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红外-核磁共振光谱-免疫亲和柱法解析梨孢镰孢菌代谢产物成分: 2012年; 利用红外光谱,核磁共振光谱结合免疫亲和柱的方法解析梨孢镰孢菌代谢产物成分,为真菌代谢产物的分析提供新的信息。将F.poae菌株在GYM培养基上25℃条件下培养12 h后转至8℃培养12 h,交替进行4周,将其代谢产物分离纯化、结晶,80℃干燥后用红外光谱仪分析产物结构,然后利用免疫亲和柱特异性,比较产物经T-2免疫亲和柱纯化前后的1H核磁谱图。由红外谱图可判断目标组分存在与单端孢霉烯族毒素相同的特征官能团,初步判定产物为单端孢霉烯族毒素。通过1H核磁谱图比较T-2免疫亲和柱纯化前后物质结构一致。梨孢镰孢菌代谢产物成分为T-2毒素。红外-核磁共振光谱结合免疫亲和柱的方法解析梨孢镰孢菌代谢产物的方法在国内外尚未见报道。; 施琦王雅玲孙力军代喆徐德峰王远征胡红林; 关键词：T-2毒素红外光谱核磁共振光谱

高效液相色谱-串联质谱法测定3种水产品中的T-2毒素与HT-2毒素被引量：8: 2016年; 建立高效液相色谱-串联质谱定量快速检测罗非鱼、南美白对虾和黄金贝中的T-2毒素与HT-2毒素方法。以10 mL乙酸乙酯作为提取溶剂,振荡提取,无水硫酸钠除水,定量移取5 mL提取液氮气吹干后用1 mL含有0.1%甲酸的甲醇-5 mmol/L乙酸铵溶液（3∶7,V/V）复溶,正己烷脱脂净化,基质匹配法外标定量。3种水产品中T-2毒素和HT-2毒素的检出限分别为2μg/kg和4μg/kg。T-2毒素质量浓度为2～100 ng/mL,HT-2毒素质量浓度为4～200 ng/mL,范围内线性良好。在3种样本中进行3个水平添加实验（n=6）,T-2毒素回收率为84.3%～109.9%,HT-2毒素的回收率为90.9%～103.2%。T-2毒素的相对标准偏差为2.0%～8.7%,HT-2毒素的相对标准偏差为2.6%～10.6%。本方法简便快速、准确度好、精密度高,适用于3种代表性水产品中T-2与HT-2毒素的同时检测。; 王小博施琦王雅玲廖建萌刘阳吴移山高平励建荣; 关键词：T-2毒素高效液相色谱-串联质谱

利用Fusarium poae制备T-2毒素的培养条件和提取方法被引量：6: 2011年; 比较2种不同优化方法对分离纯化梨孢镰孢菌(Fusarium poae)产生的T-2毒素的效果,并得到高纯度的T-2毒素,解决国内T-2毒素产业化问题。在优化Fusarium poae产毒培养条件的基础上,对Burmeister的提取方法和Gregory培养基进一步优化以最大限度地提高T-2毒素的产率,从而得到高纯度并且高产率的T-2毒素。目标菌株最适产毒培养基成分:NH4H2PO4 1 g,KCl 0.2 g,MgSO4.7H2O 0.2 g,葡萄糖10 g,酵母膏5g,CuSO4.5H2 O 0.005 g,ZnSO4.7H2 O 0.01 g,H2 O 1 000 mL。最佳产毒培养条件为8～25℃间隔12 h变温、前期光照后期黑暗、前期振荡后期静止的培养条件下培养28 d。在这种条件下可提高T-2毒素的产率达5倍。用丙酮氯仿进行分离,免疫亲和柱进行纯化得到高纯的T-2毒素。优化后的Burmeister提取方法提高了T-2毒素的产率。; 代喆王雅玲孙力军施琦徐德峰王远征胡红林欧阳毅吕国忠; 关键词：T-2毒素镰孢菌

T-2毒素对不同生长期对虾的急性毒性及其分析方法的比较研究被引量：3: 2016年; 比较T-2毒素对不同生长期凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的急性毒性及其分析方法,明确对虾作为T-2毒素毒性评价的生物标记物的最佳时期,建立T-2毒素对对虾的急性毒性互补评价方法。通过对不同生长期凡纳滨对虾的急性毒性试验,采用寇氏法和概率单位法,计算得到T-2毒素对不同生长期凡纳滨对虾的LD_(50),并通过u检验对两种方法求得的LD_(50)值进行分析比较。结果得到T-2毒素对虾卵、幼虾和成虾的LD_(50)值分别为2.33、1.79和3.34 mg/kg·bw,且经检验两种方法求得的LD_(50)并无显著性差异。研究表明,T-2毒素对成虾的毒害作用最小急性毒性最弱,对幼虾的毒害作用最大急性毒性最强,即该生长期的凡纳滨对虾更适宜做评价T-2毒素急性毒性的生物标志物,同时采用寇氏法和概率单位法相结合的方法得到的LD_(50)值更具准确。; 施琦王小博王雅玲莫冰邱妹孙力军徐德峰励建荣; 关键词：LD50 T-2毒素急性毒性生物标志物

对虾中T-2毒素的蓄积规律: 目的：按定期递增量法进行机体耐受性和蓄积性研究,通过蓄积系数K来评价蓄积作用强弱,并判断对虾在小剂量长期染毒情况下是否出现对T-2毒素的耐受性.方法：设定染毒剂量组和方法,采用LC/MS/MS检测目标毒素在凡纳滨对虾血液...; 王雅玲施琦孙力军徐德峰廖建萌励建荣; 关键词：T-2毒素凡纳滨对虾蓄积毒性

T-2毒素的自然发生与降解及其在对虾中的蓄积规律: 产T-2毒素镰孢菌广泛存在于自然环境中，并威胁着水产养殖业的健康。凡纳滨对虾为我国南方沿海城市湛江的主要养殖水产品之一，考察T-2毒素在对虾养殖环境中的发生情况及其在对虾体内的蓄积毒性不仅仅是对虾养殖业的迫切需求，更是保...; 施琦; 关键词：自然发生对虾 T-2毒素; 文献传递

纳豆菌脂肽对分离于对虾养殖环境中产T-2毒素镰孢菌抑制效应的研究被引量：4: 2013年; 为了探明纳豆菌脂肽对对虾养殖环境中的产T-2毒素镰孢菌分离株的控制效应,实验采用扫描电镜观察了镰孢菌孢子超微结构、普通显微镜观察了菌丝形态、荧光显微镜观察了菌丝通透性。结果显示,脂肽浓度为1 mg/mL时,脂肽对镰孢菌孢子萌发的抑制率达78.8%,镰孢菌培养到第3天的生物量为不加脂肽对照的24.5%。扫描电镜观察结果表明,1 mg/mL的脂肽可以使镰孢菌的孢子呈念珠状;普通显微镜观察结果显示,1 mg/mL脂肽处理能使菌丝隔膜消失;荧光显微镜观察结果表明,脂肽能增加镰孢菌菌丝细胞膜的通透性。; 刘唤明王雅玲孙力军徐徳峰施琦廖建萌励建荣; 关键词：镰孢菌纳豆菌脂肽抑菌

自然环境中T-2毒素降解菌的筛选与鉴定被引量：6: 2013年; 【目的】在自然环境中筛选和鉴定能够降解T-2毒素的菌株。【方法】取对虾养殖池水样、养殖池沉泥样品和对虾混合饲料中分离到的镰孢菌,于GYM产毒培养基中培养14 d后引入自然条件下气载细菌,继续培养至28 d,采用LC-MS/MS检测其中T-2毒素含量。然后结合稀释涂布、平板划线、革兰氏染色、镜检,从镰孢菌产毒培养液中毒素含量明显降低的菌悬液中筛选出T-2毒素降解菌,用16S rRNA分析方法对其进行系统发育分析及菌种鉴定,并验证两菌株的降毒能力与不同基质中二者的联合降毒能力。【结果】以从对虾养殖环境中分离到的5株镰孢菌作为试验菌种,在其产毒培养过程中分离到2株T-2毒素降解菌,16S rRNA鉴定结果分别为弯曲假单胞菌和尼泊尔葡萄球菌,对T-2毒素的降解率分别为90.9%和85.5%,但两者降毒能力并无显著差异(P>0.05);其联合作用也有较好降毒效果,与两菌株单独作用无显著差异(P>0.05),不同基质对其联合降毒作用影响不大(P>0.05)。【结论】新的T-2毒素降解菌的发现为进一步探明T-2毒素降解基因和开发T-2毒素生物降解酶提供了研究基础。; 施琦王雅玲孙力军代喆孙颖峰廖建萌陈宏励建荣; 关键词：T-2毒素镰孢菌降解菌

对虾T-2毒素微胶囊毒饵料的制备和效果评价被引量：6: 2013年; T-2毒素微胶囊是制备虾毒饵料研究该毒素在对虾食品链中传递规律的前提技术,从T-2毒素微胶囊毒饵料的性状、包埋率及对虾利用率3个方面对其进行评价。采用微胶囊技术,以复合蛋白制剂为壁材,20 ng T-2毒素和对虾饲料为混合芯材,采用均质和物理加热法使复合蛋白制剂包裹混合心材,再用恒温干燥法使其硬化,形成颗粒状对虾T-2毒素微胶囊毒饵料,建立了T-2毒素微胶囊毒饵料的制备工艺。采用LC-MS/MS技术检测T-2毒素,普通毒饵料、微胶囊毒饵料抽提水样中T-2的毒素含量分别为2.661、0.654 ng/mL,微胶囊毒饵料的包埋率达96.73%,其利用率是普通毒饵料的1.7倍。研究表明T-2毒素微胶囊毒饵料可以解决对虾口服难溶于水的T-2毒素的问题,并提高了T-2毒素的利用率,为研究T-2毒素对对虾的作用提供技术支撑。; 代喆王雅玲孙力军施琦廖建萌徐德峰陈进军聂芳红; 关键词：微胶囊 T-2毒素包埋率

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施琦

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