洪小平
- 作品数：10 被引量：62H指数：6
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 皮质酮对原代培养的海马神经元及其Ca^(2+)/CaMKII的影响被引量：6
- 2005年
- 在培养液中加入 10 7、10 6和 10 5浓度(mol/L)的皮质酮,采用MTT染色测定、Fura 2 /AM的荧光标记以及Western印迹的方法,观察了不同浓度的皮质酮作用下海马神经元形态学和细胞存活率的变化以及胞浆内游离钙离子浓度 [Ca2+ ]i和CaMKII表达的变化规律, 探讨其对原代培养的大鼠海马神经元及其Ca2+ /CaMKII的影响和可能的机制。结果发现: 10 6、10 5浓度的皮质酮对海马神经元的形态学影响较大,与对照组比较,细胞存活率明显降低; [Ca2+ ]i分别为 113. 1022±16. 9716、155.3794±20. 7727;CaMKII的表达也明显减少;三者的变化均显著 (P<0. 01 ),而 10 7浓度的皮质酮对上述指标影响不大 (P>0.05)。此外,相关性分析表明: [Ca2+ ]i和CaMKII的表达呈现负相关(P<0. 05)。以上结果提示,皮质酮对大鼠海马神经元的作用存在浓度依赖效应,浓度越高,对大鼠海马神经元的损伤越大,同时也验证了皮质酮是啮齿类动物的主要的应激激素。
- 孙臣友刘能保李宏莲张敏海刘少纯刘向前程少容李晓恒洪小平李辉
- 关键词：皮质酮CA^2+海马神经元原代培养啮齿类动物
- 慢性给予应激水平的糖皮质激素对海马神经元和突触的影响被引量：6
- 2005年
- 为探讨慢性给予应激水平糖皮质激素对大鼠海马的影响,在实验组大鼠饮用水中加入皮质醇,使动物皮质醇吸收量达每日10mg/kg,从而引起与应激动物相同的皮质醇水平,共21d,然后用免疫组织化学和免疫印迹法观察海马内caspase-3、synap-tophysin(Syn)和neurogranin(Ng)表达的变化。结果显示:(1)实验组大鼠海马结构中可见较多细胞出现核固缩的病理改变,但未见或偶见极个别caspase-3免疫反应阳性细胞;(2)与正常组Syn表达水平(1.2197±0.3443)和Ng表达水平(1.9330±0.3450)相比,实验组大鼠海马结构中Syn和Ng的表达明显减少(P<0.05),其表达水平分别为0.5512±0.0540和1.3375±0.3317。上述结果表明慢性给予应激水平的糖皮质激素可损伤海马功能,引起不依赖caspase-3的海马神经细胞退变、使海马突触数量减少以及改变海马突触效能可能是其作用的部分机制。
- 刘向前刘能保张敏海李晓恒洪小平
- 关键词：糖皮质激素SYNAPTOPHYSINNEUROGRANIN海马
- 细胞免疫缺陷与认知衰老的关系研究
- 2006年
- 目的 探讨细胞免疫缺陷与认知衰老的关系及其可能的作用机制.方法 随机选取相同周龄（22～24周龄）的细胞免疫缺陷小鼠（Balb/c-nu/nu裸鼠）和正常小鼠（Balb/c）各6只,用Western blot法分析海马突触体素（Synaptophysin,Syn）表达水平和ELISA法检测海马促炎细胞因子IFN-γ、TNF-α含量.结果 细胞免疫缺陷小鼠海马Syn表达水平显著低于正常小鼠（P＜0.05）,并伴有IFN-γ水平显著增高（P＜0.01）.结论 细胞免疫缺陷加速认知衰老过程,其机制可能与其所致的海马突触数量减少和IFN-γ增高有关.
- 刘向前刘能保张敏海李晓恒洪小平
- 关键词：细胞免疫衰老海马突触体素细胞因子
- 慢性复合应激对大鼠学习和记忆功能及海马内PKA-C_β表达的影响被引量：12
- 2005年
- 目的研究慢性复合应激对成年雄性大鼠学习记忆功能和海马内蛋白激酶A(PKACβ)表达的影响。方法将成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组和应激组,应激组动物每天交替暴露于复合应激原中达6周,并测定应激第3周和第6周时两组动物的血清皮质酮水平。应激结束后,用Morris水迷宫和Y迷宫测试大鼠空间学习记忆成绩,并采用免疫组织化学方法分析海马各亚区PKACβ的表达。结果应激组大鼠的血清皮质酮水平在第3周明显高于对照组,但在第6周两组差别不明显。在Morris水迷宫测试中,应激组动物寻找隐蔽平台的潜伏期明显短于对照组;Y迷宫测试中,应激组动物寻找安全区的正确率也显著高于对照组。应激组大鼠的海马CA1和CA3区PKACβ的表达水平较对照组明显上调,而齿状回(DG)内PKACβ的表达在两组中无明显差别。结论慢性复合应激可增强大鼠海马依赖的学习记忆能力,PKA可能参与了其增强机制。
- 洪小平刘能保张敏海李晓恒王西明刘少纯刘向前孙臣友关中晖
- 关键词：慢性复合应激蛋白激酶A皮质酮海马
- 慢性复合应激增强大鼠海马Doublecortin的表达被引量：6
- 2007年
- 目的探讨慢性复合应激性学习记忆增强大鼠海马齿状回(DG)新生神经元数量变化以及Doublecortin(DCX)在海马组织中表达的变化及其意义。方法成年雄性大鼠随机分为复合应激组和正常对照组。复合应激组动物每天交替暴露于复合应激原中达6周。实验结束后,所有动物分别进行3d的Morris水迷宫测试,记录其学习和记忆成绩。运用免疫细胞化学方法观察海马DG新生神经元数量的变化,同时运用Westernblotting和RT-PCR技术分别检测DCX在海马的表达及其mRNA水平的变化。结果与对照组相比,复合应激组动物的学习与记忆成绩优于对照组(P<0.05);其海马DG新生神经元数明显增多(P<0.05);海马DCX蛋白的表达明显增加(P<0.05);海马DCX mRNA水平明显上调(P<0.05)。结论慢性复合应激致大鼠的学习与记忆能力增强,海马DG内DCX阳性细胞数增多,提示新生神经元数量增加是导致大鼠学习记忆能力增强的原因之一。
- 周艳玲刘能保张敏海李晓恒陈鸿伟洪小平孙臣友
- 关键词：慢性复合应激海马DOUBLECORTIN免疫细胞化学免疫印迹RT-PCR
- 皮质酮对原代培养海马神经元的毒性作用及NMDA受体亚基表达的改变被引量：9
- 2005年
- 目的研究皮质酮对大鼠海马神经元的毒性作用及NMDA受体亚基表达的影响。方法以体外原代培养的大鼠海马神经元为研究对象,根据影响因素,即给予的不同浓度皮质酮和其它因素分为8个组对照组、10-7mol/L皮质酮组(简称10-7组)、10-6mol/L皮质酮组(简称10-6组)、10-5mol/L皮质酮组(简称10-5组)、10-6+高糖组、10-5+高糖组、10-6mol/L+MK801组和10-5mol/L+MK801组,镜下观察不同浓度皮质酮作用下海马神经元形态学的变化,并采用MTT方法测量各组细胞存活率,利用免疫细胞化学结合图象分析对原代培养海马神经元NMDA受体亚基的表达进行观察。结果10-6、10-5浓度的皮质酮对海马神经元影响较大,细胞存活率较对照组明显降低,但10-6+高糖组、10-5mol/L+高糖组、10-6mol/L+MK801及10-5mol/L+MK8014个组,分别与相同皮质酮浓度处理组比较,细胞存活率显著提高。10-6和10-5组海马神经元上NMDA受体亚基表达较对照组明显降低。10-7mol/L浓度的皮质酮对上述指标影响不大。结论过量的皮质酮对大鼠海马神经元具有损伤作用,NMDA受体参与了此过程,NMDA受体拮抗剂和高浓度葡萄糖可保护海马神经元。
- 张敏海程少容刘能保孙臣友李辉李晓恒洪小平
- 关键词：皮质酮原代培养神经元海马NMDA受体
- 慢性复合应激性增强空间学习与记忆时突触素Ⅰ在大鼠海马中的表达被引量：5
- 2004年
- 目的 观察突触素Ⅰ在慢性复合应激性空间学习与记忆增强大鼠海马各亚区表达的变化及其意义。方法 成年雄性Wistar大鼠随机分成应激组和对照组。采用垂直旋转、剥夺睡眠、噪音刺激和夜间光照 4种应激原无规律交替应激动物 6周 ,每天 6h ,制作慢性复合应激动物模型。采用Morris水迷宫和Y 迷宫测试大鼠空间学习与记忆成绩 ,并用免疫组织化学技术显示突触素Ⅰ在慢性复合应激性空间学习与记忆增强大鼠海马中的表达变化。结果 结果显示 ,应激组动物慢性复合应激后在Morris水迷宫内寻找隐蔽平台所需时间 (潜伏期 )比对照组的明显地短 (P <0 0 5 ) ,在Y 迷宫内寻找安全区的正确率比对照组的明显地高 (P <0 0 5 ) ;应激组动物慢性复合应激后 ,其海马齿状回 (dentategyrus ,DG)和CA3区突触素I的免疫反应性明显地强于对照组 (P <0 0 5 ) ,两组CA1区突触素I的免疫反应性无明显差别 (P >0 0 5 )。结论 这些结果提示 ,慢性复合应激可增强大鼠空间学习与记忆能力 ,突触素Ⅰ在大鼠海马内表达的变化可能参与了大鼠空间学习与记忆增强的机制。
- 李晓恒刘能保洪小平张敏海刘向前刘少纯
- 关键词：慢性复合应激记忆海马
- 慢性复合应激对大鼠学习和记忆功能及齿状回神经前体细胞增殖的影响被引量：6
- 2006年
- 为研究慢性复合应激对成年雄性大鼠学习和记忆功能及齿状回(DG)神经前体细胞增殖的影响,将成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组和应激组,应激组动物每天交替暴露于复合应激原中,持续6周。应激结束后,用Morris水迷宫测试大鼠空间学习记忆成绩。同时,采用BrdU标记分裂细胞方法,观察比较各组大鼠DG内BrdU阳性细胞数的变化和差异。结果显示:应激组动物的学习与记忆成绩均优于对照组(P<0.05);与对照组相比,应激组大鼠DG内BrdU阳性细胞数量显著增加(P<0.05)。上述结果表明:慢性复合应激导致大鼠的学习与记忆能力加强,DG内BrdU阳性细胞增多,提示神经细胞数量增加可能是应激所引起的大鼠学习记忆能力增强的原因之一。
- 周艳玲刘能保张敏海李晓恒陈鸿伟洪小平孙臣友
- 关键词：慢性复合应激神经前体细胞齿状回
- 慢性复合应激性学习记忆增强大鼠海马神经细胞增殖和突触后酪氨酸激酶表达的变化被引量：16
- 2005年
- 目的探讨慢性复合应激性学习记忆增强大鼠海马结构各亚区神经细胞数量变化,以及突触后致密物酪氨酸激酶(Fyn)在海马内表达的变化及其意义。方法39只大鼠随机分为复合应激组、单一应激对照组和正常对照组。复合应激组动物进行6周的垂直旋转、睡眠剥夺、捆绑(6 h/d)和夜间光照等慢性复合性应激实验;单一应激对照组进行6周的单一捆绑对照,6 h/d。实验结束后,所有动物分别进行3 d的Morris水迷宫测试,记录其学习和记忆成绩:并运用尼氏染色方法观察海马各区神经细胞数量的变化;同时采用免疫组织化学、RT-PCR方法检测Fyn在海马CA3区的表达变化以及海马Fyn mRNA水平的变化。结果单一应激对照组动物学习记忆成绩受损(P<0.05);复合应激组的学习与记忆成绩优于对照组(P<0.05);与对照组相比,复合应激组和单一应激组动物海马各区神经细胞数量明显增多(P<0.05);Fyn在复合应激组海马CA3区辐射层阳性表达比对照组明显增强(P<0.05),但单一应激对照组的则减弱(P<0.05);同时复合应激组动物的Fyn mRNA水平明显上调(P<0.05),而单一应激对照组的则明显下调(P<0.05)。大鼠的学习记忆成绩与Fyn的表达呈正相关。结论6周慢性复合性应激使大鼠的学习与记忆能力加强;海马各区神经元数量增多;Fyn在海马中的表达和Fyn mRNA转录水平均增加。提示Fyn参与了慢性复合性应激增强大鼠学习记忆能力的过程。
- 李晓恒刘能保张敏海洪小平刘向前孙臣友
- 关键词：慢性复合应激海马酪氨酸激酶MORRIS水迷宫
- 慢性复合应激对学习记忆的影响及cAMP/PKA-CREB信号通路的作用被引量：12
- 2006年
- 目的探讨慢性复合应激对大鼠学习与记忆的影响和cAMP/PKA-CREB信号系统在此机制中的作用。方法将成年雄性Wistar大鼠分为对照组:不作任何处理;慢性单一应激组:每天捆绑6 h,持续6周;慢性复合应激组:每天随机暴露于4种应激原中,持续6周。应激结束后,用Morris水迷宫(MWM)测试大鼠空间学习与记忆成绩;免疫组织化学方法观察大鼠海马PKA-Cβ和磷酸化的CREB的表达水平;应用RT-PCR法半定量检测海马组织内BDNF和Bcl-2的mRNAs水平。结果应激后在MWM寻找平台潜伏期,与对照组(18.9±13.0)s相比,慢性复合应激组(14.2±5.8)s明显缩短(P<0.05),显示其空间记忆明显增强,而慢性单一应激组(20.4±12.8)s无明显差异(P>0.05);慢性复合应激组大鼠海马CA1和CA3区PKA-Cβ的表达以及CA1区和齿状回pCREB的表达明显上调(P<0.05);而慢性单一应激组海马各亚区PKA-Cβ和pCREB的表达无显著性改变(P>0.05)。BDNF和Bcl-2mRNAs的表达水平3组间差别无显著性(P>0.05)。结论慢性复合应激可增强海马依赖的学习与记忆功能,多元的环境刺激可能是其增强的主要原因。PKA-CREB信号通路在其影响机制中发挥了一定的作用。
- 刘能保洪小平李晓恒张敏海孙臣友
- 关键词：慢性复合应激CAMP反应元件结合蛋白海马RT-PCR
