则未见染色。给予GM后,耳蜗外毛细胞胞核可见P50阳性染色,而联合应用SM后,外毛细胞核染色消失,在阴性对照切片上未见NF-κ B P50阳性染色。通过直线相关检验证明豚鼠耳蜗螺旋韧带和血管纹NF-κ B P50免疫反应的平均灰度值和ABR阈值二者呈负相关。结论正常豚鼠耳蜗中有NF-κ B P65和P50的表达。注射GM后,NF-κB被诱导激活,进而造成听力损害。SM通过显著抑制GM所致NF-κB的高活性,从而有效拮抗GM的耳毒性,这可能是丹参发挥防护作用的分子机制之一。
目的探讨人参皂苷Rg1对脑缺血再灌注大鼠脑组织一氧化氮合酶(NOS)表达的影响。方法将30只大鼠随机分成假手术组、脑缺血再灌注组、Rg1-L组、Rg1-M组、Rg1-H组及尼莫地平组,每组5只。采用大鼠中动脉栓塞法制作大鼠脑缺血再灌注模型,观察大鼠再灌注后神经功能缺损情况,采用硝酸还原酶法和比色法检测大鼠血清中NO、神经型NOS(nNOS),诱导型NOS(iNOS)的含量,应用免疫组化和免疫印迹法检测脑缺血再灌注后nNOS、iNOS的表达。结果 (1)Rg1-L组、Rg1-M组、Rg1-H组大鼠的脑缺血后神经功能评分明显低于脑缺血再灌注组(2.40±0.55、1.80±0.84、1.60±0.89 vs 3.20±0.84,P<0.05)。(2)与脑缺血再灌注组相比,3个Rg1组大鼠血清中NO和iNOS含量降低,nNOS含量增高。(3)与脑缺血再灌注组相比,3个Rg1组大鼠脑组织中nNOS表达增高,iNOS表达降低。结论人参皂苷Rg1防治大鼠脑缺血再灌注损伤的机制可能与激活nNOS、抑制iNOS有关。
