吕文强
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 人源福氏志贺菌对鸡肠上皮原代细胞侵袭特性研究
- 前言志贺菌是肠杆菌科革兰氏阴性兼性厌氧菌,能引起人细菌性痢疾。许兰菊、王川庆等于2004年首次报道了鸡志贺菌病例,病死率可达3.84%～33.3%。研究发现,该鸡源志贺菌在生物学及血清学特性等方面与人源志贺菌完全相同,可...
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- 文献传递
- 雏鸡肠组织β1基因的鉴定及时空表达特性
- 2014年
- 设计1对引物，建立RT—PCR方法对β1基因mRNA进行鉴定；以GAPDH基因为内参，建立检测鸡β1基因表达水平的sYBRGreenI实时荧光定量PCR方法，并用此方法测定1～20日龄雏鸡不同肠段组织81基因表达水平。结果显示，从鸡肠组织成功鉴定出β1基因mRNA；检测内参基因GAPDH和目的基因β1的实时荧光定量PCR方法扩增效率一致（扩增曲线斜率差〈0．1），满足使用比较Ct值法对B1基因mRNA进行相对定量分析的前提；扩增曲线、熔解曲线及凝胶电泳结果提示该方法特异性好。实时荧光定量PCR检测结果表明，1日龄雏鸡十二指肠和盲肠、10日龄雏鸡空肠和直肠、5日龄雏鸡回肠组织中β1基因相对表达量最高。结果表明，鸡肠组织中存在β1基因表达，并在不同日龄不同肠段表达水平存在差异。
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- 关键词：雏鸡Β1基因实时荧光定量PCR
- 人源福氏志贺菌对鸡肠上皮原代细胞侵袭特性研究被引量：3
- 2013年
- 为研究人源福氏志贺菌对鸡肠上皮原代细胞侵袭力和侵袭特性,进一步验证人源志贺菌对鸡的致病性并建立体外研究模型,采用Hela细胞庆大霉素保护试验和免疫组织化学染色检测分离的人源福氏志贺菌ZD02株的毒力。然后采用细胞免疫组织化学染色研究ZD02株对鸡肠上皮细胞的侵袭力和相关侵袭特性。人源福氏志贺菌ZD02株能够侵入Hela细胞,庆大霉素保护试验结果显示,感染后30、60、90、120min时ZD02株侵袭率分别为1.43%、2.43%、2.56%、2.62%,证明ZD02株具有毒力。ZD02株侵袭鸡肠上皮原代细胞免疫组织化学检测结果显示,ZD02株能侵入鸡肠上皮细胞,感染后1、2、3、4h时ZD02株侵袭率分别为1.7%、6.2%、8.0%、11.2%。鸡肠上皮原代细胞经EGTA处理后,ZD02株侵袭率显著提高。人源福氏志贺菌ZD02株对鸡肠上皮细胞具有侵袭力,且从肠上皮细胞基底侧部侵袭。本研究进一步验证了志贺菌人禽互传的可能性,鸡肠上皮原代细胞可作为研究志贺菌致病机理的体外模型。
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- 雏鸡肠组织中CD44的鉴定及时空表达特性
- 2013年
- 为了解CD44分子在雏鸡肠组织内的表达及其时空表达特性,设计1对引物,建立RT-PCR方法对CD44mRNA进行鉴定;以GAPDH基因为内参,建立检测鸡CD44基因表达水平的SYBR GreenⅠ实时荧光定量(Q-PCR)方法,对1～28日龄商品鸡肠组织不同部位中CD44mRNA表达水平进行检测。结果显示,从鸡肠组织中成功鉴定出CD44mRNA,建立的荧光定量方法能特异性检测到CD44mRNA,CD44和GAPDH基因的扩增效率分别为95%和101%,线性范围均在108～104拷贝/μL,敏感度高,最低检测限分别为45和77个拷贝。建立的CD44SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法具有特异、灵敏、快速、重复性好等优点。雏鸡不同日龄,不同肠组织中CD44表达水平有所差异,5～20日龄时的空肠组织和5～10日龄时的直肠组织中CD44表达量较高。
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- 关键词：雏鸡CD44荧光定量PCR
