宿晓云
- 作品数：46 被引量：47H指数：5
- 供职机构：吉林大学药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 重组人抗乙肝免疫球蛋白的基因筛选及表达
- 以抗-HBs抗体阳性个体为对象克隆轻链和重链可变区基因,将其重组至表达载体pPICZαCh和pPICZαCκ,转化X33酵母菌,甲醇诱导表达后进行ELISA筛选及免疫印迹分析,获得了具HBs抗原结合活性的完整轻重链抗体。
- 宿晓云王毅周余来王芳马杰
- 关键词：乙肝免疫球蛋白毕氏酵母
- 文献传递
- 应用毕赤酵母分泌表达筛选人抗狂犬病毒抗体scFv-Fc被引量：5
- 2007年
- 目的:利用毕赤酵母人抗狂犬病毒抗体分泌表达文库获得具特异性狂犬病毒抗原结合活性的分泌型小分子抗体(scFv-Fc)。方法:RT-PCR方法扩增获得一组轻链和重链可变区基因。利用重叠延伸PCR方法组装scFv基因后克隆入毕赤酵母scFv-Fc抗体库通用表达质粒pPICZα/Fc后,电转化X33酵母菌,甲醇诱导表达后进行ELISA筛选、基因序列分析及免疫印迹分析。结果:构建了抗狂犬病毒毕赤酵母分泌型scFv-Fc库,获得了12株阳性菌株。对其中2株阳性克隆进行了序列分析证实为新的抗体可变区基因。ELISA、Western blotting分析,证实该scFv-Fc具有特异性狂犬病毒抗原结合活性,相对分子质量为56 000。结论:通过毕赤酵母人抗狂犬病毒抗体scFv-Fc分泌表达文库筛选获得具较高亲和力的新scFv-Fc抗体。
- 王丁丁许天敏余丽江苏曼曼黄树林宿晓云陈磊颜炜群
- 关键词：毕赤酵母狂犬病病毒分泌表达
- 拼接法构建人分泌型Klotho真核表达载体
- 采用PCR法自人DNA文库中分别克隆人分泌型klotho (hskl)基因的三个外显子序列,依次构建载体pBS-hsklex1、 pBS-hsklex(1+2)、克隆载体pBS-hskl。经核酸测序确证后,用PCR法自克...
- 焦平马杰周余来王毅宿晓云
- 关键词：真核表达载体基因克隆
- 文献传递
- 一种人源抗乙肝病毒表面抗体及其制备方法和应用
- 本发明涉及一种人源抗乙肝病毒表面抗体及其制备方法和应用。本发明通过抗原抗体结合活性筛选获得对乙肝病毒抗原有较高亲和活性的特异乙肝抗体，所述抗体轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.1或SEQ ID No.2所示，其...
- 宿晓云
- 基于转录组学的中药药理机制分析方法及其在金花清感颗粒药理机制研究的应用
- 2022年
- 目的:结合高通量转录组测序技术提出一种中药药理机制分析方法,并以金花清感颗粒为例探究其发挥药效作用的关键机制。方法:对中药作用于细胞系进行高通量转录组测序,获得中药作用转录组表达谱;设计一种基于基因共表达网络的生物信息学分析技术,即依次进行差异表达基因的识别、药效作用相似化合物的筛选、基因共表达网络的构建、基因模块的识别、GO富集分析、蛋白互作网络的构建、HUB基因的识别、HUB基因的验证。利用以上方法分析金花清感颗粒的药理机制。结果和结论:通过该方法发现金花清感颗粒对于新冠肺炎(COVID-19)患者具有治疗作用,且对病毒感染后血小板脱颗粒、血液高凝状态引起的多器官氧化应激损伤具有潜在的治疗修复作用,为进一步阐明金花清感颗粒的作用提供了证据。该方法适用于大多数中药药理机制的分析,为中医药现代化研究提供了方法学支撑。
- 李沐李一平宿晓云宿晓云许彤
- 关键词：中药现代化转录组学
- 人参皂苷Rh3对人结肠癌细胞增殖与凋亡的影响被引量：9
- 2010年
- 目的探讨人参皂苷Rh3对人结肠癌细胞SW480增殖与凋亡的影响。方法体外培养的人结肠癌细胞SW480分别用无血清培养液稀释的终浓度为15、30、60、120和240μg/ml的人参皂苷Rh3作用24、48及72h,应用四甲基偶氮唑盐比色法检测细胞增殖;采用终浓度为15μg/ml的人参皂甙Rh3作用于SW480细胞24及72h,应用原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡,采用终浓度为15、20μg/ml的人参皂甙Rh3作用于SW480细胞24及72h;应用丫啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双染法计算细胞凋亡率和坏死率。结果 15μg/ml人参皂苷Rh3作用48h即可明显抑制SW480细胞增殖,其作用随剂量增加和作用时间延长而增强,30μg/ml人参皂苷Rh3作用72h抑制率超过80%;15μg/ml人参皂苷Rh3作用24h部分细胞凋亡,胞浆呈棕色,作用72h凋亡细胞增多;15μg/ml人参皂苷Rh3作用24h细胞凋亡率为25.5%,20μg/ml人参皂苷Rh3作用24h细胞凋亡率为31%,未见细胞坏死,15μg/ml人参皂苷Rh3作用72h细胞凋亡率为55%、坏死率为7%,20μg/ml人参皂苷Rh3作用72h细胞凋亡率为67.5%、坏死率为7%。结论人参皂苷Rh3能抑制人结肠癌细胞SW480增殖,诱导其凋亡,作用呈剂量依赖性和时间依赖性。
- 丛中一林双甡丛登立宿晓云王毅周余来
- 关键词：结肠癌细胞凋亡
- 拼接法构建人分泌型Klotho真核表达载体
- 焦平马杰周余来王毅宿晓云
- 关键词：外显子
- 新生大鼠脊髓源性神经干细胞的分离培养及分化鉴定被引量：3
- 2009年
- 目的:探讨分离、培养新生大鼠脊髓源性神经干细胞的方法并对其进行分化鉴定,为临床应用脊髓神经干细胞进行周围神经系统疾病的替代治疗奠定细胞学基础。方法:首次采用注射器灌注法分离新生24hWistar大鼠脊髓源性神经干细胞,神经细胞培养液调节细胞终浓度并进行培养,形成克隆后,传代。将传至第1代培养细胞加入含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基诱导其分化。形态学方法观察细胞的生长状态,利用鼠抗Nestin抗体、鼠抗GFAP抗体、鼠抗MAP-2抗体进行分化的神经干细胞免疫组织化学鉴定。结果:新生大鼠脊髓源性神经干细胞可在体外培养条件下贴壁生长,在血清的作用下可分化为具有典型神经细胞形态、表达特异性组织蛋白Nestin、GFAP、MAP-2的神经细胞。结论:大鼠脊髓内可分离出脊髓源性神经干细胞,呈贴壁增殖状态,并有分化能力。
- 张殿君刘一付长峰宿晓云王芳李相军
- 关键词：脊髓源性神经干细胞细胞培养细胞分化
- 重组人抗乙型肝炎病毒表面抗体的筛选及序列分析
- 2008年
- 目的克隆、筛选人抗乙型肝炎病毒表面抗体(抗-HBs),并对其基因序列进行分析。方法从抗-HBs抗体阳性血液中分离淋巴细胞,提取总RNA,合成cDNA,以此为模板,PCR扩增轻链和重链抗体可变区基因;应用已构建的抗体支架载体,构建重组表达载体,转化毕赤酵母X33,建立相应的酵母表达文库;甲醇诱导表达,Westernblot及ELISA筛选抗-HBs抗体阳性菌株;PCR扩增DNA片段,进行测序及Blastn比对,并与已发表的抗-HBs抗体序列进行同源性分析。结果重链及轻链抗体重组表达载体经双酶切鉴定,证明构建正确;经Westernblot及ELISA筛选,获得了具有HBsAg结合活性的完整轻重链抗体;轻链可变区与已发表序列核苷酸同源性为93%,而氨基酸同源性仅为88%,尤其CDR3变异较大;重链可变区与已发表序列同源性较低,CDR3区基因长度及序列均有较大差别。结论应用毕赤酵母表达体系筛选,获得了新的抗-HBs抗体。
- 宿晓云王毅王芳石毅周余来王秀娟颜炜群
- 关键词：重链轻链毕赤酵母
- 前列腺酸性磷酸酶在上皮组织肿瘤中的表达
- 目的：探讨前列腺相关抗原一前列腺酸性磷酸酶(PAP)在非前列腺癌中的表达水平。<br> 方法：分别用RT-PCR方法和Western blot方法检测多种腺癌细胞系中PAP mRNA和PAP蛋白的表达水平；...
- 王毅宿晓云石毅赵宏宇王研王阳颜炜群
- 关键词：前列腺癌酸性磷酸酶上皮组织肿瘤免疫组织化学
