宋琳琳
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：上海交通大学附属第六人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胞质转导肽-HBcAg18-27-Tapasin通过激活PI3K/Akt通路抑制HBV转基因小鼠特异性CTL凋亡
- 2014年
- 目的探讨胞质转导肽(CTP)-HBcAg18-27-Tapasin融合蛋白通过激活PI3K/Akt信号通路抑制HBV转基因小鼠特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T cell,CTL)凋亡。方法 HBV转基因小鼠随机分组,100μg CTP-HBcAg18-27-Tapasin、50μg CTPHBcAg18-27-Tapasin、50μg CTP-HBcAg18-27及生理盐水组经肌肉免疫小鼠,每周一次,共3次。流式细胞仪检测脾细胞中胞内细胞因子水平及细胞凋亡率,Western blotting检测凋亡相关蛋白PI3K、P-Akt及P-mTOR表达的变化。结果 100μg CTP-HBcAg18-27-Tapasin融合蛋白免疫转基因小鼠后,能有效上调特异性CTL数量(2.74±0.20)%,高于对照组50μg CTP-HBcAg-18-27-Tapasin(2.42±0.53)%及50μg CTP-HBcAg18-27(1.70±0.56)%和空白组(0.66±0.71)%(F=741.45,P=0.000);同时,100μg CTPHBcAg18-27-Tapasin融合蛋白有效抑制特异性CTL凋亡(6.29±0.02)%,低于对照组50μg CTP-HBcAg18-27-Tapasin(7.72±0.15)%及50μg CTP-HBcAg18-27(26.30±1.13)%和空白组(58.26±0.23)%(F=5313,P=0.000),并伴随凋亡相关蛋白PI3K、P-Akt及P-mTOR上调(F=52.61、18.32和94.18,P<0.05)。结论 CTP-HBcAg18-27-Tapasin能有效诱导HBV转基因小鼠特异性CTL的表达,抑制其凋亡,机制与PI3K/Akt通路的激活有关。
- 唐余燕陈小华卓萌宋琳琳汤正好臧国庆余永胜
- 关键词：P13K凋亡
- 泛素化及自噬参与蛋白降解及抗原提呈的研究进展
- 2014年
- 细胞内所有的蛋白质都在不断的被降解，并被新合成的蛋白质所取代。真核细胞内主要有两条蛋白降解途径，分别为泛素一蛋白酶体系统途径和白噬途径，两条途径都在维持细胞内稳态方面起着重要的作用。泛素-蛋白酶体系统是由泛素介导的一种高度复杂的蛋白降解机制，它通过一种特定的方式降解并再循环利用细胞内的蛋白，而自噬是一种自我降解过程，它通过溶酶体介导的方式降解蛋白。被降解的蛋白可以被提呈至MHCⅡ类分子或MHCⅠ类分子，从而激发有效的T细胞反应。此文就这两个途径参与蛋白降解及抗原提呈的相关研究进展进行综述。
- 宋琳琳汤正好臧国庆
- 关键词：自噬泛素-蛋白酶体系统蛋白质降解抗原提呈
- CTP-Ub-HBcAg原核表达载体的构建及其表达被引量：1
- 2014年
- 目的构建CTP-Ub-HBcAg原核表达载体并诱导和鉴定其融合蛋白的表达。方法以质粒pcDNA3.1(-)-Ub-HBcAg中的Ub-HBcAg融合基因为模板设计引物,上游引物带有CTP基因序列,进行PCR扩增,PCR产物克隆到原核表达质粒pMAL-c2x中,菌落PCR阳性克隆测序鉴定,鉴定正确的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达,并进一步通过直链淀粉树脂亲和层析法纯化融合蛋白,Western blotting鉴定。结果 PCR扩增得到820 bp大小的条带,为CTP-Ub-HBcAg融合序列。该序列被克隆至表达质粒pMAL-c2x中,阳性克隆菌落测序正确,并在DE3中获得诱导表达。Western blotting鉴定为70 KD的CTP-Ub-HBcA融合蛋白。结论构建CTP-Ub-HBcAg原核表达载体并成功表达,为进一步研究该融合蛋白的功能提供了实验基础。
- 宋琳琳卓萌唐余燕陈小华余永胜汤正好臧国庆
- 关键词：CTPHBCAG融合蛋白
